Egy új citotoxinnak, cytholethalis distending toxinnak (CDT) magyarországi előfordulása és molekulárbiológiai jellemzése = The occurrence and molecular biological characterization of a new cytotoxin -cytolethal distending toxin (CDT)- in Hungary

Abstract

Jelen pályázatunkban egy új és nagy jelentőséggel rendelkező bakteriális citotoxin családnak a cytolethalis duzzasztó (distending) toxinnak (CDT) a magyarországi elterjedését és molekuláris biológiai jellemzését végezve megállapítottuk, hogy a CDT potenciális virulencia faktora lehet az emberi húgyúti és egyéb extraintesztinális infekciókat okozó, valamint a sertések választási hasmenésének és baromfi szepszisének eseteiből izolált E. coli törzseknek. A CDT-termelő baromfi eredetű törzsek között új virulens klónokat azonosítottunk. A CDT ismert típusainak a kimutatására és tipizálására alkalmas diagnosztikai PCR eljárást dolgoztunk ki. A CDT-nek egy új típusát, a CDT-IV toxint fedeztük fel. Megállapítottuk, hogy a CDT-IV termelő törzsek változatos szerocsoportú emberi és állati eredetű patogén E. coli törzsekben is előfordul. A cdtABC-IV operont klónoztuk, és antibiotikum-rezisztenciát kódoló kazettával cdtB mutáns törzset alakítottunk ki egy baromfi eredetű O115 szerocsoportú törzsben. Megállapítottuk, hogy a cdt-IV operon fág eredetű génekkel határolt. | This study focused on monitoring of a significant and new toxin family, cytolethal distending toxin (CDT) in Hungary, on molecular characterisation of CDT-producing strains and on developing new diagnostic tools. Results indicate that CDT could be a novel virulence factor of E. coli strains isolated from human urinary tract infections (UTI) and other (non-urinary) extraintestinal infections and stains isolated from porcine post-weaning diarrhoeal and poultry septicaemic cases. A new PCR system that specifically detects all known types of CDT lead to identification of a new member of a the CDT family (CDT-IV) was developed. It has been established that the CDT-IV producing animal and human pathogenic E. coli strains belonged to a wide variety of serogroupes. The cdtABC-IV operon from a poultry O115 strain was cloned and a the cdtB gene was mutated by side directed mutagenesis. PCR investigations revealed that cdtABC-IV was flanked by phage genes