Obtención y caracterización de una nueva estructura coclear con capacidad adyuvante derivada del proteoliposoma de Vibrio cholerae O1

Abstract

Los adyuvantes son componentes esenciales de las formulaciones vacunales. Sin embargo, pocos han sido licenciados para su uso en humanos y solo la subunidad B de la toxina de cólera ha sido aprobada por vía mucosal. El objetivo de este trabajo es obtener una nueva estructura coclear a partir del proteoliposoma Vibrio cholerae O1 y demostrar que su aplicación mucosal tiene efecto adyuvante sobre los antígenos que componen dicho proteoliposoma y el polisacárido Vi de Salmonella Typhi. De esta forma, se identificaron fosfolípidos y proteínas en un extracto de membrana externa derivado de V. cholerae O1 que, junto al lipopolisacárido, forman vesículas que se denominaron como proteoliposoma de V. cholerae O1 (PLc). El PLc se enfrentó al catión divalente calcio a través de un proceso de diálisis rotacional continua y se obtuvo una nueva microestructura multilaminar y tubular con características semejantes a una estructura coclear que se denominó como Adyuvante Finlay Cocleato 2 (AFCo2).Durante este proceso no se afectó la identidad e inmunogenicidad de los principales antígenos que se identificaron en el PLc. Al contrario, la evaluación de la respuesta inmune en ratones Balb/c que se inmunizaron por vía intranasal (IN), reveló que el AFCo2 fue mas inmunogénico a nivel mucosal que el PLc. Finalmente, se demostró el efecto adyuvante del AFCo2 sobre el polisacárido Vi de S. Typhi cuando se mezclaron y coadministraron por vía IN a ratones Balb/c. En general estos resultados demuestran que el AFCo2 puede ser obtenido a partir del PLc y ser utilizado como un adyuvante de aplicación mucosal