A vékonybél autotranszplantációt megelőző ischémiás prekondícionálás pathomechamizmusának vizsgálata kísérletes modellben = Investigation of the pathomechanism of ischemic preconditioning prior to small bowel autotransplantation in experimental model

Abstract

A vékonybél transzplantálhatóságát fokozott immunogenitása mellett az nehezíti, hogy az egyik legérzékenyebb szövet az ischémiás/reperfúziós (I/R) károsodásokra. Az immunológiai problémákat kizárva kísérletes vékonybél autotranszplantációs modellekben az I/R károsodást vizsgáltuk. A károsodás csökkentésére, kivédésére az ischémiás prekondícionálás (IPC) hatását vizsgáltuk. IPC-t végeztünk különböző ciklusokkal a vékonybél transzplantáció előtt. Kimutattuk, hogy az IPC mindkét formája fokozta a szövet ischémiás toleranciáját valamennyi prekondícionált csoportban. A prekondícionálás kiváltotta, az intracellulárisan jelen lévő transcripciós faktor, a nuklearis factor kappa B (NF-kB) aktivációját. Az aktivitás változás bifázisos jellegű volt mind a citoplazmális, mind a nukleáris NF-kB esetén. Az általunk alkalmazott legrövidebb IPC ciklus (1 perc ischémia + 1 perc reperfúzió) aktiválta a prekondícionálási kaszkádot. Ez alátámasztja, hogy a bélsejtekben is a "minden vagy semmi" törvény szerint működik az IPC folyamata. Vizsgálataink további részében -az elsőként birka hypotalamusból izolált peptid-, a hipofízis adenilát cikláz aktiváló polipeptidnek (pituitary adenylate cyclise activating polypeptide: PACAP) az oxidatív stresszre gyakorolt hatását vizsgáltuk. Kimutattuk, hogy a reperfúzió alatt iv. adott PACAP-38 mérsékelte a bélszövet oxidatív károsodását, illetve a bél struktúrája mind a kvalitatív, mind a kvantitatív mérések alapján jobban megőrződött a reperfúzió végére. | Small bowel was the last splanchnic organ to be successfully transplanted. The difficulty stems from the fact, that small bowel is strongly immunogenic and it is one of the most sensitive tissues to ischemia/reperfusion (I/R) injury. To eliminate immunological complications we applied bowel autotransplantation models for studying effects of I/R. To decrease ischemic injury ischemic preconditioning (IPC) has been used with different cycles prior to bowel autotransplantation. Our results showed that IPC increased ischemic tolerance in each IPC groups. IPC induced activation of transcription factor nuclear factor kappa B (NF-kB), which is localized in intracellular place. Our findings confirmed that both forms of IPC could moderate the severity of oxidative stress prior to preservation and autotransplantation. Moreover, we have demonstrated that after one cycle of I/R the activation of NF-kB increased progressively and steadily. But, further clone of I/R cycles has not resulted in further elevation in activation of NF-kB. So, IPC mechanism in intestinal tissue works by law "all or nothing". Then, we investigated the effect of Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptide (PACAP) in intestinal I/R model. PACAP was originally isolated as a hypothalamic peptide. It presents in the intestinal tract and plays a central role in its secretion and motility. Our histological and biochemical results showed that iv. administration of PACAP-38 mitigated the intestinal tissue injury