[Ca2+]i changes in guinea pig tracheal smooth muscle cells in culture: effects of Na+ and ouabain

Abstract

The objective of this work was to confirm that the contractile effects of ouabain and Na+-free solutions in guinea pig tracheal rings are associated with increments in the cytosolic free Ca2+ concentration ([Ca2+]i) in cultured tracheal smooth muscle (TSM) cells. Cultured cells were a-actin positive. Histamine (50 mM) and Na+ -free solution elicited a transient increase in [Ca2+]I, while the responses to thapsigargin (1 µM) and ouabain (1 mM) were long lasting. However, carbachol (10, 200, and 500 mM) and high K+-solution produced no effect on [Ca2+]i, suggesting that cultured guinea pig TSM cells display a phenotype change but maintain some of the tracheal rings physiological properties. The transient rise in [Ca2+]i in response to the ce of extracellular Na+ and the effect of ouabain may indicate the participation of the Na+/Ca2+ exchanger (NCX) in the regulation of [Ca2+]i.El objetivo del presente trabajo es el de confirmar que los efectos contráctiles producidos por la ouabaína y la ausencia de Na+ en la solución en anillos de traquea de cobayo, se asocian a incrementos en la concentración libre de Ca2+ citosólico ([Ca2+]i) en células cultivadas de músculo liso traqueal de cobayo. Las células usadas en los experimentos eran positivas para a-actina de músculo liso. La histamina (50 µM) y las soluciones libres de Na+ producen un incremento transitorio en la [Ca2+]i mientras que la thapsigargina (1 µM) y la ouabaína (1 mM) dan lugar a incremento de larga duración. Sin embargo, el carbacol (10, 200 y 500 µM) y soluciones con alta concentración de K+ no producen cambios en la [Ca2+]i . Estos resultados sugieren que, en nuestras condiciones experimentales, las células cultivadas de músculo liso traqueal presentan cambios en su fenotipo, pero conservan algunas de las propiedades fisiológicas observadas en los anillos traqueales. El incremento transitorio de la [Ca2+]i producido por la ausencia de Na+ extracelular y el efecto de la ouabaína sugieren la participación del intercambiador Na+/Ca2+ (NCX) en la regulación de la [Ca2+]i