Fricke, H.

Gadow, A.

Lösch, J.

Scriba, Peter Christian

Strasburger, C. J.

Wood, W. G.

German

Universität München: Elektronischen Publikationen

Solid Phase Antigen Lumineszenz Technik (SPALT) für die Bestimmung von Gentamycin im Serum

Open Access LMU

Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry Zeitschrift für Klinische Chemie und Klinische Biochemie Gemeinsames Organ der Deutschen, der Niederländischen, der Österreichischen und der Schweizerischen Gesellschaft für Klinische Chemie Editors in Chief Verantwortliche Herausgeber Johannes Büttner, Hannover Ernst Schütte, Berlin Managing Editor Schriftleiter Friedrich Körber, Berlin Special Editor for IFCC Recommendations Nils-Erik Saris, Helsinki Editors Herausgeber Hugo Aebi, Bern Heinz Breuer, Bonn Johannes Büttner, Hannover Hans Joachim Dulce, Berlin Jörg Frei, Lausanne Wolfgang Gerok, Freiburg Helmut Greiling, Aachen Advisory Board unter Mitarbeit von Klaus Borner, Berlin Ec1<hart Buddecke, Münster Hans-Christoph Curtius, Zürich Manfred Doss, Marburg Hartmut Dost, Gießen Hans Faillard, Saarbrücken Günther Fuchs, Berlin Erich Gladtke, Köln Heinz-Werner Goedde, Hamburg Erwin Hansert, München w DE G_ Walter de Gruyter • Berlin • New York J. Clin. Chem. Clin. Biochem. Volume 20, Number 7, July 1982, pages 473-532 Erich Kaiser, Wien Esso Johannes van Kampen, Groningen Hermann Mattenheimer, Chicago Ernst Schütte, Berlin Dankwart Stamm, München Hansjürgen Staudinger, Freiburg Otto Wieland, München Hans Ludwig Krüskemper, Düsseldorf Georg Löffler, Regensburg Mathias M. Müller, Wien Kurt Oette, Köln Jean-Paul Persijn, Amsterdam Ladislaus Röka, Gießen Ellen Schmidt, Hannover Ivar Trautschold, Hannover • Gerhard Uhlenbruck, Köln Universität* Bibliothek München Attention before copying! Do you photocopy articles from this periodical? If so, have you made certain that you are not violating the legal copyright regulations and making yourself liable to prosecution? According to copyright law it is only permissible to make a few copies of individual articles for personal use. Reproduct ion of articles for commercial use by an industrial enterprise is subject to charge. 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Die Methode benutzt festphasen-gebun-denes Antigen, das, im Überschuß angeboten, alle nicht von der Probe besetzten Bindungsstellen des „ersten" antigenspezifischen Antikörpers bindet. So bedingt die Menge des gesuchten Antigens eine reziprok korrelierende Menge „ersten" Antikörpers, die an die feste Phase (Zellulose) gebunden ist. Im folgenden Schritt wird ein Überschuß Pyruvatkinase-markierten „zweiten" Antikörpers mit den Festphase-Antigen-„erster" Antikörper-Komplexen reagiert und nach Waschen die Pyruvatkinase-Aktivität bestimmt. Dies geschieht unter Verwendung eines kommerziell erhält-lichen Luciferin-Luciferase-Gemisches (LKB ATP Monitoring Reagenz). Nach Zugabe von ADP/PEP als Substrat der Pyruvatkinase kann die Kinetik der ATP-Bildung im Luminometer verfolgt werden. Die Ge-schwindigkeit der Lichtsignalerhöhung in mV/Minute wird aus einer 30 Sekunden dauernden Messung errech-net und an Stelle der „Counts" zur Berechnung der Konzentrationswerte verwandt. Für alle Antigene sind der markierte 2. Antikörper sowie das Meßprinzip identisch, leicht zu handhaben und für die weitere Entwicklung leicht automatisierbar. Die Präzision der Methode ist der des RIA vergleichbar: Intra-Assay V.K. = 6.4% (n = 20), Inter-Assay V.K. = 9.8% (n = 15) für eine Probe von 3.64 mg/1. Für Paral-lelbestimmungen ergibt sich eine zufriedenstellende Korrelation von SPALT und RIA: r = 0.928, n = 28. Diese Studie wird erweitert. Literatur 1. Wood, W. G. & Sokolowski, G. (1982) in: Radioimmunoassay in Theory & Practice - a Laboratory Handbook, Schnetztor Verlag Konstanz, Kapitel 10. Prof. Dr. P. C. Scriba Klinik für Innere Medizin Med. Hochschule Lübeck Ratzeburger Allee 160 D-2400 Lübeck 1 J. Clin. Chem. Clin. Biochem. / Vol. 20, 1982 / No. 9 

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