University of Zagreb. Faculty of Science. Department of Biology.
Abstract
Mezenhimske matične stanice (MMS) su nekrvotvorne multipotentne matične stanice koje su od svih njihovih tkivnih izvora najzastupljenije u koštanoj srži (KS). MMS ispoljavaju imunomodulatorna svojstva in vitro što im daje potencijalnu primjenu u staničnoj terapiji. MMS su klinički primjenjivane pri transplantacijama krvotvornih matičnih stanica i liječenju reacije pesatka-protiv-primatelja. Učestalost MMS u KS vrlo je mala te ih je za potrebe kliničke primjene neophodno umnožiti ex vivo. Mi smo umnažali MMS in vitro u kultivacijskom mediju koji je bio oplemenjen s 10% ljudskog lizata trombocita (LT) tako izbjegavajući upotrebu suplemenata životinjskog podrijetla. MMS su bile izolirane iz KS zdravih dobrovoljnih davatelja i uspješno uzgojene u mediju oplemenjenim s LT. Tijekom cijelog perioda uzgoja in vitro, stanice su ispoljavale mezenhimske karakteristike; prihvaćale su se na plastičnu podlogu, imale vretenasti fibroblastni oblik, ispoljavale imunofenotip mezenhimskih stanica i formirale fibroblastne kolonije. Ovi nalazi daju uporište za daljnja ispitivanja upotrebe LT u postupcima umnažanja MMS.Mesenchymal stem cells (MSCs) are nonhematopoietic multipotent stem cells mainly residin in the bone marrow (BM). MSCs show immunomodulatory properties in vitro that make them intersting in the field of cellular therapy. MSCs have ben clinically applied to improve engraftment in hematopoietic stem cell transplantation and to treat acute graft versus host disease. Incidence of MSCs in BM is very low and ex vivo expansion of MSCs is necessary. We expanded MSCs in vitro in media supplemented with 10% human plateet lysate (PL) thus avoiding standard use of animal origin supplements. MSCs isolated from BM samples of healthy donors were sucessfully cultured in medium containing PL. During propagation period of 35 days, MSCs continuously expressed mesenchymal characteristics: they adhered to plastic surface shoing typical firoblastod shape, they expressed mesenchymal immunophenotype and formed fibroblast colonies. These findings give basis for further efforts in evaluating use of PL i MSCs expansion methods
