对人工诱导的鲫鱼干扰素防治草鱼出血病的效果进行了初步探讨。结果表明 ,人工诱导的鲫鱼干扰素确能有效防治草鱼出血病 ,腹腔注射和药浴浸泡两种途径均有一定效果。在病毒感染前使用干扰素处理的效果好于在病毒感染后使用干扰素处理。多次使用干扰素处理的效果好于一次性处

贾方钧,王铁辉,张义兵,俞小牧,李戈强

Institute of Hydrobiology, Chinese Academy Of Sciences

 ／7 ) 卜q- 
第 l9卷第 4期 
2000年 7月 
水产 科 学 
FISHERIES SCIENCE 
Voll9． 0．4 
I v．，2000 
干扰素防治草鱼出血病的效果初探 
贾方钧 ，王铁辉 ，张义兵 ，俞小牧，李戈强 
’-．．．．．．．--一 t：．．．---一  
(中国科学院水生生物研究所 淡水生态与生物技 术国家重点 实验室 ，湖北 武汉 430072) 
摘 要 ：对^工诱导的鲫鱼千扰索防治草鱼出血病的敬果进行了初步探讨。结果表明．人工诱导的鲫鱼干扰索确 
能有效防治草鱼fl；0t病 ．艘腔注射和药浴浸泡两种途径均有一定敏果 在病毒感染前使用干扰索扯理的效果好于在 
病毒感染后使用干扰索址理。多救使H1干扰索处理的敕 虾干一狰：性处理。 
美键词：! 堕； ； 诸 弦为蜉  
中国分类号 ：S 943．112／．411 文献标识码 ：A 文章编号 ：1003一lll1(2000)04—0001—04 
． ． ． ． ． - - - - -  
77q-L ，f — — 一 
干扰索是-=种 谱的抗病毒因子，已广泛 
应用于防治人类及某些高等哺乳动物的病毒性 
疾病 ，并取得了良好效果。草鱼出血病是由一 
种呼肠孤病毒引起的爆发性传染病，对草鱼养 
殖业的危害极大 ，目前还没有得到有效控制 = 
本实验室在用紫外线灭活的草鱼 出血病病毒诱 
导高滴度鱼类干扰索的基础上 ，开展了用鲫鱼 
干扰素防治草鱼出血病的探索。 
1 材料 与方法 
1．1 干扰素制剂 
用紫外线灭活的草鱼出血病病毒诱导的鲫 
鱼干扰索【 ，教价 10 000单位／n儿。 
1．2 病 毒 
本研究组分离保存的 GCHV一861株 。使 
用时按常规方法制成组织匀浆供感染 j。 
1．3 草 鱼 
第 一次 实验所用 的草鱼是 一龄鱼种 ．第二 
次 、第三次实验所用的草鱼为当年鱼种 ，饲养 
于本所关桥鱼类良种实验基地 ，实验期间饲 以 
浮 萍 。 
1．4 人 工感 染 
用高渗浸泡感染_3j，将待感染 的草 鱼用 
2％NaC1溶液浸泡 15 rain左右，再将草鱼直 
接转入病毒液 中浸泡 60 mln，用 曝气 自来水 
冲洗后 ，置于 60 cm×45 cm×30 cm的水箱中 
饲 养 ，逐 日观察 。 
1．5 实 验过程 
1．5．1 腹腔注射干扰素制剂 
本次实验所用的草鱼种体长 (68．0±5．0) 
I~11．平均体重9．2 g．饲养水 温 23～27℃ 。 
人工感染时将已制备好的含有病毒的病鱼组织 
匀浆按 1：1 000的 比例稀 释 ，对受 试草 鱼 由腹 
腔注射干扰素制剂 ，剂量为 0，3 mL／尾。 
为探讨在感染前后不同时期干扰素的作用 
效果，本 次实验分别在人工感染病毒 的前一 
天 、当天和后一天对 三组草鱼使用干扰 素处 
理。感染对照组只予感染病毒 ，不进行干扰素 
处理。空白对照组在感染对照组染毒的同时注 
射等量 PBS盐水 ，不予感染病毒。 
1．5．2 干扰素浸泡处理 
坚鐾量智 国19家9自-然10科-0学8基； 2(03980 - 。0 4o3 
作者筒介 ：贾方钧 (1966一)． 中回科学 院永生生物研究所造传学博士研究生，主要从 事鱼类港传学研究 
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水产科 学 第19卷 
本次 实验 所用 的草鱼种 体长 (39 0±4．0) 
mtll，平均体重 3．2 g，饲养水温 27～3O℃， 
人 工感染 时将 已制备 好的 含有 病毒 的病鱼组织 
匀 浆按 1：5 000释释 ，对受试 草鱼 以浓 度 50单 
位 ／mL的干扰素 制剂稀 释 液浸 泡 l h。本 次试 
验的 目的是为探讨浸泡方式处理的效果。试验 
开始 时四个 组 的草 鱼均 为 30尾 ，详 细分 组情 
况 见 图 1注 。 
1．5．3 腹腔注射与浸泡处理效果的比较 
本 次 实 验 所 用 的 草 鱼 体 长 (42．0±5．0) 
mtll，平均体重 5．0 g，饲养水温 28～32℃， 
人工感染时将 已制备好的含有病毒的病鱼组织 
匀浆按 1：10 000稀释 ，有两个组的草鱼 由腹 
腔注射 干 扰素 制剂 ，注 射 剂量 为 0．2 mL／尾 ， 
另有两个 组用 浓度 为 80单 位 ／mL干扰 素制剂 
稀释液 浸泡 1 h。本 次试 验 旨在 比较 不 同给药 
途径 的防治效 果 ，详 细分 组情 况见 图 2注 。 
2 结果与讨论 
2．1 人工感染草鱼出血病病毒的草鱼的发病 
症 状 
发病期的病鱼游动缓慢 ，无食欲，体重显 
著下降，体表颜色变暗黑或暗红 ，无光泽 ，鱼 
体表面及 内脏器官呈不同程度充血 。典型症状 
为肌肉充血，严重者全身肌 肉呈鲜红色。一部 
分病鱼鳃 丝 斑点 状 或块 状充 血 。多 数 病 鱼 肝 、 
脾 、肾充 血或肿胀 ，肠道充 血 。发 病 鱼一 天 内 
即死亡。该结果与以前的资料一致H J。 
2 2 鲫鱼干扰素对草鱼出血病的防治效果 
2 2．1 腹腔注射干扰素对草鱼出血病的防治 
效 果 
本 次实验 中 ，分别在 人工感 染草 鱼 出血病 
病毒的前一天 、当天和后一天各对一组受试草 
鱼注射干扰素制剂，结果这三个试验组分别有 
55％、44％、42％的草鱼存活下来 ，并且在 
染毒前一天使用干扰素的效果好于在染毒当天 
及染毒后一天使用干扰素 ，而感染对照组的草 
鱼死 亡率 选 到 了 100 ％ (表 1)。这 个 结 果可 
以说明，通过腹腔注射鲫鱼干扰素，作为一种 
预防措 施 ，确 能 有 效 地 降 低 草 鱼 出 血 病 的危 
害；作为一种治疗手段 ，亦可以在草鱼出血病 
病毒感染的早期 ，对草鱼出血病表现出相当的 
疗 效 。 
表 1 腹 腔 注 射干 扰 素对 草鱼 出血病 的 防治 效 果 
Tabk 1 The effect of prevention ald treatment 0 interferon agaiesr grass carp hemorrhagia by intraperitoneal ㈣ti 
注 ：第 一蛆 在 染毒 前一 天注 射干扰 素 ，第二 i在染 毒当 灭 注射 干扰 索 ．第 三组 在絷 毒后 一 天注 射 干 扰 索 感 染 对 照组 只于 
感染 病毒 ·不进 行 干扰 素处 理 。 空白对 照蛆 在感 染对 耶组 染 毒 的 lal时 往 舯 等 量 PBS盐 水
， 不 予 感 染 病 毒 试 验 期 问东 温 23～ 
27℃ 
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第4期 贾方钧等 ：干扰素防治草鱼出血病的效果初探 
2．2．2 干扰 索浸 泡处 理 防治 草 鱼 出血 病 的效 
果 
注射 方 法用 于 治疗 鱼 病 ，存在 着劳 动强 度 
大，操作不便 的局限。探讨注射以外的药物处 
理方式 是一种 必然 的考虑 。在本次 试验 中 ，我 
们采用 了浸 泡处理 的方法 ，第一组 仅在 染毒前 
一 天浸泡处理一次 ，而第二组和第三组分别用 
逐 日连续提泡和隔 日连续浸泡的方式处理，结 
果第 二 、第 三组 的存 活 率 均超 过 50 ％，明 显 
好于第一组 (图 1)。这说 明用鲫鱼干扰素浸 
泡处理防治草鱼出血病时，存在着某种剂量依 
赖效应 ，干扰素用量大时其防治效果亦较好。 
值得注意的是，第二、第三组的草鱼在试验初 
期的死亡率高出其他组 ，这是否意味着太剂量 
干扰索处理对鱼体具有毒副作用 尚不能肯定 ． 
这也说 明还需要在 以后 的试验 中对用干扰 素防 
治 草鱼出血病 时 的剂量效 应作详 尽的探 索 。 
章 7] 
9 1O 11 12 13 14 1 5 16 1 7 18 19 20 21 26 
时间t／d 
图 1 干扰素 浸泡处理防止草鱼 出血病的效果 
Figure 1 The effect of interferon on the preven— 
t Jon and treatment∞ grass carp hemorrhagia with bathing 
process 
往：第一组在染毒前一天浸泡干扰素，第二组在鞋毒前 
一 天和染毒后连续三天各浸泡 一次，第三组在 染毒后隔 日连 
续 浸泡三 次 试 验 开 始 时 四十 纽 的 草 鱼 均 为 Ⅻ 尾 ．试 验 期 
间 水温 27-29℃ 。 
2．2．3 不 同给药 途径 的效果 比较 
本 次试 验试图 比较浸泡 处理和腹 腔注射这 
两种给药途径的效果。从结果上看，腹腔注射 
的效果优于浸泡处理 (图 2)，在试验 中对 同 
样规格 、同一数量的试验群体给予同样的用药 
总量 ，在本 次实 验 中是 对 每 一组 的 40尾 草 鱼 
总用药量80 000单位。但授泡处理过程中，鱼 
体 实际接受量难 以确定 ，且 存在 无效损 耗 。所 
以 ，本次试验 的结果所 反应 的两 种 处理 方式 的 
效 果差异偏大 。 
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时间t／d 
图 2 干扰素 以不同途径 给药防治草鱼 出血病 的 
效 果 比较 
Figure 2 The comparison of effect 0f interferon 
oI the prevention and treatm ent to grass carp hemorrhagia 
among diferent。at} 
注 ：第一组在染毒前一天用于扰紊浸泡处理一次 ，第二 
组在鞋毒前一天注射干扰素一次 ，第 三组在染毒 后一天用干 
扰素浸泡处理 一次，第四组在染毒后一天注射干扰紊一次 ， 
试 验 开始 时各组 均为 4O尾 。 试验 期 阃水 温 28～32℃ 
干扰素并不能直接灭活病毒，而是通过细 
胞 的基因组产 生另 一些 蛋 白质 来发挥 效能 ，细 
胞中直接杀灭病毒的效应因子是在干扰素同细 
胞膜上 的受体结 合之后才 能渐 次表 达 6 J。本 
文的实验中，在病毒感染前用干扰素处理鱼体 
的抗病效果一般优于在病毒感染同时及感染后 
用干扰素处理 ，作者推测其原因在于在病毒感 
染前的处理能诱使机体处于抗病毒因子活跃表 
达状态，从而在病毒侵人的初期即能抑制病毒 
的增殖。在鱼体染毒后连续给药 ，能够大大提 
高受试鱼的存活率，甚至可以优于在染毒前处 
理的效果，这可能是 由于连续给药具有维持机 
体抗病状态的作用 。 
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∞ ∞ ∞ ∞ 。 
＼措U龄 略 
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水产科 学 第 19卷 
从 总体 上看 ，三个批次 的实验 采用 了不 同 
的病毒感染浓度 ，感染浓度低时干扰素的保护 
效 果亦 见 明显 。另一方 面 ．本文 的实验也表 明 
腹腔注 射 和药浴浸 洗这两 种给药途 径都有 良好 
的效 果 ，腹 腔注射 的效果 更好 ，而药 浴方式 可 
能更具有实用价值。 
由于人工诱导的鲫鱼干扰素数量有限，本 
文未能 对影 响干扰 素作用 效果 的诸 因子问 的关 
系进行 详细 的分析 。为 了今后大规模 生产实践 
的需要 ，本 学科 组 正在进行 用基 因工程技术 生 
产鱼类干扰素的研究工作。有关鱼类干扰素作 
用效果和作用机理的问题也将随之得到细致全 
面 的研究分 析 
参考 文献 ： 
l 王铁辉，张卫兵．李戈强 ，等 ．鱼类培养细胞干扰索 
的诱导 [』] 病毒学报 ，1999，15 (1)：43—49． 
：2] 王莒戋辉，刘沛霖，陈宏溴 ，等 ．稀有的鲫对 草值出 血 
病病 毒 敏感 性 的初 步 研究 J] 水 生 生 物 学 报． 
1994，18 (2)：144—149 
3] 王{宪辉．陈宏溪．刘沛霖 ，等 ．草鱼出血病 毒高渗程 
袍感染稀有酋鲫的研究 [C] 见彭珍荣缩 当代微生 
物研究 进 展 武 汉 ：武 汉 大 学 出版 社 ， 1995 344— 
349 
[4】 巾国科学院水生生物所三室病毒组 ．草鱼出血病病原 
的研究 fJ]．术生生物学集刊 ，1978．6(3)：321— 
330 
[5】 毛讨坚，邵建忠，抗绮 ，等 草鱼出血病崭原的研究 
【j] 水产学报，1989．13 【1)：1—4 
[6 侯 云德 分 子病 毒 学 [M] 北京 ：学 苑 出版 社 ， 
1990 628—63I 
Preliminary Study on Prevention and Treatment to Grass Carp 
Hemorrhagia with Interferon 
JIA Fang—jun，WANG Tie hui，ZHANG Yi—bing，Yu Xiao·Mu，Li Ge．q[ang 
(S~ate Key Laboralory of Fre-shwarer Ecology and Biotee]mology．Institute of 
Hydrobiology，Chincse Academy of Scienc~s，Wuhan 430072，China) 
Abstract：This paper reports the prehm[nary Study OH prevention and treatment to grass carp hemor． 
rhagia with artificially induced interferon from cruc[an carp(Carassius auratus) ．The result shows 
that the artificially induced interferon fronl crucian carp demonstrated certain efect Of prevention and 
treatment On grass carp hemorrhagia Both intrapedtonea[injection and bathing process through 
which the interferon would be absorbed by fish could act as available methods for therapeutic purp0se 
The interferon would be more helpful if it were applied before the virus had infected the fish than that 
alter infected；and it would appear more effective when interferon 1eras applied repeatedlv than that ap- 
plied  only once． 
Key words： grass carp hemorrhagia；interferon； fish disease． 
} 啦  } } j 啦 啦  P啦  ■ }■}■ } 生 掌 ■ }j ■ } 啦 j 啦 啦 啦 啦  啦  啦 啦 啦 j 盘 啦 啦 j 生  
《水产科学》1998年引证报告统计 
《期 刊引证报告》是一种新型的用于期 刊引用分析的重要工具 ，利用该报告所提供的数据
， 可以清楚地 了解 
期 刊引用和被引用 的情况 ．引用频率 ．引用网络等 ，同对 ，还可以方便地定量评价期刊的相互影 响和相互作用
． 
正确评估某种期 刊在科学交流体系中的作用和地位。 
依据中国科技信息所编制的 {1998年 中国科拄期刊引证报告 (扩刊版 )》 (2648种统 计源)所 统计的数据 
《水产科学》 影响因子为 0．073，被引频次 79，这说 明 《水产科学》 已被许多水产科研工作者所 使用
。 这 将 激 励 
我们 的工 作 今后 将 更 上 一层 楼 。 
(本刊编辑部) 
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干扰素防治草鱼出血病的效果初探

http://ir.ihb.ac.cn/bitstream/152342/3326/3/%e5%b9%b2%e6%89%b0%e7%b4%a0%e9%98%b2%e6%b2%bb%e8%8d%89%e9%b1%bc%e5%87%ba%e8%a1%80%e7%97%85%e7%9a%84%e6%95%88%e6%9e%9c%e5%88%9d%e6%8e%a2.pdf

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