A pályázati program célja karotintermelő járomspórás gombák, mindenekelőtt a Mucor circinelloides, karotin bioszintézisének módosítása volt rekombináns technikák alkalmazásával. A kutatási program részeként vizsgáltuk a karotin túltermeltetés lehetőségeit, pl. a gén dózis hatás elve alapján, és új, értékes karotinoid származékok (pl. asztaxantin, kantaxantin és más xantofillok) termelésére alkalmas törzseket próbáltunk előállítani és jellemezni. A kutatási program során izoláltuk és részletesen jellemeztük a Rhizomucor miehei HMG-KoA reduktáz, valamint a M. circinelloides izopentenil pirofoszfát izomeráz génjét. A mevalonsav-izoprén bioszintézis út módosítására alkalmas transzformációs vektorokat készítettünk, melyekkel sikerült karotin túltermelő mutánsokat létrehozni, mind autonóm replikatív, mind integratív transzformációval. Bakteriális béta-karotin ketoláz gént gombában expresszáltatva xantofilltermelő M. circinelloides törzseket készítettünk és vizsgáltuk asztaxantin, kantaxantin és más karotinoidok termeltetésének lehetőségét. Mintegy 30 gombafajt reprezentáló természetes izolátumok karotinoid összetételét is elemeztük és új potenciális termelő mikrobákat azonosítottunk. Új módszereket dolgoztunk ki a járomspórás gombák transzformációjára és a karotintermelés elemzésére vonatkozóan. A kidolgozott eljárások, a létrehozott nagyszámú expressziós vektor és a módosított gombatörzsekből létrehozott mutánspark a további alap- és alkalmazott kutatások alapját képezhetik. | The aim of the project was the modification of the carotenoid production of Zygomycetes fungi, especially of Mucor circinelloides, using recombinant techniques. Possibilities of the development of carotene superproducing strains based on the over-expression of the mevalonate-isoprenoid pathway were examined. Experiments to develop and characterize strains able to produce new carotenoids, such as astaxanthin, canthaxanthin and other xanthophylls were also performed. In the frame of the study, HMG-CoA reductase gene of Rhizomucor miehei and isopentenyl pyrophosphate isomerase gene of M. circinelloides were cloned and functionally analysed. Several expression vectors useful to modify the mevalonate-isoprenoid biosynthetic pathway were constructed and strains overproducing different carotenoids were successfully created with them (via both autoreplicative and integrative transformation systems). M. circinelloides strains producing different xanthophylls were developed via heterologous expression of bacterial beta-carotene ketolases. Carotenoid production of isolates representing about 30 Zygomycetes species was analysed in detail identifying strains as potential new producers. New methods were elaborated for the genetic transformation of Zygomycetes and for the analysis of their carotenoid production. The new methods, the transformation vectors and the modified strains developed during the project can be used in the further basic and applied studies