A virus disease of «Masedu» of artichoke has been observed, in a serious form, in southern Sardinia

(Italy). Affected plants are stunted with leaves heavily mottled, crinkled and laciniated.

On the basis of the herbaceous hosts reactions, physical properties «in vitro», spectrophotometry,

electron microscopy and serology, the virus recovered from diseased plants is identified

as an isolate of AMCV, belonging to «Tombusvirus» group, serologically undistinguishable from

the italian type isolate

Corda, Pietro Maria

Foddai, Antonio

Idini, G.

Italian

UnissResearch

ANNAbI 
DELLA FACOLTA' DI AGRARIA DELL' UNIVERSITA' 
______ SASSARI - ____ _ 
studi sassaresl 
Sezione III 1980 - 81 Volume XXV'IIl 
ANNAbI 
DELLA FACOLTA' DI AGRARIA DELL' UNIVERSITA' 
SASSARI 
DIRETTORE: G. RIVOIRA 
COMITATO DI REDAZIONE: M. DATTILO - F. FATICHENTI - C. GESSA - L. IDDA 
F. MARRAS - A. MILELLA - P. PICCAROLO - A. PIETRACAPRINA - R. PROTA 
R. SATTA - G. TORRE - A. VODRET 
studi sassaresl 
ORGANO UFFICIALE 
DELLA SOCIETÀ SASSARESE DI SCIENZE MEDICHE E NATURALI 
GALLIZZI . SASSARI· 1982 
Istituto di Patologia vegetale dell'Università di Sassari 
(Direttore: Prof. F. Marras) 
A. FODDAI, P. CORDA, G. IDINI 
REPERIMENTO DEL VIRUS DELL'« ARRICCIAMENTO MACULATO Il 
DEL CARCIOFO (AMCV) IN SARDEGNA" 
Nell'ambito delle indagini sistematiche che questo Istituto svolge già da diversi 
anni allo scopo di individuare i virus e le virosi del carciofo coltivato in Sardegna, 
abbiamo avuto modo di osservare, sin dal 1978, in diverse carciofaie del Campi-
dano di Cagliari (in particolare a Decimoputzu, Villasor e Villaspeciosa), nume-
rose piante della cv locale cc Masedu ), (I) con evidenti sintomi di sospetta natura 
virale. 
L'alterazione si manifesta sin dall'autunno con rachitismo delle piante e bollosità 
e deformazione delle foglie; inoltre, la lamina fogliare si presenta qua e là co-
sparsa di chiazze irregolari, piuttosto estese e di colore da verde pallido a bian-
castro, che le conferiscono l'aspetto tipico di un mosaico. 
L'intensità dei sintomi è massima e notevolissima nel periodo invernale. tanto 
che le piante infette spiccano anche a distanza. Le foglie più giovani appaiono 
vistosamente increspate. bollose, asimmetriche, spesso laciniate; addirittura, 
nei casi più spinti, ridotte alla sola rachide ed a piccole porzioni di tessuto 
perinervale. 
I soggetti più gravemente colpiti raramente fruttificano e ben presto soccombono. 
Quelli che riescono a sopravvivere producono qualche capolino, peraltro mal-
formato, di dimensioni ridotte e provvisto di brattee con vistose alterazioni di 
forma e di colore. 
Poiché tale sintomatologia richiama molto da vicino quella indotta dal virus del-
• Lavoro eseguito con un contributo finanziario del C.N.A. Ha collaborato alle ricerche Speranza 
Migheli. Operatore T.P. del C.N.A. 
(I) Si tratta di una cv inerme, meno diffusa dello .. Spinoso sardo w. localizzata soprattutto nella 
parte meridionale dell'Isola. 
141 
1'« arricciamento maculato» del Carciofo (cc Artichoke Mottled Crinkle Virus .. 
AMCV) ci è sembrato opportuno effettuare una serie di prove volte ad iden-
tificarne fagente. In questa nota riferiamo appunto sui risultati delle nostre 
ricerche. 
MATERIALI E METODI 
Per la trasmissione meccanica si è proceduto all'estrazione del succo da foglie 
infette di carciofo in presenza di tampone fosfato 0,1 M pH 7,2 (p:v = 1: 1) ad-
dizionato dell'1 % di Na-ascorbato ed alla successiva inoculazione su cc indica-
trici» erbacee tenute ad una temperatura di 18-24"C in serra. 
Le proprietà fisiche « in vitro " sono state determinate partendo da succo grezzo 
di carciofo e utilizzando come pianta da saggio Chenopodium quinoa Willd. 
la purificazione è stata effettuata mediante omogeneizzazione a freddo di foglie 
infette di carciofo, in presenza (p:v 1: 1,5) di acqua distillata contenente 
lo 0,2% di acido tioglicolico, seguita da chiarificazione con una miscela di 
cloroformio-butanolo (1 + 1) al 10% e da due cicli di centrifugazione differenziale. 
Il «pellet », risospeso in tampone fosfato (0,02 M pH 7,21. è stato stratifi-
cato in gradiente di saccarosio (10-40%), centrifugato a 24.000 r.p.m. per 150' 
e separato in un frazionatore per gradienti di densità ISCO. La frazione sepa-
rata, controllata allo spettrofotometro. è stata riconcentrata a 39.000 r.p.m. per 2 h. 
la sospensione virale così ottenuta è stata osservata al microscopio elettronico 
- presso "Unità di Ricerca di Bari del cc Gruppo Virus e Virosi delle Piante .. 
del C.N.R. previa fissazione delle particelle con formalina al 4% e colorazione 
negativa con PTA. 
Sempre con sospensioni purificate è stato immunizzato un coniglio mediante 
4 somministrazioni settimanali (1,5 mi di sospensione virale pari a 1,5 mg di 
virus per volta), le prime due sottocute e intramuscolo con "Freund's incom-
plete adjuvant ", la terza e la quarta endovena. 
l'antisiero ottenuto è stato titolato con la doppia diffusione in agar ( .. Ouchterlony 
test .. ). 
I saggi sierologici sono stati eseguiti in doppia diffusione mettendo a r~agire: 
- il nostro isolato con l'antisiero omologo e con anti-AMCV ed anti-TBSV (" anti-
Tornato Bushy Stunt Virus IO) fornitici dalla predetta Unità di Ricerca di Bari; 
- il nostro antisiero con l'antigene omologo e con l'isolato tipo italiano di AMCV 
sempre di provenienza barese. 
Parallelamente, l'isolato sardo è stato messo a confronto, mediante cc tube test IO, 
con anti-sano ed anti-Potyvirus latente del carciofo (FODDAI et al., 1977). 
142 
RISULTATI 
Trasmissione meccanica 
Chenopodium amaranticolor Coste et Reyn: lesioni locali necrotiche puntiformi; 
Ch. quinoa Willd.: lesioni locali necrotiche: 
Ocymum basllicum L.: infezioni localizzate sotto forma di maculature anulari 
nerastre con centro necrotico bianco-crema; 
Nicotiana c/evelandii Gray: infezioni localizzate costituite da maculature anulari 
necrotiche seguite da mosaico e malformazioni sistemici. 
Non hanno invece reagito all'inoculazione: Petunia hybrida Vilm., Nicotiana ta-
bacum L. « Samsun )t, N. glauca R. Grah., N. glutinosa L. e N. rustica L. 
Proprietà fisiche «in vitro» 
Punto di diluizione limite: 10-6 - 10-7 
Grado di inattivazione termica: 85·90"C 
Longevità (a 20"C): 75·90 gg 
Purificazione e microscopia elettronica 
Il virus centrifugato in gradiente di densità sedimenta in una banda singola. I 
preparati purificati contengono numerose particelle isometriche altamente in-
fettive, del diametro di 28-30 nm. 
Saggi spettrofotometrici 
Le sospensioni virali mostrano una curva di assorbimento della luce U.V. tipica 
delle nucleoproteine con Ema. = 258 nm ed Emin 242-244 nm. Il rapporto E2SO/ 260 
risulta di 0,63 corrispondente ad un contenuto di RNA del 15,30%. 
Sierologia 
Le sospensioni virali purificate hanno sempre reagito. in doppia diffusione, sia 
con l'antisiero omologo (titolo 1 :512) sia con anti·AMCV e anti-TBSV. dando 
origine a linee di preCipitazione di intensità pressoché uguale. Per di più, nelle 
reazioni del nostro antisiero contro l'antigene omologo e l'AMCV «italiano .. 
non si sono differenziate .. code» ai punti di unione delle linee di precipitazione. 
Viceversa, nelle prove mediante CI tube test If, il nostro isolato non ha mai reagito 
né contro anti·sano né contro anti-Potyvirus latente del carciofo. 
143 
DISCUSSIONE DEI RISULTATI - CONCLUSIONI 
L'alterazione del carciofo cc Masedu » reperita in Sardegna è senz'altro da identi-
ficare con l'cc arricciamento maculato It del carciofo. Infatti, i risultati ottenuti 
nel corso delle nostre prove sperimentali (trasmissione meccanica ad .. indica-
trici » erbacee, studio delle proprietà fisiche .. in vitro ", esami spettrofotometrici, 
saggi sierologici ed osservazioni al microscopio elettronico) dimostrano che 
l'entità infettiva reperita nelle piante malate è un isolato di AMCV, appartenente 
al gruppo cc Tombusvirus» (cc Tornato bushy stunt virus" = Virus del rachitismo 
cespuglioso del Pomodoro) (HOLLlNGS eSTONE, 1975; MARTELLI e QUACQUA-
RELLI, 1966; MARTELLI et al., 1971), sierologicamente indistinguibile dall'isolato 
tipo italiano. 
L'u arricciamento maculato» è, almeno finora, una virosi del carciofo esclusiva-
mente mediterranea. Il virus responsabile è stato infatti rinvenuto per la prima 
volta in Puglia (MARTELLI, 1965; QUACQUARELLI e MARTELLI, 1966; QUACQUA-
RELLf et al., 1966), successivamente in Marocco (FISCHER e LOCKHART, 19741 
e. più di recente, nell'Isola di Malta (MARTELLI et al., 1976); inoltre, sintomi di 
tipo .. arricciamento maculato " sono stati osservati anche in Grecia (cfr. MAR-
TELLI e RANA, 1976) e in Tunisia (WELVAERT e ZITOUNI, 1976), sebbene non ne 
sia stato identificato l'agente. 
Alla luce di questa nuova segnalazione si può, a nostro avviso, ragionevolmente 
presumere che AMCV sia ormai diffuso in tutti i Paesi carcioficoli del Mediter-
raneo. Per quanto riguarda più da vicino la Sardegna, ci sembra che non sia da 
trascurare il pericolo potenziale - data anche la capacità del virus di persistere 
nel terreno a concentrazioni ed infettività molto elevate (MARTELLI et al., 
1979) - che l'infezione possa estendersi all'altra ben più importante cultivar di 
carciofo, lo «Spinoso sardo", apparsa finora indenne dalla malattia. 
RIASSUNTO 
Nella Sardegna meridionale è presente. in forma piuttosto grave. una virosi del carciofo .. Masedu " 
caratterizzata da rachitismo delle piante e da mosaico, bollosità e laciniatura delle foglie. 
le reazioni degli ospiti erbacei, le proprietà fisiche «in vitro ", le osservazioni al microscopio 
elettronico ed i saggi spettrofotometrici e sierologici indicano che l'entità infettiva reperita nelle 
piante malate è un isolato di AMCV. appartenente al gruppo .. Tombusvirus", sierologicamente in-
distinguibile dall'isolato tipo italiano. 
144 
~UMMARY 
OCCURRENCE OF AMCV (ARTICHOKE MOTTLED CRINKLE VIRUS) IN SARDINIA 
A virus dlsease of .. Masedu lO artichoke has been observed, in a serio~s form, in southern Sardinia 
(Italy). Affected plants are stunted with leaves heavily mottled, crinkled and laciniated. 
On the basis of the herbaceous hosts reactions, physical properties .. in vitro., spectrophoto-
metry, electron microscopy and serology, the virus recovered from diseased plants is identified 
a<; an isolate of AMCV, belonging to .. Tombusvirus • group, serolog(cally undistinguishable from 
the itatian type isolate. 
Ringraziamo vivamente l'Unità di Ricerca di Bari, ed in particolare I Profl. M. Russo e GL Rana, 
per la preziosa collaborazione fornita. 
BIBLIOGRAFIA 
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Tunisia. Atti /I Congr. Intern. Studi Carciolo, Bari. pp. 865-875. 
145 
TAV. I 
Fig. 1 - Pianta d i carciofo • Masedu • noturalmente Infetta dal \lirus del I '. arricci amento maculato •. 
• Masedu • af,lchoke plant natufaJly in/eeled by ~ moltled crlnkle • virus: Fig. 2 . Foglia con evidente 
laclnlarura. Strang/y , ladn/area. lea/: Fig. 3 - Capolino distorto e ma-Iformalo. HB8d showlng 
dlstorslons and malformatlons; Fig. 4 • Brattee deformate e con • rottura di colore ". Scales wl/h 
deformatlons and • co/aur brealclng -. 
146 
TAV. Il 
Figg. 1 e 2 - Lesioni locali causate dal virus del carciofo • Masedu .. su foglie di Chenopoc!,vm 
quln08 Willd. (1) e Ocymum bas/llcum L. (2). Localleslons caused by the • Masedu • artlchoke virus 
or: Chenopodlum qulnoa Wllld. (1) and Ocymum basllicum L. (2) /eaves: Fig. 3 . Dimostrazione del· 
l'identl tà s lerologlca del vi rus Isolato da carciofo In Sardegna e de II' AMCV. L 'anl isiero da noi 
ottenuto (S) reagisce con l'antigene omologo (O) e con l'AMCV • Italiano .. (A) senza d'IHerenzlare 
.. code • al punti di unione delle linee di precipitazione. Evidence of the serO/Oglc81 Identlty of the 
Sardin/a artichoke virus 8nd AMCV. fn the rescl/on o/ our antiserum (S) againsi homologous (01 
éJnd • Ital/an • AMCV (A) 8ntJgens. the preclpitin IInes loin without formlng spurs Br the Jtlnctlons; 
Fig. 4 - Particelle di AM CV contrastate con PT A in una sospensione pUrificata . Barra = f 00 nm. 
Negarive1'l slB/ned (PT A) AMCV p8rtiGles In a purified prepsfation. Bar = 10D nm. 


Reperimento del virus dell'«arricciamento maculato» il del carciofo (AMCV) in Sardegna

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