Introduction: We investigated the effects of apple procyanidins (Pcy), oligomers of catechins and epicatechins on Fas
receptor expression and function in human colon adenocarcinoma cells (SW480) and in their derived metastatic cells
(SW620).
Methods: Pcy were characterized by reverse-phase HPLC. Cell death, Fas proteins, DNA fragmentation, and mitochondrial
membrane potential were analyzed by flow cytometry. Fas mRNA was analyzed by RT-PCR in real time.
Results: Pcy up-regulated the expression of the Fas receptor at the cell surface of both cell lines but activated Fas gene
transcription only in SW620 cells. In SW480 cells, Pcy combined with Fas agonist CH-11 enhanced Fas-mediated apoptosis
involving the loss of mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation, which were abrogated by the antagonist
antibody of Fas receptor, the anti-Fas ZB4. On the contrary, in SW620 cells, CH-11 was not able to enhance Pcy-triggered
apoptosis indicating that Fas receptor-mediated apoptosis was not activated in these cells despite an up-regulation of Fas
receptor gene expression. However, it was observed in SW620 cells that Pcy activated the Fas receptor-mediated apoptotic
pathway after a specific blockage of TRAIL-death DR4/DR5 receptors.
Conclusions: The present data showed that Pcy were able to activate the Fas receptor apoptotic pathway in SW480 cells
and favored a cross-talk between TRAIL and Fas receptors in SW620 cells because specific blocking of TRAIL death
receptors favored activation of the Fas receptor-mediated apoptosis. These important data may allow the emergence of new
therapeutic protocols targeting death receptors against resistant metastatic cells. Introducción: Se estudiaron los efectos de procianidinas (Pcy) de manzana, oligómeros de catequinas y epicatequinas
en la expresión y función del receptor Fas en células humanas de cáncer de colon (SW480) y sus derivadas metastásicas
(SW620).
Métodos: Las Pcy se caracterizaron por cromatografía líquida de alta presión (HPLC) en fase-reversa. Se analizaron por
citometría de flujo la muerte celular, la proteína Fas, la fragmentación del ADN y el potencial de la membrana mitocondrial.
Se analizaron los transcriptos de Fas por RT-PCR en tiempo real.Resultados: Las Pcy aumentaron la expresión del receptor
Fas en la superficie celular de ambas líneas celulares pero
la transcripción del gen Fas fue activado transcripcionalmente
sólo en las células SW620. En las células SW480, las Pcy
combinadas con el agonista de Fas CH-11 potenció la
apoptosis mediada por Fas involucrando la pérdida del
potencial mitocondrial de membrana y la fragmentación del
ADN los cuales fueron evadidos por el anticuerpo antagonista
del receptor Fas anti-ZB4. Por el contrario, en las células
SW620, CH-11 no fue capaz de potenciar la apoptosis
activada por Pcy indicando que la apoptosis mediada por el
receptor Fas no fue activada en estas células a pesar del
aumento en la expresión de Fas por regulación a nivel
transcripcional. Sin embargo, se observó en las células SW620
que las Pcy activaron la vía apoptótica mediada por el
receptor Fas después de un bloqueo específico de los receptores
de muerte TRAIL DR4/DR5.
Conclusiones: Estos datos muestran que las Pcy fueron
capaces de activar la apoptosis a través del receptor Fas en las
células SW480 y favorecieron una intercomunicación entre
los receptores TRAIL y Fas en las células SW620 debido a
que el bloqueo específico de los receptores de muerte TRAIL
favoreció la activación de la apoptosis mediada por el receptor
Fas. Estos datos podrían permitir el surgimiento de
nuevos protocolos terapéuticos dirigidos contra receptores
de muerte en células metastásicas resistentes