Parámetros hematológicos, concentración de amoníaco y morfología celular en unidades de concentrados de hematíes caninos almacenados en SAG M

Abstract

Objetivos Los eritrocitos sufren algunas alteraciones complejas durante el almacenamiento conocido como \u201clesiones de almacenamiento\u201d (Zehnder et al., 2008). El objetivo de este estudio era investigar la calidad de las unidades de concentrados de hemat\uedes caninos (CHC) almacenados durante 42 d\uedas en SAGM (salino-adenina- glucosa-manitol) evaluando los cambios en los par\ue1metros hematol\uf3gicos, concentraci\uf3n de amon\uedaco y morfolog\ueda celular durante el almacenamiento. Material y metodos 33 unidades de CHC fueron obtenidas de sangre entera usando un sistema de bolsas triples est\ue9riles de recolecci\uf3n humanas y una centr\uedfuga de sangre. Los perros fueron reclutados, con un informe de consentimiento, como donantes de sangre en un programa voluntario de donantes de sangre de la Unidad de Transfusi\uf3n Veterinaria de la Universidad de Mil\ue1n, Italia. Las unidades se almacenaron verticales en un refrigerador especial para almacenamiento de sangre a 4\ub0 C \ub1 2\ub0C. Para asegurar una distribuci\uf3n uniforme de la soluci\uf3n anticoagulante y aumentar la viabilidad de los CHC las bolsas fueron agitadas y mezcladas suavemente tres-cuatro veces a la semana. Una Alicuotade CHC fue tomada inmediatamente antes del almacenamiento (D0) y realizado el recuento autom\ue1tico de las c\ue9lulas sangu\uedneas y un frotis de sangre (para evaluar la morfolog\ueda celular) se realizaron y midieron concentraciones de amoniaco. Cada 2 semanas desde D0 a D42 se extrajeron al\uedcuotas de los CHC y se realizaron las mismas pruebas. Los datos fueron analizados usando MedCalc statistical software (versi\uf3n 14.10.2). Los datos fueron analizados por pruebas de nor- malidad utilizando el test de Kolmogorov-Smirnov y la media de concentraci\uf3n de amoniaco, eritrocitos, recuento de gl\uf3bulos rojos(RBC), recuento de gl\uf3bulos blancos (WBC), Volumen corpuscular medio (VCM), Hematocrito (Ht), an- cho de distribuci\uf3n eritrocitaria (RDW) en cada punto de muestreo se compararon mediante medidas de una manera repetida ANOVA. La correlaci\uf3n de VCM y Ht fue evaluada por el coeficiente de Spearman\u2019s con un valor de p<0.05 fue considerado estad\uedsticamente significativo. Resultados No hubo cambios significativos en el RBC durante el alma- cenamiento (p=1). Todos los dem\ue1s par\ue1metros evaluados mostraron diferencias estad\uedsticamente significativas entre los puntos de tiempo. En particular hubo una incremento significativo en el Ht entre D0 y D42 (p=0,0003), un sig- nificativo y progresivo aumento de VCM y RDW entre los puntos de tiempo, un significante descenso del WBC entre D= y todos los puntos de tiempo (p<0,0001) y un significativo y progresivo aumento de amon\uedaco a trav\ue9s de todos los puntos de tiempo (p < 0,.0001).Una estad\uedstica signifi- cativa y correlaci\uf3n positiva fue evidente entre HT y VCM en D0 (rho = 0,420, p = 0,0150), en D28 (rho = 0,658, p< 0,0001) y D42 (rho = 0,628, p = 0,0002). Cambios en la morfolog\ueda celular fueron observados en todos los pun- tos de tiempo con un incremento significativo de la lisis del RBC y aumento del n\ufamero de macrocitos, esferocitos y esquistocitos en D42. Hab\ueda una lisis casi total del WBC desde D14 y equinocitos, que ya eran abundantes en D0, aument\uf3 ligeramente en n\ufamero hasta D42. Discusi\uf3n Muchos estudios veterinarios han evaluado el almacenamiento de unidades de CHC (Wardrop et al., 1997, Ekiz et al., 2012). En sus estudios no hubo cambios significativos en el contaje del RBC durante el almacenamiento, mientras que Ht y VCM aumentaban, seg\ufan se informa en otro estudio reciente sobre CHC almacenado en SAGM (Ekiz et al., 2012). El aumento del RDW en las unidades de CHC podr\ueda ser una medida de la anisocitosis celular, como se inform\uf3 anteriormente en estudios humanos. El contaje de WBC redujo significativamente con el almacenamiento, y esto fue confirmado por la evalua- ci\uf3n morfol\uf3gica. De hecho, la muy corta vida \ufatil de granulocitos significa que no pueden ser almacenados (Kohn et al., 2012). Finalmente, como informaron Waddell et al. (2001), las concentraciones de amoniaco aumentaron a niveles extremadamente altos en nuestro estudio. En D14 la mayor\ueda de las unidades ten\uedan concentraciones de amoniaco muy por encima del valor normal canino (valor media en D14 260.8 \u3bcg/dl). Conclusiones Nuestros datos preliminares sugieren una lisis celular progresiva de CHC con la liberaci\uf3n de hemoglobina y en consecuencia estas unidades almacenadas suponen un aumento hipot\ue9tico del riesgo de transfusi\uf3n. Puede ser conveniente revisar el tiempo de almacenamiento bolsa en los perros. La ausencia de estudios sobre los efectos del aumento de la concentraci\uf3n de amon\uedaco en CHC caninos en perros con enfermedad hep\ue1tica nos lleva a aconsejar evitar la transfusi\uf3n de unidades de m\ue1s de 14 d\uedas en estos pacientes. Ser\ueda tambi\ue9n interesante, en futuros estudios, evaluar la permanencia de las c\ue9lulas rojas de la sangre transfundidas en los estudios in vivo para evaluar otros indicadores de la calidad del producto. Bibliograf\ueda \u2022 Ekiz E, Arslan M, Akyazi I, Eraslan Uygur E, Ihal Gultekin G, Ozcan M. The effects of prestorage leukoreduction and storage duration on the vitro quality of canine packed red blood cells. Turkish Journal of Veteri- nary Animal Science 2012; 36(6): 711-717. \u2022 Kohn B, Weingart C: Feline transfusion medicine, in: Day MJ, Kohn B, eds: BSAVA Manual of Canine and Feline Haematology and Transfusion Medicine, (2nd ed). John Wiley and Sons Ltd, Gloucester, 2012. \u2022 Waddel LS, Holt DE, Hughes D, Giger U. The effect of storage on ammo- nia concentration in canine packed red blood cells. Journal of Veterinary Emergency and Critical Care 2001; 11(1):23-26. \u2022 Wardrop KJ, Tucker RL, Mugnai K. Evaluation of canine red blood cells stored in a saline, adenine, and glucose solution for 35 days. Journal of Veterinary Internal Medicine1997; 11:5-8. \u2022 Zehnder L, Schulzki T, Goede JS, Hayes J, Reinhart WH. Erythrocyte storage in hypertonic (SAGM) or isotonic (PAGGSM) conservation medium: influence on cell properties. Vox Sangunis 2008; 95(4):280-287