Nagyfelbontású elválasztástechnikai módszerek (MEKC, CZE) fejlesztése. Gyakorlati alkalmazások biológiailag aktív molekulák fizikai-kémiai és biológiai tulajdonságainak jellemzésére = Development of high performance separation techniques (MEKC, CZE). Practical applications for physico-chemical and biological characterisation of biologically active molecules

Abstract

Az elválasztási módszerek fejlesztése során vizsgáltuk a CZE-ben puffer módosítóként alkalmazott szerves oldószereknek az elválasztási mechanizmusra, az analizált molekula konformációjára/szolvatációjára gyakorolt hatását. Megkezdtük a biokompatiblis CZE módszerek kifejlesztése során alkalmazható polimer bevonatok tulajdonságainak, alkalmazhatóságának vizsgálatát.Bizonyítottuk, hogy a MEKC-ben bevezetett relatív micelláris fázistartózkodási idő alkalmas egyrészt az analizált molekulák lipofilitásának kísérleti meghatározására, másrészt alkalmas a MEKC-ben alkalmazandó micelláris fázisok lipofilitásának számszerű jellemzésére. Bevezettük a CLOGP50 fogalmát, amely az a lipofilitási érték, amellyel rendelkező molekula teljes analízis idejének éppen a felét tölti a micelláris fázisban. Bizonyítottuk, hogy ez a CLOGP50 érték alkalmas a micelláris fázisok egymással való összehasonlítására. Ez támpontot adhat a MEKC módszerfejlesztés során az adott elválasztási feladathoz leginkább megfelelő megosztófázis kiválasztására.CZE és HPLC módszereket dolgoztunk ki a vizsgált molekulák fizikai-kémiai paramétereinek meghatározására. Bizonyítottuk a kísérleti lipofilitási adatok és a molekulák biológiai aktivitása közötti jó összefüggést. Ezeket a módszereket különböző kémiai szerkezetű molekulakönyvtárak jellemzésében, lipofilitásuk meghatározásában, valamint a szintetikus tervezőmunka támogatásában az optimalizálni érdemes szerkezetek kiválasztásában használtuk fel. | Effect of the organic solvents applied as buffer modifiers in capillary zone electrophoresis (CZE) on the separation has been investigated. Development and characterization of biocompatible polymers applicable as coating material in capillary electrophoresis has been started. Application of the normalized micellar phase residence time has been suggested in micellar electrokinetic chromatography (MEKC), its applicability for the characterization of the lipohilicity of the analytes were proved. CLOGP50 value was defined and it has been applied to compare the lipophility of the pseudo-stationary phases applied in MEKC. CZE and HPLC methods has been developed and applied to determine physico-chemical parameters of molecules possessing antiproliferative activity. Good correlation between the experimentally determined physico-chemical parameters of the investigated molecules and the biological activity of the same molecules has been proved. These separation methods developed in our laboratory has been applied in characterization of molecular libraries of different chemical nature, and were applied to support the optimization of the chemical structure of the core molecules