目的以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表,研究2004~2005年度重庆市水源水中有机污染物的组成和对斑马鱼胚胎仔鱼的毒性。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,GC/MS检测有机污染物的种类;将萃取的有机污染物溶于DMSO中,并用斑马鱼胚胎仔鱼实验研究水中有机污染物对斑马鱼胚胎孵化率和仔鱼畸形率的影响。结果四个水样中均可检出有机污染物,污染物的种类以酞酸酯类和多环芳烃类为主;污染物可导致斑马鱼胚胎孵化率降低及仔鱼畸形率增加,其毒性呈现出时间和剂量依赖性;同一采样点中,枯水期水样毒性大于

刘晋祎

刘胜学

周燕虹

崔志鸿

徐盈

曹佳

曹波

李鹏

黄晓春

Institute of Hydrobiology, Chinese Academy Of Sciences

公共卫生与预防医学 2O07年第 18卷第1期 J ofPubHealth andPreyMed 2007。VoL18。No．1 ·5· 
· 论著 · 
重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物 
对斑马鱼胚胎仔鱼的毒性研究 
崔志鸿 李鹏 曹波 徐盈 刘晋讳 刘胜学 周燕虹 黄晓春 曹佳 
【摘要】目的 以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表，研究2004～2005年度重庆市水 
源水中有机污染物的组成和对斑马鱼胚胎仔鱼的毒性。方法 固相萃取法萃取水中有机污染物，GC／MS检测有 
机污染物的种类；将萃取的有机污染物溶于DMSO中，并用斑马鱼胚胎仔鱼实验研究水中有机污染物对斑马鱼胚 
胎孵化率和仔鱼畸形率的影响。结果 四个水样中均可检出有机污染物，污染物的种类以酞酸酯类和多环芳烃类 
为主；污染物可导致斑马鱼胚胎孵化率降低及仔鱼畸形率增加，其毒性呈现出时间和剂量依赖性；同一采样点中， 
枯水期水样毒性大于丰水期水样。结论 重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机污染物对斑马鱼具有降低胚胎孵 
化率及增加仔鱼畸形率的毒性作用。 
【关键词】有机污染物；斑马鱼胚胎仔鱼实验；重庆 
【中图分类号】R123 【文献标识码】A 【文章编号】1006-2483(2007)01-0005-04 
Toxicity test of the organic pollutants on the Emb~o Larva of Zebra Fish in the Yangtze and Jialing River 
(ChongqingDistrict) CU／Zhi- ，lg， ，CAOBo，XU ，LIU．， - ，LIUSheng-xue，ZHOUYan- ， 
HUANG Xiao-cun，CAO如 ． Department of Military Toxicology， Military Medical Univers ，Chongqing 
400038，China；Institute ofHydrobiology，ChineseAcademyofSciences，Wuhan 430072，China 
【Abstract】 0bjective Cuntan(Yangtze River)and Daxigou(Jialing River)wel'~selected to study the compo- 
nent of the organic polutant and its toxicity on the Embryo Larva of Zebra Fish in Chongqing district during 2004 to 2005． 
Methods Solid phase extraction Was used to extract organic polutants and the composition Was tested by GC／MS；Organic 
polutants wel'~dissolved in DMSO，and the extracts were exposed to the zebra fish eggs，the embryo hatching rate and the 
larva malformation rate were cdculated．Results The organic polutants wel'~found in the Yangtze and Jialing River of 
Chongqing City，and the main components were polynuclear stromatic hydrocarbons(PAHs)and phthalate acid esters 
(PAEs)．These polutants could reduce the hatching rate ofthe zebra fish embryo and increase the larva malformation rate． 
Th e toxicity of these organic polutants showed time-and dose-dependence．The toxicity of low water period samples Was 
higher than that of the hi．gh water period sam ples at the salne sam pling site．Conclusion Th e organic polutants in the 
Yangtze and Jialing River of Chongqing City have the toxicity of reducing the hatching rate of the zebra fish emb~o and in- 
creasing the larva malform ation rate． 
【Key words】 Organic polutants；Zebra fish emb~o larva test；Chongqing 
重庆市是三峡库区最大的城市，嘉陵江和长江 
是重庆市的主要水源，研究水中有机污染物的种类 
和时空变化以及对一些生物标记物的影响，对于评 
价三峡库区生态系统的安全性和预测对人群健康的 
影响都十分必要。该文对 2004—2005年度重庆市 
基金项目：国家科技部西部引导项 目(2003BA869C)和国家博 
士后研究基金(20060390172)资助 
作者单位：400038 重庆，第三军医大学军事毒理学教研室(崔 
志鸿、李鹏、曹波、刘晋神、刘胜学、周燕虹、黄晓春、曹佳)；中国科学 
院水生生物研究所(徐盈) 
第一作者简介：崔志鸿 (1974一)，副教授，博士后，目前主要从 
事水生生态毒理学研究 
通讯作者：曹佳，Email：caojia@mail．tmmu．corn．ca 
主城区长江和嘉陵江段水中有机污染物的组成和对 
斑马鱼胚胎仔鱼的毒性进行了研究。 
1 材料和方法 
1．1 水中有机污染物的萃取 
选择重庆市主城区大溪沟作为嘉陵江的取水 
点，寸滩作为长江取水点，分别于2004年8月(丰水 
期)和2005年 1月(枯水期)进行水样采集。 
参照Onodera的方法⋯，在不锈钢柱中按树脂： 
江水=1：2000(v：v)的比例装填已活化的XAD-2树 
脂(SUPELCO)，将江水用玻璃纤维棉过滤除去水中 
悬浮物后通过不锈钢柱，控制流速为0．5—1倍柱体 
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~／min。过柱完毕，用真空泵将柱中水份吸干，用丙 
酮：正己烷(1：1)洗脱XAD-2树脂中吸附的有机污 
染物，旋转蒸发，氮气吹干，正已烷定容，取一小部分 
用于GC／MS分析，其余再旋转蒸发，氮气吹干后溶 
于 DMSO，一20℃保存。 
1．2 气相色谱／质谱 (gas chromatography／mass 
spectrum，GC／MS)分析 
仪器：安捷伦6890／5973N型气相色 质谱联 
用仪，HP-5MS毛 细管 柱 (30 m ×0．25 mm × 
0．25 um)；进样温度：250~C；进样体积：1 Ixl；载气： 
氦气；流量为l ml／min；进样方式为自动，不分流；以 
程序升温方式升温，初始温度：80~C，保持2 min，持 
续升温：4oC／min；升温至280℃，保持20 min。离子 
化方式为EI，离子化能量70 eV，scan模式，扫描m／ 
Z：50～600(全扫描)。 
1．3 斑马鱼胚胎仔鱼实验 
将产卵2 h内的健康受精斑马鱼卵按 100 
500 ml养在 28℃恒温鱼缸内(12 h光照／12 h黑 
暗)，加入溶于DMSO的有机污染物进行染毒，设立 
组、2．5倍污染物组、10倍污染物组、25倍污染物 
组；每 12 h换水一次，每次所换水中有机污染物浓 
度与最初浓度保持一致，每组鱼卵为300只。每隔 
12 h在倒置显微镜下观察各组胚胎整体及重点器 
官(脊索、视杯、肾、心脏、肝胰脏)发育情况。鱼卵 
孵化后统计胚胎孵化率和仔鱼畸形率，仔鱼畸形的 
主要判别标准是体轴畸形、视杯畸形和卵黄囊肿胀。 
2 结果 
2．1 水中有机污染物的成分 
GC／MS分析结果表明，各水样中都可检出有机 
污染物。水中主要有机污染物以酞酸酯类及多环芳 
烃类为主，其它还包括烷烃、磷酸酯类、酯类、酮、酚、 
杂环等成分。表 1列出了各水样中含量最为丰富的 
6～8种化合物。从表中可以看出，邻苯二甲酸酯二 
丁酯(Dibutyl phthalate)和荧蒽(Fluoranthene)这两 
种美国EPA和中国水环境优先控制物在每个样品 
中都可检出，而且具有相对较高的色谱峰。此外各 
种菲类(Phenanthrene)、芘类(Py~ene)化合物及苯衍 
空白对照组(曝气 24 h自来水)、DMSO溶剂对照 生物等也有较高的含量。 
表 1 各水样中有机提取物的主要成分 
2．2 水中有机污染物对斑马鱼卵孵化率和仔鱼畸 
形率的影响 
从斑马鱼卵产出2 h内开始染毒，连续观察到 
染毒96 h。96 h后基本所有健康的鱼卵都可以孵 
化，但在各水样高剂量处理组都有一些不能孵化的 
鱼卵，这些鱼卵在倒置显微镜下都显示出心脏停止 
跳动、循环系统停止工作，为已死亡的卵。各水样的 
处理都呈现出鱼卵的孵化率随染毒剂量的增加而减 
少，而仔鱼畸形率则显示随染毒剂量的增加而增加 
的趋势，只有2004年8月的寸滩水样在高浓度处理 
后与中浓度处理相比仔鱼畸形率稍有下降(表2)。 
从斑马鱼的鱼卵孵化率和仔鱼畸形率这两个指标来 
看，大溪沟水样毒性略大于寸滩水样毒性，而枯水期 
两个点水样的毒性都大于对应点丰水期水样的毒 
性。 
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表 2 各水样处理对斑马鱼胚胎孵化率和仔鱼畸形率的影响 
3 讨论 
大溪沟位于重庆主城区，距嘉陵江与长江交汇 
处上游约3 km，该点上游工业和人口稠密，是渝中 
区水厂的取水点。寸滩位于嘉陵江和长江交汇处下 
游约5 km，重庆主城区所有排人江中的污染物都在 
此汇集。从GC／MS的结果来看，两个点有机污染物 
的种类比较类似，两个点枯水期和丰水期有机污染 
物的种类也比较类似。实验的结果与以往报道【2 
相比，有机污染物的种类也比较类似，但增加了多种 
菲类物质。菲是一种多环芳烃类物质，主要由石油 
燃烧产生，菲类物质的增加可能与重庆主城区机动 
车辆及水上交通船舶的增加有关。 
在所采集的四个水样中主要有机污染物以苯衍 
生物及多环芳烃类为主。每个水样中都检出了邻苯 
二甲酸二丁酯和荧蒽。邻苯二甲酸酯是一类增塑 
剂，在世界各地被大量使用，现在研究表明，邻苯二 
甲酸酯是一类环境雌激素类物质，对雄性和雌性均 
具有生殖毒性 ’5】，其在各种水体中的高检出率应 
引起足够重视。荧蒽与菲、芘等都是多环芳烃类物 
质，它们具有相似的作用途径，它们在细胞内有相同 
的受体——二芳烃受体 (aryl hydrocarbon recep— 
tor，AHR)，AHR激活后可作用于异形物反应元件 
(xenobiotic response element，XRE)，使该元件调控 
的一系列基 因，如细胞色素 P4501A1(Cytochrome 
P450 1A1，CYP1A1)等基因得以表达，而 CYP1A1 
的活化可将多环芳烃类化合物代谢代谢活化为亲电 
子物质，亲电子物质在细胞内作用于DNA和蛋白 
质，产生DNA和蛋白质加合物，导致细胞最终产生 
一 系列的生物学反应和毒性效应，如体重减轻、肝脏 
毒性、免疫功能紊乱、基因突变、甚至癌变等 ’ 。 
斑马鱼是水生生态毒理学研究常用的一种模式 
动物。用斑马鱼对其它水体的研究表明，对于水中 
的各种有机物，包括二恶英类似物、亲电子物质、有 
机重金属、抗生素等物质，甚至DMSO，斑马鱼都有 
非常敏感的反应，反映在其胚胎孵化率、幼鱼畸形 
率、幼鱼成活率、成鱼性别比例、成鱼体重、体长、产 
卵间隔等各个方面 1． 】。研究的结果表明，斑马鱼 
胚胎和仔鱼对嘉陵江和长江水中有机污染物也非常 
敏感。2．5倍浓缩的水样即可表现出斑马鱼卵孵化 
的延迟和仔鱼畸形率的增加。斑马鱼胚胎仔鱼实验 
的结果显示，大溪沟水样毒性略大于寸滩水样毒性， 
而枯水期两个点水样的毒性都大于对应点丰水期水 
样的毒性。结果可能是由于长江水流速大于嘉陵江 
水流速，而丰水期流速又大于枯水期流速，流速快的 
江水的稀释自净能力强而导致的。 
【参考文献】 
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[5] Garuthers CM，Foster PM．Critical window of male reproductive 
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· 8- 公共卫生与预防医学2007年第18卷第 1期 J ofPubHealth andPrevMed 2007．VoL18．No．1 
一 起流行性腮腺炎暴发的调查报告 
何晓辉 王学斌 
【中图分类号】R183．3 【文献标识码】B 【文章编号】1006-2483(2007)01-0008-01 
2006年3月27～29日，罗田县九资河镇滥泥畈中学发 
生流行性腮腺炎疫情，经流行病学调查证实，此次疫情系流 
行性腮腺炎暴发，现报告如下。 
1 流行病学特征 
1．1 基本情况 
滥泥畈中学位于罗田县九资河镇徐凤冲村，该校为小学 
和初中合办。有教职工30人，共有12个教学班，学生547人。 
其中幼儿班1个21人，一年级1个班36人，二、三年级(复式 
班)46人，四年级1个班44人，五年级2个班81人，六年级2 
个班124人，初中一年级2个班 100人，初二年级2个班 116 
人。学生主要来自该镇周边的9个村，该校学生自小学三年级 
至初二均在校寄宿，仅少数附近学生走读。全校547名学生中， 
在校寄读~L470人，走读生77人(含幼儿班及一、二年级)。 
1．2 发病情况 
首发病例为该校六(2)班学生王××，男，11岁，于3月 
20日发病，在村医务室治疗 1周后返校，3月27～29日陆续 
有学生发病，三天内共发病 30例，病例集中在六(2)班，共 
29例，占96．7％；患者中男生16例，占53．33％，女生 14例， 
占46．67％；年龄分布：11岁2例，占6．67％，12岁 10例，占 
33．33％，13岁17例占56．67％，14岁 1例占3．33％；时间分 
布：3月 27日发病 6例，占20％，3月 28日发病 12例，占 
40％，3月29日发病 12例，占4JD％；发病的学生均采取了隔 
离治疗并全部治愈。 
作者单位：438600 湖北省罗田县人民医院(何晓辉)；湖北省 
罗田县卫生防疫站(王学斌) 
· 调查研究 · 
2 临床特征 
30例患者均有不同程度的发热，其 中体温 37．4～ 
37．9~C 29例，38．0～38．9~C 1例，30例均有不同程度的双侧 
腮腺肿大，无其它并发症。 
3 讨论 
3．1 此次疫情经流行病学调查证实为一起流行性腮腺炎暴 
发。该镇既往未发生过腮腺炎流行，也未开展腮腺炎疫苗的 
普种工作。疫情发生后，一是对病例进行隔离治疗；二是对 
学校实行封闭管理，对未患病学生进行监测，每日测量体温 
2次；三是对在校学生用板兰根、大青叶等中草药进行预防 
服药；四是对教室、宿舍每天进行空气消毒，并对全校师生进 
行呼吸道传染病防治知识宣传；五是加强个人防护，经常开 
窗通风，常晒被褥 ，搞好环境卫生。采取上述措施后 ，疫情很 
快控制。 
3．2 首例患者未及时彻底隔离治疗，是导致此次疫情暴发 
的主要原因，发病学生全部为寄宿生，而且集中在六(2)班， 
居住拥挤，易感人群集中，密切接触机会多，加快了传播的速 
度。流行性腮腺炎在学校、托幼机构传播快，影响面广。学 
校要切实落实对学生晨检、夜查制度，发现患病学生及时报 
告，及时隔离治疗。宿舍、教室经常开窗通风换气，积极倡导 
学生接种腮腺炎疫苗。全面落实学校卫生工作条例，确保广 
大学生的安全。 
(收稿 日期：2006-08—15) 
(本文编辑 ：宋晓东) 
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重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对斑马鱼胚胎仔鱼的毒性研究

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重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对斑马鱼胚胎仔鱼的毒性研究

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