The aim of this research was investigated the effect of boiled -Vinca rosea leaf for hepar and glycogen

accumulation in Mus musculus hepatocyts on several dosages, frequencies and the interaction of dosagesfrequencies.

The research was using factorial experiment with Complete Randomize Design and continued with Duncan test at 5% level. The result of this experiment was indicated that there was significant on the difference dosage. The

higher dosage boiled- Vinca rosea leaf that given into Mus musculus, it would make the more hepatocyts damage.

Hepatocyt injury was indicated with swollen until atrophy cell with glycogen accumulation in the cytoplasm of

hepatocyt

Dewi, Utari Kusuma

Saraswati, Tyas Rini

Indonesian

Diponegoro University Institutional Repository

BIOMA, Juni  2009                         ISSN: 1410-8801Vol. 11, No. 1, Hal. 1-5Efek Rebusan Daun Tapak Dara pada Dosis dan Frekuensi yang Berbeda terhadapKerusakan  dan Akumulasi Glikogen pada Hepar Mencit (Mus musculus)Utari  Kusuma Dewi, Tyas Rini SaraswatiLaboratorium Biologi Struktur dan Fungsi Hewan Jurusan Biologi  FMIPA UndipAbstractThe aim of this research was investigated the effect of boiled -Vinca rosea leaf for hepar and glycogenaccumulation in Mus musculus hepatocyts on several dosages, frequencies and the interaction of dosages-frequencies.The research was using factorial experiment with Complete Randomize Design and continued with Duncantest at 5% level. The result of this experiment was indicated that there was significant on the difference dosage. Thehigher dosage boiled- Vinca rosea leaf that given into Mus musculus, it would make the more hepatocyts damage.Hepatocyt injury was indicated with swollen until atrophy cell with glycogen accumulation in the cytoplasm ofhepatocyt.Key word : Boiled Vinca rosea leaf, hepatocytPENDAHULUANPenggunaan obat tradisional dewasa inisemakin meningkat, baik dalam kualitas maupunkuantitasnya. Hal ini dapat dilihat dengan semakinbanyaknya obat tradisional yang berbentuk serbuk,kapsul, tablet maupun dalam bentuk cairan. Vinca(Vinca rosea) atau tapak dara yang selama inidianggap sebagai bunga liar dan murahan, kinimulai dilirik dan disukai banyak orang. Tapakdara umumnya dikenal dalam pengobatantradisional dalam menurunkan kadar glukosadarah, namun pada pemeriksaan selanjutnyaternyata  menunjukkan adanya aktivitas antikanker(Lingga,L, 2005). Zat aktif dalam daun tapak darayang berfungsi sebagai antikanker adalahvincristin (Foye, 1995). Pada akar, batang, daun,dan biji bunga tapak darah ditemukan lebih dari 70macam alkaloid. Komponen antikanker yangdikandungnya yaitu alkaloid seperti vinblastine(VLB), vincristine (VCR), leurosine (LR),vincadioline, leurodisine, dan catharanthine.Alkaloid yang berefek menurunkan kadar gula,antara lain leurosine, catharanthine, lochnerine,tetrahydroalstonine, vindoline, dan vindolinine.Pengembangan teknologi akhirnya tapak daraberperan penting pada komersialisasi produkvinblastine dan vincristine sebagai senyawaantikanker secara kemoterapiPenggunaan obat tradisional seperti jugapenggunaan obat, perlu juga memperhatikanaspek-aspek farmakologis yang lain, seperti dosis,mekanisme kerja, indikasi dan yang tidak kalahpenting yaitu efek samping baik akut maupunkronis (Siswosudarsono, 1982). Suatu senyawajika diberikan secara oral akan masuk ke dalamtubuh melalui saluran cerna, kemudianditransformasikan ke sirkulasi portal hepatik dandibawa langsung ke hepar. Hepar rentan terhadappengaruh cukup banyak zat kimia berdasarkaposisinya dalam sirkulasi.Faktor-faktor yang mempengaruhi kerjazat diantaranya adalah dosis dan pemasukan yangberulang. Dosis yang berlebih dan pemasukanyang berulang berptensi menyebabkan kerusakanpada organ tubuh terutama hepar yang berperansebagai organ detoksifikasi. Kerusakan pada sel-sel hepatosit menyebabkan terjadinya perubahanstruktur sel, yang berakibat terjadinya gangguanpada fungsi sel tersebut. Salah satu fungsi heparadalah sebagai penyimpan glikogen dalamsitoplasma. Sel-sel  hepatosit yang mengalamikerusakan struktur mengakibatkan gangguandalam metabolisme, diantaranya metabolisme danmobilisasi glikogen dalam hepatosit. Hasilpenelitian oleh Ernawati( 2007) gambaranmikroanatomi hepar mencit dianalisis secarakualitatif. Hasil penelitian sel hepar mencit yang2      Utari Kusuma Dewi dan Tyas Rini Sdiberi perlakuan infusa daun tapak dara bungaputih peroral dengan konsentrasi 35% dan 75%menyebabkan kerusakan berupa piknosis, danpenghambatan metafase).Berdasarkan hal tersebut maka penelitianini dipilih organ hepar sebagai organ yang diteliti,adakah perbedaan terhadap ukuran hepatosit danstatus glikogen dalam hepatosit mencit akibatpemberian rebusan daun tapak dara pada berbagaidosis dan frekuensi  yang berbeda.BAHAN DAN METODEPercobaan ini menggunakan rancanganpercobaan faktorial, dengan 4 tingkatan dosisrebusan daun tapak dara dan 3 tingkatan frekuensipemberian, sehingga ada 12 kombinasi perlakuanyang masing-masing dengan 3 kali ulangan.Daun tapak dara kering direbus dengan airsampai mendidih, selanjutnya disaring dan diperas.Dosis perlakuan yang diberikan adalah 0%, 10%,20%, 40%. Dosis rebusan 10 % adalah : rebusanyang dibuat dari 10 gram daun tapak dara direbusdengan 100 ml air. Hal yang sama juga dilakukanpada dosis rebusan 20% dan 40%. 3 tingkatanfrekuensi dengan interfal waktu 6 jam.Aklimasi hewan uji selama 2 minggu.Perlakuan secara peroral sebanyak 0,5 cc selama 2minggu. Pada akhir perlakuan dibuat preparathistologis hepar dengan metode parafin danpewarnaan Haematoxylin Echrlich & Eosin untukpengamatan struktur hepatosit, sedangakan untukpengematan akumulasi glikogen denganpewarnaan PAS (Periodic Acid Schiff).Parameter yang diamati adalah : Diameterhepatosit, berat hepar, berat badan, akumulasiglikogen dalam hepatosit.HASIL DAN PEMBAHASANHasil pengamatan terhadap diameter selhepatosit, berat hepar dan berat badan Musmusculus pada percobaan faktorial denganmenggunakan rebusan daun tapak dara dengandosis dan frekuensi yang berbeda dapat dilihatpada tabel 1, sedangkan gambaran akumulasiglikogen pada sel hepatosit akibat gangguan  padametabolisme karbohidrat secara kualitatif dapatdilihat pada gambar histologis dengan pewarnaanPAS.Tabel 1. Rerata diameter sel hepatosit, berat hepardan berat badan Mus musculus setelah perlakuandengan rebusan daun tapak dara pada dosis danfrekuensi yang berbedaPerlakuan Diameterhepatosit(µ )Berathepar(g)BB (g)D0F1 24,17a 1,89a 34,40aD0F2 23,75a 2,13a 35,93aD0F3 23,75a 1,82a 34,13aD1F1 29,17b 1,89a 36,97aD1F2 31,67b 1,91a 35,77aD1F3 30,00b 1,65a 34,27aD2F1 32,08b 2,25a 38,63aD2F2 32,97b 1,83a 36,33aD2F3 32,08b 1,7a 34,13aD3F1 24,08a 2,02a 38,93aD3F2 31,88b 1,78a 33,7aD3F3 25,21a 1,67a 35,93aKeterangan : Angka yang diikuti huruf kecil  yangberbeda pada lajur yang sama menunjukkan hasilyang berbeda  nyata dengan uji Duncan pada tarafkepercayaan 95%Gb 1. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian rebusan daun tapak dara dosis 0%,pewarnaan HE, Perbesaran 1000XKet : Sitoplasma homogen, inti sel konsentrisGb 2. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahpemberian rebusan daun tapak dara dosis 10%,Pewarnaan HE, Perbesaran 1000x                 Efek Rebusan Daun Tapak Dara        3Ket :Sitoplasma tidak homogen, terdapat vakuola dalamsitoplasma, inti sel konsentrisGb 3. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian  rebusan daun tapak dara dosis 20%, pewarnaan HE, Perbesaran 1000XKet : Sitoplasma homogen, inti sel konsentrisGb 4. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian rebusn daun tapak dara dosis 40%, pewarnaan HE, Perbesaran 1000XKet : Sitoplasma tidak homogen, vakuola disekelilinginti,inti sel konsentrisGb 1. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian  rebusan daun tapak dara dosis 0%, pewarnaan  PAS, Perbesaran 1000XKet : G menunjukkan adanya glikogen, jumlah sedikitGb 2. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian rebusn daun tapak dara dosis 10%, pewarnaan PAS, Perbesaran 1000XKet : Akumulasi Glikogen dalam sel hepatosit lebihbanyakdibandingkan kontrolGb 1. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian  rebusan daun tapak dara dosis 0%, pewarnaan  PAS, Perbesaran 1000XKet : Akumulasi Glikogen dalam sel hepatosit lebihbanyak dibandingkan dengan kadar 10%Gb 2. Struktur mikroskopis hepar Mus musculus setelahPemberian rebusn daun tapak dara dosis 10%, pewarnaan PAS, Perbesaran 1000XKet : Akumulasi Glikogen dalam sel hepatosit lebihbanyak dibandingakan dengan kadar 20%Dari hasil analisis data menunjukkanadanya perbedaan nyata terhadap diameter selhepatosit, sedangkan terhadap berat hepar danberat badan tidak menunjukkan adanya perbedaanyang nyata antar perlakuan. Dari hasil uji lanjutpengaruh rebusan daun tapak dara terhadapdiameter hepatosit dengan menggunakan ujiDuncan, terdapat perbedaan nyata pada perlakuandosis, sedangkan pada perbedaan frekuensi dankombinasi menunjukkan hasil yang yang tidakberbeda.Uji kualitatif glikogen dengan pewarnaanPAS terhadap seluruh preparat hepar Musmusculus menunjukkan hasil PAS positif, dimanaterdapat adanya warna merah magenta pada selhepatosit. Semakin tinggi dosis rebusan daun tapak2      Utari Kusuma Dewi dan Tyas Rini Sdara akumulasi glikogen dalam sel semakinbanyak.Rebusan daun tapak dara yangmengandung alkaloid vincristin  sering dipakaisebagai obat anti kanker sebagai zat anti mitosis.Sel-sel hepatosit merupakan sel yang mempunyaiaktifitas tinggi sehingga mudah aus, namun jugamempunyai sifat mudah mengalami regenerasidengan cara mitosis untuk menggantikan sel yangaus. Pada perlakuan dengan rebusan daun tapakdara pada sel hepatosit dari hewan yang  normalmenunjukkan adanya hambatan terhadap  mitosissel hepatosit yang ditunjukkan dengan adanyakerusakan sel yang berupa pembengkaan sel danatrofi sel hepatosit.Hasil pengamatan terhadap diameter selhepatosit pada perlakuan denggan dosis 10% dan20% menunjukkan terjadinya pembengkaan selhepatosit. Perubahan struktur sel yang berupapembengkaan sel  disebut sebagai perubahandegeneratif. Kerusakan degeneratif sifatnyareversibel. Pembengkaan sel yang paling seringdijumpai terjadi karena adanya penimbunan cairanyang ada di dalam sitoplasma sel, hal inidisebabkan karena gangguan pada pengaturancairan sel, yang antara lain disebabkan karenaadanya kerusakan pada membran sel akibat zattoksik. Akibat gangguan pengaturan cairan dalamsel mengakibatnya adalah influks air ke dalam sel,akibat lanjut sebagian organela seperti retikulumendoplasma, mitokondria berubah menjadikantong-kantong yang berisi air, sehingga padamikroskop terlihat sel membesar dengan gambaranvakuola pada sitoplasma sel.Mekanisme terjadinya pembengkaan seladalah sebagai berikut. Dalam cairan tubuhterdapat brbagai macam elektrolit, baik yangberada di luar sel maupun berada di dalam sel.Dalam menjaga kestabilan lingkungan interna selharus menjaga keseimbangan ion Na+ dan K+ didalam dan di luar sel. Untuk mencapaikeseimbangan tersebut sel harus mengeluarkanenergi metabolik untuk memompa ion Na+ keluardari sel. Jika terjadi kerusakan sel, maka sel tidakmampu memompa ion Na+ keluar dari sel,akibatnya adalah influks air ke dalam sel karenaterjadi osmosis, yang berakibat perubahan struktursel yang  berupa pembengkaan sel.Pada perlakuan dengan dosis 40%menunjukkan diameter sel hepatosit tidak berbedanyata dengan kontrol, hal ini menunjukkan bahwapada perlakuan dengan rebusan daun tapak darasebesar 40% mulai terjadi penyusutan sel dimanaukuran diameter sel lebih kecil dari pada perlakuandengan dsis 20%. Pengurangan ukuran sel inimenuju ke arah atrofi sel. Atrofi sel terjadi karenakemampuan sel untuk beradaptasi sudah hilang,sehingga  dalam perjalanan menuju atrofi akanmengabsorpsi sebagian dari unsur-unsurnya.Proses ini melibatkan enzim-enzim lisosom yangterdapat pada sitoplasma sel..Hasil penelitian terhadap frekuensipemberian  baik 1 kali, 2 kali atau 3 kali seharitidak menunjukkan hasil yang berbeda, hal inimungkin disebabkan waktu paruh biologisvincristin dalam tubuh sangat cepat sehinggamudah dieliminasi, oleh karena itu pada pemberianfrekuensi yang berulang tidak memberikan efekyang berarti.Hasil analisis terhadap interaksi antardosis dan frekuensi juga tidak menimbulkanperbedaan yang nyata, hal ini berarti bahwa dosisdan frekuensi bekerja secara independentUji kualitatif glikogen dengan pewarnaanPAS menunjukkan hasil PAS positif. Padaperlakuan dengan rebusan daun tapak dara sebesar10% menunjukkan bahwa akumulasi glikogenpada sitoplasma sel secara kualitatif sama biladibandingkan dengan akumulasi glikogen padaperlakuan kontrol. Kerusakan sel pada perlakuandengan rebusan daun tapak dara sebesar 10%belum dapat menimbulkan gangguan terhadapmetabolisme dan mobilisasi glikogen dalam selhepatosit.Pengamatan terhadap perlakuan 20%menunjukkan PAS positif, dengan adanya warnamerah magenta pada bagian tepi hepatosit.Akumulasi glikogen dalam hepatosit secarakualitatif lebih banyak dari perlakuan kontrol danperlakuan dengan dosis 10%. Bila pada suatu selterjadi perubahan struktur, dapat dipastikan adanyagangguan fungsi yang mengikutiya, sehingga sel-sel pada perlakuan 20% rebusan daun tapak daradapat dikatakan mengalami gangguan fungsiterhadap metabolisme dan mobilisasi glikogenakibat adanya kerusakan struktur pada selhepatosit.                 Efek Rebusan Daun Tapak Dara        3Sel ketika mengalami kerusakan satu ataulebih enzim akan mengalam kerusakan, sehinggametabolisme dalam sel akan terhambat padakeseimbangan metabolik antara glikogenesis danglikogenolisis (Himawan, 1985). Dengan adanyapenghambatan ini maka status glikogen dalamhepatosit akan menurun, tetapi vincristin yangbersifat sitotoksik dapat menimbulkan akumulasiglikogen dalam hepatosit. Pengumpulan dapatterjadi karena terdapat gangguan pada mekanismemobilisasi dan penggunaan glikogen sehinggamenumpuk dalam hepatosit. Vincristin dapatmenghambat sintesis DNA dan RNA sehinggamenghambat sintesis protein. Enzim adalah proteinyang bisa dihambat sintesisnya oleh vincristin.Akumulasi glikogen pada hepatosit diduga karenaadanya penghambatan biosintesis enzim yangterlibat dalam metabolisme glikogen terutamadalam proses glikogenolisis.Pada perlakuan 40% rebusan daun tapakdara menunjukkan PAS positif, dengan akumulasiglikogen  secara kualitatif lebih banyak dari padaperlakuan lainnya. Kerusakan hepatosit padaperlakuan 40% lebih berat bila dibandingkandengan perlakuan lain. Sel yang mengalami prosesmenuju atrofi sel semakin lama akan mengalamigangguan metabolisme yang lebih kompleks,akibatnya akumulasi glikogen pada sel lebihbanyak karena sel sudah tidak mampumemanfaatkan cadangan glikogen sebagai sumberenergi.Hasil analisis terhadap berat hepar tidakmenunjukkan perbedaan yang signifikan antarperlakuan. Pemberian rebusan daun tapak darabelum berpengaruh terhadap metabolisme heparsecara keseluruhan, sehingga tidak memberikanperbedaan yang nyata terhadap berat hepar.Disampinng itu, perubahan yang terjadi padahepatosit hanya merupakan gangguan yang masihringan dari keadaan normal.Hasil analisis terhadap berat badan setelahperlakuan menunjukkan perbedaan yang tidaksignifikan. Keadaan ini menunjukkan bahwakerusakan hepatosit pada hewan uji tidakmempengaruhi fungsi fisiologis tubuh hewan.KESIMPULANDari hasil penelitian dapat disimpulkanbahwa rebusan daun tapak dara dengan dosis 10%sudah mampu menyebabkan gangguan prosesmetabolisme pada tingkat selulerDAFTAR PUSTAKAErnawati,,2007. Gambaran Mikroanatomi HeparMencit (Mus Musculus)Yang Diberi Perlakuan Infusa Daun TapakDara Bunga Putih (Vinca Rosea L.) Per-Oral.http://etd library.ums.ac.id.Erusuwono, 2007. Tapa Dara PenumpasKankerPayudara.http://erusuwono.multiply.com/journal/item/3Foye, W.O. 1995. Prinsip-prinsip KimiaMedicinal. Jilid II. UGM Press Yogyakarta.Himawan, S.1985. Kumpulan KuliahPathologi.Fakultas Kedokteran UniversitasIndonesia. JakartaLingga L, 2005. Si Tapak Dara yang Menawan.Penerbit Agromedia Pustaka.Siswosudarsono dan Risanto, 1982. EfekTeratologi Ekstrak Daun Tapak Dara  (Vinca rosea)Terhadap Pertumbuhan EmbrioAyam .PPT-UGM th 1981/1982 No.048/L8.

Efek Rebusan Daun Tapak Dara pada Dosis dan Frekuensi yang Berbeda terhadap

Kerusakan dan Akumulasi Glikogen pada Hepar Mencit (Mus musculus)

http://eprints.undip.ac.id/1987/1/Bioma_Tyas_Juni_2009.pdf

Efek Rebusan Daun Tapak Dara pada Dosis dan Frekuensi yang Berbeda terhadap Kerusakan dan Akumulasi Glikogen pada Hepar Mencit (Mus musculus)

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Diponegoro University Institutional Repository