Kuantifikasi bakteri koli sangat penting untuk kontrol kualitas air. Prosedur standar yang umum digunakan adalah metode tabung ganda yang mengukur indeks MPN / JPT. Metode ini cukup spesifik tetapi menghabiskan waktu karena

memerlukan pemurnian kultur bakteri melalui 3 tahapan uji dan menggunakan lebih dari satu media (substrat).

Penggunaan substrat kromogenik-fluorogenik menghasilkan prosedur uji yang sederhana, cepat, spesifik, sensitif, dan akurat. Ensim yang spesifik hanya dimiliki oleh bakteri uji akan menghidrolisa substrat khromogenik-fluorogenik, melepaskan senyawa khromo-gen yang berwarna atau senyawa fluorogen yang berfluorosensi. Dengan media ini kelom pok bakteri koli (koli total) maupun E coli (koli tinja) dapat diidentifikasi secara spesifik melalui pengujian simultan

dalam waktu 24 jam. Selain untuk kontrol kualitas air dan makanan (susu, daging atau produk olahannya), metode ini juga digunakan untuk mendeteksi cemaran mikroba dalam

produk farmasi dan kosmetik. Berbagai mikroba juga dapat identifikasi dengan metode ini antara lain Entero-cocci, Salmonella, Vibrio, Neisseria dan Candida

Wahjuningsih, Endang

Indonesian

University of Surabaya Institutional Repository

Endang Wahjuningsih4 4SUBSTRAT KHROMOGENIK-FLUOROGENIKPADA UJI CEMARAN KOLI DALAM AIREndang WahjuningsihFakultas Farmasi Universitas SurabayaAbstrakKuantifikasi bakteri koli sangat penting untuk kontrol kualitas air. Prosedur standaryang umum digunakan adalah metode tabung ganda  yang mengukur indeksMPN / JPT. Metode ini cukup spesifik tetapi menghabiskan waktu karenamemerlukan pemurnian kultur bakteri melalui 3 tahapan uji dan menggunakanlebih dari satu media (substrat).Penggunaan substrat kromogenik-fluorogenik menghasilkan prosedur uji yangsederhana, cepat, spesifik, sensitif, dan akurat. Ensim yang spesifik hanyadimiliki oleh bakteri uji akan menghidrolisa substrat khromogenik-fluorogenik,melepaskan senyawa khromo-gen yang berwarna atau senyawa fluorogenyang berfluorosensi. Dengan media ini kelom pok  bakteri koli (koli total)  maupunE coli (koli tinja) dapat diidentifikasi secara spesifik melalui pengujian simultandalam waktu 24 jam.Selain untuk kontrol kualitas air dan makanan (susu, daging atau produkolahannya), metode ini juga digunakan untuk mendeteksi cemaran mikroba dalamproduk farmasi dan  kosmetik. Berbagai mikroba juga dapat identifikasi denganmetode ini antara lain Entero-cocci, Salmonella, Vibrio, Neisseria dan Candida.Kata kunci : kualitas air, bakteri koli, substrat khromogenik-fluorogenikPENDAHULUAN       Pengujian air secara mikrobiologi diperlukan untuk mengukur kualitasproses sanitasi dan derajat kontaminasi cemaran mikroba dalam air. Deteksi dankuantifikasi tidak dilakukan dengan mengukur langsung jumlah cemaran mikrobaUnitas, Vol. 9, No. 2,Maret 2001 - Agustus 2001, 44-564 5Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam Airpatogen (penyebab penyakit) tetapi menggunakan mikroba indikator yaitubakteri golongan koli, streptococci tinja atau klostridia pereduksi sulfat (Sloat& Ziel, 1991).Bakteri koli merupakan anggota familia enterobacteriaceae, terbagi dalamkelompok koli non tinja yang terdapat di tanah a.l. Enterobacter sp dan kelompokkoli tinja penghuni usus yaitu E coli. Karena kelompok bakteri ini banyakdijumpai dalam air, mampu bertahan hidup dalam air yang sangat kotor, sertadapat di identifikasi secara spesifik, maka kelompok bakteri koli digunakansebagai indikator utama cemaran mikroba dalam air.U.S. Environmental Protection Agency (USEPA) tahun 1975 telahmetetapkan standar kualitas air minum yang digunakan untuk konsumsimasyarakat. Peraturan ini menga tur batas minimum sampel yang harus diambilper bulan dan batas maksimum kandungan koli per 100 ml air minum yang sudahdiolah (siap minum).  Pada tahun 1983, WHO juga telah menetapkan pedomankualitas air minum yang digunakan di berbagai negara.Prosedur pengujian kualitas air yang umum digunakan memerlukanpemurnian kultur bakteri yang dilakukan secara bertahap dalam beberapa mediasehingga perlu waktu yang panjang. Telah dikembangkan metode barumenggunakan substrat sintetik khromogenik-fluorogenik. Pada metode inisubstrat akan dihidrolisa oleh ensim spesifik dari bakteri uji, aktivitas ensimatikdiukur dari adanya warna dan/atau fluorosensi (Dahlen & Linde,1973; Edberg etall, 1990; Manafi & Kneifel, 1991).Dengan metode ini proses identifikasi dan kuantifikasi mikroba dapatdilakukan secara cepat dan akurat pada media primair. Kombinasi substratkhromogenik-fluorogenik dapat mengeliminasi kebutuhan sub kultur danrangkaian uji biokimia. Peningkatan kemampuan ini sangat berharga untukmonitoring sanitasi  dan kontrol kualitas mikrobiologi air maupun makanan.Endang Wahjuningsih4 6 MEDIA STANDAR PENGUJIAN BAKTERI KOLIMekanisme pengujian kelompok bakteri koli didasarkan pada karakterspesifik yang umum dimikili oleh bakteri-bakteri dalam kelompok koli, untukmembedakannya dengan  bakteri-bakteri lainnya yang tidak termasuk dalamkelompok koli. Penumbuhan kultur &  identifikasi spesifik juga dilakukan untukmembedakan bakteri koli dengan anggota familia Enterobiaceae lainnya.   Kelompok bakteri koli menghasilkan ensim â-D-Glucosidase yangberfungsi sebagai katalisator hidrolisa laktosa membentuk gas, asam dan aldehid.Gas yang terbentuk dapat diamati dengan tabung Durham, sedangkan asamatau aldehid dengan indikator. Pada pe warnaan Gram kelompok bakteri inimempunyai sel berbentuk batang, Gram negatif, dan tidak membentuk spora(Greenberg, Clesceri & Eaton, 1992).Pelaksanaan pengujian bakteri pada umumnya masih menggunakan lebihdari satu tahapan uji dengan lebih dari satu macam media. Pengujian diawalidengan tahapan penum buhan selektif untuk memisahkan bakteri koli dari bakteri-bakteri lainnya. Setelah kultur bakteri tumbuh optimum baru bisa dilakukanpenumbuhan dalam media yang dapat mendeteksi bakteri koli secara spesifik.Metode pengujian yang umum digunakan adalah metode fermentasitabung ganda &  metode filtrasi. Metode fermentasi tabung ganda (MPN / JPT)mengukur kuantitas bakteri koli melalui perhitungan jumlah perkiraan terdekat(JPT) atau  Most Probable Number (MPN). Metode filtrasi mengukur langsungdensitas bakteri koli. Kedua metode ini dapat digunakan untuk mengukur jumlahcemaran koli total maupun koli tinja (E coli).Beberapa media standar yang umum digunakan pada pengujian bakterikoli dalam air (Greenberg, Clesceri & Eaton, 1992; Merck,1996) dapat dilihat padatabel 1.  Selain kandungan sumber nutrisi media juga mengandung bahan-bahan4 7Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam Airyang dapat menghambat per tumbuhan mikroba non koli. Identifikasi bakteri kolidiamati dari terbentuknya sebagai hasil hidrolisa ensimatis laktose. Beberapamedia juga mengandung bahan-bahan spesifik seperti pewarna atau indikatoruntuk mengidentifikasi asam atau aldehid.Tabel 1Media Standar Pengujian Bakteri KoliWalaupun media-media standar di atas mempunyai karakter yang spesifik, metodepengujian yang umum digunakan (metode fermentasi tabung ganda atau metodeMPN) memerlukan lebih dari satu tahapan uji dan menggunakan lebih dari satumedia uji.  Metode filtrasi dapat dilakukan dalam satu tahapan uji dan satu mediabila jumlah cemaran yang ada tidak terlalu tinggi.Endang Wahjuningsih4 8A.  Pengujian Koli Dengan Metode MPNTahap I - Pengujian perkiraanTahap ini merupakan uji pendahuluan untuk memperkirakan ada/tidaknya bakterikoli di dalam sampel air. Suatu seri pengenceran sampel ditumbuhkan dalammedia lactose broth atau lauryl tryptose broth (lauryl sulfat broth) pada 35°C. Ujidinyatakan positif bila terbentuk gas hasil hidrolisa laktosa oleh ensim bakteridari kelompok koli.Beberapa bakteri non koli yang termasuk dalam kelompok “lactose positivebacteria”  juga mempunyai ensim yang dapat menghidrolisa laktosa.  Medialauryl tryptose broth mengandung senyawa lauryl sulfat yang berfungsi untukmenghambat pertumbuhan mikroba non koli. Dapar fosfat dan kandungan nutrisitinggi yang ada dalam media ini akan mempercepat pertumbuhan bakteri koli danmeningkatkan pembentukan gas. Keunggulannya ini membuat media lauryltryptose broth lebih direkomendasikan untuk pengujian koli.Tahap II - Pengujian penegasanTahap kedua berfungsi untuk memastikan bahwa koloni yang tumbuh murnibakteri koli. Kultur positif dipindah ke media BGLB, inkubasi untuk koli totalpada 35°C dan untuk E coli pada 44°C. Bakteri non koli dihambat pertumbuhannyaoleh bile dan brilliant-green yang ada dalam media. Uji dinyatakan positif  bilaterbentuk gas dalam tabung uji.Tahap III - Pengujian lengkapKultur dari tabung positif dipindah ke media Endo Agar inkubasi pada 35°C.Sodium sulfite dan fuchsin menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif. Reaksifuchsin dan aldehid akan membentuk warna merah spesifik, pada E coli disertaikilau hijau-metalik.4 9Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam AirTahap ini juga dapat dilakukan dengan media EMB Agar. Pertumbuhan bakteriGram positif dihambat oleh pewarna, kombinasi lactose-sucrose digunakan untukmembedakan kelompok lactose-sucrose negative bacteria (salmonella & shi-gella) yang tampak transparan & tak berwarna dengan kelompok koli (lactosepositive bacteria) yang tampak kehijauan dengan inti gelap (biru-hitam) dankilau metalik.Untuk memastikan kemurniannya koloni dipindah ke lactose broth untukmengamati adanya pembentukan gas, dan ke nutrient agar untuk mengamatiadanya bakteri berbentuk batang, Gram negatif, dan tidak membentuk sporayang merupakan ciri-ciri spesifik kelompok bakteri koli.B.  Pengujian Koli Dengan Metode FiltrasiMetode filtrasi  (Membrane Filter Technique) mengukur langsung densitasbakteri koli dalam air. Sampel air dilewatkan pada membran filter bakteri kemudianmembran ditempatkan pada media m-Endo Agar LES suhu 35°C.  Pertumbuhanmikroba non koli  dihambat oleh lauryl sulfate & deoxycholate.  Koloni koli akanberwarna merah hasil reaksi dengan fuchsin, pada E coli dan Enterobacteraerogenes disertai kilau metalik (fuchsin-sheen).Untuk memastikan adanya koli tinja kultur ditumbuhkan dalam media m-FC Agar pada suhu 44°C. Dalam media yang mengandung rosolic acid ini, bakteriE coli akan menghasilkan warna biru dari indikator methylen blue / aniline blue.Metode filtrasi dapat digunakan untuk pengujian sampel dalam jumlah/volume besar, hasil langsung menunjukkan densitas bakteri, waktu pengujianlebih singkat, dan mempunyai tingkat keterulangan tinggi. Metode ini umumdigunakan dalam monitoring kualitas air sumber & pengolahan air minum. Airlimbah harus melalui perlakuan pendahuluan untuk mengurangi kekeruhannyabila akan dilakukan pengujian dengan metode filtrasi.Endang Wahjuningsih5 0SUBSTRAT KHROMOGENIK-FLUOROGENIKKomisi Nasional American Public Health Association telah memberikanpengesahan bagi penggunaan substrat khromogenik untuk pengujian cemaranmikroba dalam air pada tahun 1992 (Greenberg, Clesceri & Eaton, 1992). Tidakseperti metode standar yang memerlukan adanya senyawa kimia dalam mediauntuk menghambat pertumbuhan mikroba non koli, metode ini menggunakannutrisi yang lebih selektif dan spesifik.Pada dasarnya substrat khromogenik dan fluorogenik bekerja berdasarkankemampuannya untuk mendeteksi  ensim-ensim spesifik  yang dihasilkan olehbakteri-bakteri yang ada dalam kelompok koli maupun yang hanya dihasilkanoleh E coli. Ensim spesifik dari bakteri ini akan menghidrolisa substrat danmelepaskan aglikon yang bersifat khromogen (berwarna) atau fluorogen(berfluorosensi). Ensim spesifik yang dapat dideteksi dengan substrat khromogenik -fluorogenik a.l : â-D-Galactosidase pada kelompok bakteri koli (Edberg, Allen &Smith, 1991),  â-D-Glucuronidase pada bakteri E coli (Dahlen & Linde, 1973),aminopeptidase pada familia Enterobacteriaceae (Giammanco & Pignato, 1984)dan 4-methylumbelliferyl-N-acetyl-â-galactosaminide pada Candida (Dalton,Haldane, MacDonald, 1989).Umumnya substrat khromogenik merupakan turunan fenol, dan substratfluorogenik merupakan turunan coumarin (Manafi, Kneifel & Bascomb, 1991)terdiri dari:1. Pewarna fluorogenik, yang akan meningkatkan fluorosensi akibat adsorbansipewarna fluoroscent pada DNA atau protein sel bakteri. Contoh: â -aniline-1- naphthalene-sul- phonic acid (ANS) dan Acridine-orange.5 1Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam Air2. Indikator pH-fluoroscent, yang merubah intensitas fluorosensi atauabsorbansi indika- tor pH, akibat adanya aktivitas ensimatik. Contoh: Acri-dine dan 7-Hydroxycoumarin.3. Ensim-substrat kompleks. Ensim bakteri akan menghidrolisa substrat danmelepaskan yang dideteksi dari terbentuknya warna atau fluorosensi.Contoh: o- atau p-Nitrophe- nol; 5-bromo-4-chloro-3-indolyl- ; 4-Methylumbelliferone-.UJI KHROMOGENIK-FLUOROGENIK UNTUK KOLIPengujian koli total didasarkan pada aktivitas ensim  â-D-Galactosidase(â-Gal) yang dimiliki oleh kelompok bakteri koli  dan dapat dideteksi dengansubstrat:  (a) o-nitro-phe-nyl-â-D-galactopyranoside  (ONPG),  (b) 6- bromo-2-naphtyl-galactopyranoside (BNG), (c) 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-â-D-galactopyranoside (X-GAL), dan (d) 4-methylumbel liferyl-â-D-galactopyranoside(MUGA).Pengujian E coli didasarkan pada aktivitas ensim â-D-Glucoronidase(GUD) yang terdapat pada 96-98% strain E coli, kecuali strain 0157: H7 (Killian &Bulow, 1976; Edberg & Kontnick, 1986). Substrat yang dapat digunakan adalah:(a) p-nitro-phenyl-â-D-glucu- ronide (PNPG),  (b) 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-â-D-glucuronide (X-GLU), dan (c) 4-methyl-umbelliferyl-â-D-glucuronide (MUG).Tabel 2Substrat Khromogenik - FluorogenikEndang Wahjuningsih5 2Penggunaan X-GAL atau MUGA lebih direkomendasikan untukdigunakan pada pengujian bakteri  koli dalam air (Manafi, Kneifel & Bascomb,1991), karena turunan nitro-fenolik cenderung berdifusi ke dalam media agarpadat.Media uji dengan substrat khromogenik–flurogenik untuk pengujiankualitas air antara lain Colilert® yang mengandung ONPG dan MUG.  Pertumbuhanbakteri non koli dapat dihambat,  ONPG terhidrolisa oleh  â-Gal dari bakteri kolimembentuk warna kuning, sedangkan MUG terhidrolisa oleh GUD dari bakteri Ecoli menimbulkan fluorosensi biru  (Covert et all, 1989; Edberg, Ludwig & Smith,1991).Chromocult® Coliform Agar mengandung kombinasi salmon-Gal dan X-Glu. Keberadaan bakteri koli terlihat dari warna salmon-merah hasil hidrolisaSalmon-GAL. Bakteri E coli akan menghidrolisa Salmon-GAL dan X-GLUmembentuk koloni yang berwarna biru gelap violet. Tergitol menghambatpertumbuhan bakteri non koli (Frampton, Restaino & Blaszko, 1988; Manafi &Kneifel, 1989).Manafi & Kneifel (1989) meneliti kombinasi substrat khromogenik danfluorogenik untuk pengujian simultan koli total dan koli tinja dalam air, terdiridari campuran ONPG untuk koli dan MUG untuk E coli,  campuran X-GAL untukkoli dan MUG untuk E coli, serta campuran MUGAuntuk koli dan PNPG untukE coli.  Hasil terbaik diperoleh pada campuran substrat khromogenik-fluorogenikX-GAL dan MUG di dalam Endo agar atau lauryl tryptose broth. Kombinasioptimum diperoleh pada perbandingan  X-GAL : MUG = 60µg/ml : 70µg/ml untuklauryl tryptose broth dan 50µg/ml : 60µg/ml untuk endo agar.Modifikasi lauryl tryptose broth oleh Manafi & Ossmer menjadiFluorocult® LMX -Broth menggunakan kombinasi X-GAL dan MUG-LST5 3Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam Airterbukti efektif untuk pengujian simultan bakteri koli dan E coli. Seluruh kelompokkoli tampak berwarna biru-hijau dan E coli dapat dideteksi dari adanya fluorosensibiru dalam waktu 24 jam (Ossmer, 1993).Ossmer (1996)  membandingkan penggunaan metode filtrasi  dengan m-FC Agar dan m-Endo Agar, terhadap Chromocolt Coliform Agar yang mengandungkombinasi substrat Salmon-GAL & X-GLU.  Koloni bakteri koli akan berwarnasalmon-merah dari hidrolisa Salmon-GAL, sedangkan X-GLU akan mewarnaikoloni E coli menjadi biru gelap-ungu.Dari 100 sampel yang diamati pada media m-FC Agar tidak satupun yangmenunjuk kan hasil positif. Pada media m-Endo Agar 13 sampel positifmengandung bakteri koli & teridentifikasi sebagai E coli, sedangkan pada mediaChromocult Coliform Agar terdapat 34 sampel positif mengandung bakteri kolidan 30 diantaranya mengandung E coli.       Hasil ini menunjukkan bahwa penggunaan substrat khromogenik lebihsensitif dibandingkan substrat standar pengujian air dengan metode filtrasi.Sampel positif yang ditemukan pada penggunaan Chromocult Coliform Agartidak terdeteksi oleh media m-FC Agar dan hanya terdeteksi < 50% pada mediam-Endo Agar.KESIMPULANKehadiran bakteri koli, khususnya E coli, umum digunakan sebagaiindikasi cemaran tinja dalam air. Oleh karena itu deteksi dan kuantifikasi kelompokbakteri ini sangat penting pada monitoring sanitasi maupun pengujian kualitasair, makanan, produk farmasi & kosmetik serta penegakan diagnosa klinis.Kemampuan untuk mendeteksi secara spesifik ensim eksklusif yangdihasilkan oleh bakteri pada penggunaan substrat khromogenik dan fluorogenik,Endang Wahjuningsih5 4menghasilkan terobosan besar bagi pengujian mikroba. Metode ini terbukti lebihsensitif, spesifik, dapat dilakukan secara sederhana, dalam waktu singkat, danmenghasilkan pengukuran yang lebih akurat. Walaupun media yang menggunakan substrat khromogenik-fluorogeniklebih mahal dibandingkan media-media standar lainnya, perlu dipertimbangkanadanya penghematan waktu, jumlah media dan peralatan yang dibutuhkanmaupun peningkatan sensitivitas uji. Proses pengujian yang pendek akan sangatdiperlukan untuk efisiensi proses produksi.Sebagian besar mikroba yang ada didalam air berasal dari familiaenterobacteriaceae. Beberapa diantaranya (salmonella, shigella) merupakanmikroba patogen penyebab penya kit atau penghasil toksin. Penggunaan substratkhromogenik-fluorogenik juga telah dikembangkan untuk pengujian familiaEnterococci (Ellner et all, 1985),  Shigella sp (Massenti, Nastasi & Scarlata, 1987),Salmonella sp (Aquirre et all, 1990) dan lain-lain.DAFTAR PUSTAKAAquirre PM et all, 1990: Rapid fluorescence method for screening Salmonella spfrom en teric differential agars. J. Clin. Microbiol. 28:148-149.Covert TC et all, 1989: Evaluation of the Autoanalysis Colilert® test for detec-tion and enumeration of total coliforms. Appl. Environ. Microbiol.55:2443.Dahlen G & Linde A, 1973: Screening plate method for detection of bacterial â-glucoroni dase. Appl. Microbiol. 26:863-866.Dalton MT, Haldane DJM & McDonald J, 1989: Rapid identification of Candidaalbicans using 4-methylumbelliferyl-N-acetyl-â-galactosaminide. Diagn.Microbiol. Infect. Dis. 12: 521-523.5 5Substrat Khromogenik-Fluorogenik Pada Uji Cemaran Koli Dalam AirEdberg SC, Allen MJ & Smith, DB, 1991: Defined substrate technology methodfor rapid and simultaneous enumeration of total coliforms and Escheri-chia coli from water: Collaborative study. J. Assoc. Offic. Anal. Chem.74:526.Edberg SC & Kontnick CM, 1986: Comparisson of â-glucoronidase-based sub-strate sys- tems for identification of Escherichia coli. J. Clin. Microbiol.24: 368-371.Edberg SC, Ludwig F & Smith DB, 1991: The Colilert® system for total coliformsand Escherichia coli. American Water Works Research Foundation,Denver, Colorado.Ellner et all, 1085: Preliminary evaluation of a rapid colorimetric method for thepresump tive identification of a group A streptococci and enterococci.J. Clin. Microbiol. 22:880-881.Frampton EW, Restaino, L & Blaszko N, 1988: Evaluation of the β-glucuronidasesub - strate 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Glucuronide (X-GLUC) ina 24-hour direct platting method for Escherichia coli. J. Food Prot.51:402-404.Gianmanco G & Pignato S, 1984: Detection of aminopeptidases in Enterobiaceaeby three simple chromogenic tests. Ann. Mecrobiol. (Paris) Sect. B135:341-346.Greenberg AE, Clesceri LS & Eaton AD, 1992: Standar methods for the examina-tion of water and wastewater. American Public Helath Association,American Water Works Association & Water Environment Federation,Washington DC.Killian M & Bulow P, 1979: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detectionof bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84:245-251.Endang Wahjuningsih5 6Manafi M & Kneifel W, 1989:  A combined  chromogenic-fluorogenic medium forthe simultaneous detection of total coliform and E coli in water. Zbl.Hyg. 189:225-234.Manafi M & Kneifel W, 1991: Fluorogenic and chromogenic substrates – Apromising tool in microbiology. Acta Microbiol. Hung. 38(3-4): 293-304.Manafi M, Kneifel W & Bascomb S, 1991: Fluorogenic and chromogenic sub-strates used in bacterial diagnostics. Microbiol. Reviews 55(3):335-348.Massenti MF, Nastasi A & Scarlata G, 1987: A new chromogenic test for thedetection of urokinase in the genus Shigella. Microbiologica 10:331-333.Merck, 1996: Microbiology Manual. Merck. KgaA Darmstadt.Ossmer, 1993: Simultaneous detection of total coliforms and E coli – Fluorocult®LMX Broth. International Symposium Food microbiology and Hygienein Rhine.Ossmer R, 1993: Simultaneoul detection of total coliforms and E coli withChromocult® Coliform Agar. Health-related Water MicrobiologySymposium in Spain.

SUBSTRAT KHROMOGENIK-FLUOROGENIK PADA UJI CEMARAN KOLI DALAM AIR

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

University of Surabaya Institutional Repository