Mikroba endofit merupakan mikroorganisme yang hidup di dalam jaringan tanaman inang. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengisolasi, menguji aktivitas antibakteri dan mengkarakterisasi fungi endofit yang diperoleh dari daun tanaman Galing-Galing (Cayratia trifolia [L.]). Proses isolasi dilakukan dengan cara menempelkan potongan daun tanaman Galing-Galing yang telah disterilisasi permukaannya dengan alkohol 70% dan NaOCl 5,3% pada media Potato Dextrose Agar. Terdapat 6 fungi endofit yang dapat diisolasi dari daun tanaman Galing-Galing. Fungi endofit yang diperoleh diuji aktivitas antibakterinya terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan metode inokulasi langsung menggunakan media Plate Count Agar. Dari hasil pengujian didapatkan hasil adanya aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan rasio DHP pada CI 1 sampai CI 5 berturut-turut sebesar 1.22;1.14;1.42;1.17 dan 1,54. Karakterisasi dilakukan pada isolat yang meliputi pengamatan makroskopis, mikroskopis dan uji biokimia (uji hidrolisa amilum, uji hidrolisa kasein, uji hidrolisa gelatin dan uji hidrolisa lemak). Berdasarkan hasil determinasi isolat, diduga CI 1, CI 2 dan CI 5 fungi endofit termasuk dalam kelas Deuteromycetes, sedangkan pada CI 3 dan CI 6 termasuk dalam kelas Zygomycetes, dan pada CI 4 termasuk dalam kelas Ascomycetes