Takeda, Kazuki

タケダ, カズキ

武田, 和樹

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要 約 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 内容 の要 旨 ） 
主 論 文 題 名 
 先天性側弯症（congenital scoliosis: CS） は椎体の形態異常に起因する側弯症で、発症
頻度は0.5-1/1000出生である。CSは急速に進行し手術適応となる症例が多いため、早期診
断が極めて重要である。近年、CSに対する遺伝子解析が進んでおり、TBX6遺伝子の機能
喪失型変異と3つの一塩基多型（single nucleotide polymorphism: SNP）（rs2289292、
rs3809624、rs3809627）から成るハプロタイプのヘテロ接合性が、中国人CS症例の約
10％に関与しているとの報告がなされた。一方、TBX6遺伝子の片アレルのみの機能喪失
型変異は、CSより重篤な表現型を呈する骨系統疾患、常染色体優性型脊椎異骨症 
（spondylocostal dysostosis: SCD）の原因遺伝子として報告されており、TBX6関連CS 
（TBX6-associated CS: TACS）の発症形式には未だ不明な点が多い。また、TBX6遺伝子
変異として、フレームシフト変異などの機能喪失型変異だけではなく、複数の新規ミス
センスバリアントも同定されているが、それらのCS発症への関与は未だ不明である。本
研究の目的は、日本人CSにおけるTACSの頻度を明らかにし、同定されたバリアントの機
能解析を行うことでその有害性を評価し、TACSの遺伝型と表現型の関連性を明らかにす
ることである。 
 日 本 人CS 94例 に 対 し、TBX6の 構 造 異 常 をcopy number assayとmicroarray-based 
comparative genomic hybridizationを用いて検出した。TBX6の変異とリスクハプロタイプ
はサンガー法により確認した。同定されたミスセンスバリアントに対して変異予測プロ
グラムを用いて変異の有害性を検討し、遺伝子発現に及ぼす影響をLuciferase assayによ
り検討した。さらにTBX6変異の有害性と表現型の関連およびTACSの発症形式を検討し
た。94例中5例にTBX6遺伝子を含む染色体16p11.2の欠失を、3例に新規ナンセンス変異 
（p.Trp233*）およびフレームシフト変異（p.D312Efs*187、p.M53Wfs*41）を認めた。
すべての変異がデータベースに登録されていない新規の変異であった。TBX6変異を有す
る8例全例が、変異がない側のアレルにリスクハプロタイプ（rs2289292、rs3809624、
rs3809627）を有しておりTACSであると診断した。日本人CS症例の約9％がTACSであ
り、東アジア人ではTBX6の遺伝子診断がCSの早期診断に有用であること明らかにした。
また、中国人および日本人CSで同定された14のミスセンスバリアントのうち、変異予測
プログラムで有害性が高いと判定されたのは5バリアントであった。Luciferase assayの結
果、日本人CSで認められたミスセンスバリアント（c.333G>T）のみが著明な転写活性の
低下を認め、一部のミスセンス変異は機能喪失型変異でCS発症に関与していることを明
らかにした。さらに、CSとSCDで同定されたTBX6タンパクの異常延長を伴うフレームシ
フト変異が、遺伝子発現に及ぼす影響をco-transfection Luciferase assayにより検討したと
ころ、正常TBX6タンパクに対してdominant negativeに作用し、転写活性を著明に低下さ
せた。同変異を有するCS症例は、多発する椎体の形態異常および肋骨癒合を有してお
り、SCDの表現型と類似していたことから、CSとSCDはTBX6遺伝子関連の同一疾患の可
能性が非常に高いと考えられた。 
 本研究は、これまで原因が不明とされてきたCSに対する日本初の大規模な遺伝子解析
であり、今後TBX6の遺伝子検査により、CSの早期診断、早期の疾患特異的な治療が可能
になると考えられる。 
武 田 和 樹 
Compound Heterozygosity for Null Mutations and a Common Hypomorphic Risk Haplotype 
in TBX6 Causes Congenital Scoliosis  
（TBX6遺伝子の機能喪失型突然変異とリスクハプロタイプのヘテロ接合性が先天性側弯 
 症を引き起こす）  


TBX6 idenshi no kino soshitsugata totsuzen heni to risuku hapurotaipu no hetero setsugosei ga sentensei sokuwansho o hikiokosu

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TBX6 idenshi no kino soshitsugata totsuzen heni to risuku hapurotaipu no hetero setsugosei ga sentensei sokuwansho o hikiokosu

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