The Authors report on a serious bacterial spot of greenhouse tomato found in Sardinia (Italy)

on last years.

The symptomatology, epidemlology and inducing factors are described, as well as the results of

pathogenicity test.

The causal agent has been isolated in pure culture and identified by means of morfological,

cultural, biochemical, and serological characters as Pseudomonas syringae van Hall.

Furthermore, methods of dlsease preventlon and control are brlefly exposed

Carta, Carmela

Corda, Pietro Maria

Fiori, Mario

Italian

UnissResearch

ANNAbI 
DELLA FACOLTA' DI AGRARIA DELL' UNIVERSITA' 
______ SASSARI _____ _ 
studi sassaresi 
Sezione III 1980 - 81 Volume XX\lIII 
ANNAbI 
DELLA FACOLTA' DI AGRARIA DELL' UNIVERSITA' 
SASSARI 
DIRETTORE: G. RIVOIRA 
COMITATO DI REDAZIONE: M. DATTILO - F. FATICHENTI - C. GESSA - L. IDDA 
F. MARRAS - A. MILELLA - P. PICCAROLO - A. PIETRACAPRINA - R. PROTA 
R. SATTA - G. TORRE - A. VODRET 
studi sassaresl 
ORGANO UFFICIALE 
DELLA SOCIETÀ SASSARESE DI SCIENZE MEDICHE E NATURALI 
GALLIZZI . SASSARI· 1982 
Istituto di Patologia Vegetale dell'Università di Sassari 
[Direttore: Prof. F. Marras) 
C. CARTA - P. CORDA - M. FIORI 
LA cc MACULATURA BATTERICA» DEL POMODORO (LYCOPERSICUM 
ESCULENTUM Mil!.) CAUSATA DA PSEUDOMONAS SYRINGAE van Hall. * 
In questi ultimi anni sempre più numerose sono le coltivazioni di pomodoro - e 
in pieno campo e, soprattutto, in coltura protetta - gravemente danneggiate 
da infezioni di natura batterica. Accanto a quelle ben note causate da Corynebac· 
terium michiganense (E.F. Sm.) Jensen, Xanthomonas vesicatoria (Doidge) Dowson 
e Pseudomonas tomato (Okabe) Alstatt, già da tempo presenti in Sardegna (cfr. 
BOSELLI e CICCARONE, 1960; MARRAS, 1963), altre se ne osservano con sin-
tomatologia insolita e con una diffusione e gravità via via crescenti che costi-
tuiscono motivo di seria preoccupazione per gli agricoltori. 
Per questa ragione e per la grande importanza che la coltivazione del pomodoro 
riveste nell'economia dell'Isola, queste malattie sono attualmente oggetto di 
studio nel nostro Istituto, sia per la caratterizzazione degli agenti patogeni, sia 
per l'individuazione dei mezzi di prevenzione e di lotta. 
In questa prima nota si riferisce sull'alterazione causata da Pseudomonas syringae 
van Hall. 
CARATIERI GENERALI DELLA MALATTIA - SINTOMATOLOGIA 
La malattia si manifesta nelle colture protette autunno-vernine o vernino-primave· 
rili, in serre non riscaldate e nelle quali il grado di umidità è piuttosto elevato. 
Si osserva prevalentemente sulle piante già abbastanza sviluppate, in genere 
con 2-3 palchi. Finora è stata riscontrata esclusivamente sulla cv Early pak e 
sugli ibridi Fandango e Flamingo. 
• Lavoro eseguito con il contributo finanziario del M.P.1. per ricerche scientifiche. Ha collaborato 
alla ricerca la Sig.ra Maria Teresa Dattilo, tecnico dell'Istituto. 
215 
L'affezione è caratterizzata dalla presenza sul fusto di macchie brune. necrotiche. 
leggermente depresse, a contorno ben definito. di forma ora più o meno rotondeg-
giante, ora allungata, del diametro variabile da qualche mm fino a 2 cm circa. 
spesso coalescenti. tutte disposte in senso longitudinale. Macchie del tutto 
simili, ma ovviamente più piccole, si notano anche lungo i piccioli e i rachidi 
delle foglie e perfino sui peduncoli e sui sepali fiorali. In corrispondenza delle 
macchie, all'interno del fusto il midollo si presenta rappreso e sfrangiato. a 
tratti addirittura manca del tutto. 
Sulle lamine fogliari si osservano macchie necrotiche internervali, bruno·scure, 
quasi nerastre, circondate da un alone clorotico. dapprima isolate. poi spesso 
aggregate, interessanti buone porzioni del lembo, che ingialliscono e via via 
avvizziscono e si disseccano. 
ISOLAMENTO DEL PATOGENO - PROVE DI PATOGENfCITA' 
Il /patogeno è stato isolato su agar nutritivo da frammenti di fusto infetto. Dopo 
48 ore di incubazione a 2S"C, tutti gli isolati ottenuti erano costituiti da colonie 
biancastre. di consistenza viscida, piatte, rotondeggianti, con margine dentato, 
del diametro di 2 mm. 
le prOVE di patogenicità sono state eseguite su piante di pomodoro" Early pak IO 
di 60 gg di età, allevate in vasetti con terreno sterile e tenute in cella climatica 
a 25"C. Ventiquattro ore prima dell'inoculazione le piante erano state coperte 
con buste di plastica, per mantenere elevato il grado di umidità e renderle 
quindi più recettive. 
Le inoculazioni sono state effettuate con due modalità diverse: 
- sospensioni in acqua sterile contenenti 105 cellule/mi sono state iniettate. 
con siringa sterile, nelle ferite prodotte artificialmente distaccando i piccioli 
fogliari del terzo inferiore del fusto. 
Le piante test sono state inoculate con analogo procedimento usando acqua 
distillata sterile. A 48 ore dall'inoculazione. lungo il fusto comparivano, in senso 
acropeto. delle piccole macchie brune che nei giorni successivi aumentavano 
come intensità e come numero fino ad interessare anche i piccioli fogliari, de-
terminando l'ingiallimento e il progressivo avvizzimento delle foglie. Nelle 
piante test non si osservava alcun sintomo; 
- sospensioni batteriche. preparate come in precedenza. sono state spruz-
zate con un vaporizzatore sterile su piante ave poco prima erano state causate 
piccole lesioni sul fusto mediante leggero sfregamento. A 48-72 ore sui fusti, 
sui piccioli e su parte dei lembi fogliari comparivano delle macchioline brunastre 
216 
Smtoml della maculaturn batterica dci pomodoro su lusto (Fig . \ 1. pedullcoli e sepali (Fig 2) . 
rnchide fogliélre (Fig. 3) . foglia (Fig . 4). Macchie necrotlche SU piClntin!\ infettata artificialmente 
(Fig . 5). 
Symptoms 01 lomillO bilGle rial spot 011 slem (Flg I) . frUII scpals and pcduncles (Fig. 2). foll,H 
rilchls (Fig. 3). leJvcs (FIO Il) Nccrotic spOIS on artdlclal l y Infected plant (Fig . SI 
217 
che 3ccrescendosi divenivano del tutto simili a quelle riscontrate in natura. Anche 
in questo caso sulle piante test. trattate con acqua distillata sterile, non com-
pariva alcun sintomo. 
CARATTERI MORFOLOGICI. COLTURALI E BIOCHIMICI 
111 colture di 24 ore su agar nutritivo le cellule si presentano a forma di baston-
r'ni diritti, con estremità arrotondate, isolati o appaiati, mobili, con flagelli 
polari. Non fOl'mano spore né capsule. Sono Gram negativi e acido non resistenti. 
Dopo 48 ore di incubazione a 25°C su agar nutritivo + 1 % di glicerina si osser-
\/ano colonie bianche, opache, lievemente mucoidi, circolari. piatte. con margine 
1l1tero. del diametro di 3 mm. Su agar nutritivo + 5% di saccarosio le colonie 
sono invece più grandi, bianche, bombate. mucoidi, levano-positive. 
Sia gli isolati originali che quelli ottenuti artificialmente producono pigmento 
fluorescente sul substrato « B» di KING et al., (1954). 
Determinano entro 12 ore la reazione di ipersensibilità su piantine di tabacco 
« White Burley» saggiate con il metodo di KLEMENT (1963). 
Sì sviluppano a 4. 10 e 15°C, ma non a 4 PC: la temperatura ottimale di crescita 
è tra 25 e 28"C. 
Sono ossidasi negativi (KOVACS, 1956) e catalasi positivi. 
Metabolizzano il glucosio in modo ossidativo (HUGH e LEIFSON. 1953). 
Producono rapidamente acido senza gas (AYERS et al., 1919) da arabinosio, 
galattosio, glucosio, fucosio, mannosio. ramnosio, xilosio, cellobiosio. saccarosio, 
glicerina, mannitolo e sorbitolo. Non producono acido né gas da lattosio. maltosio, 
raffinosio, inulina. destrina, salicina e dulcitolo. Utilizzano citrato, malato e suc-
cinato e solo in parte lattato e tartrato. 
Idrolizzano l'amido, liquefanno la gelatina secondo LELLIOTT et al., (1966) in 
sette giorni. 
Idrolizzano caseina ed esculina, ma non tirosina. 
Non producono alcali dall'arginina secondo THORNLEY (1960) e non riducono 
nitrati. 
Determinano alcalinizzazione e successiva coagulazione del latte tornasolato. 
Non producono ammoni da peptone. né indolo da triptofano, né acido solfidrico 
da cisteina. 
Idrolizzano l'urea secondo CHRISTENSEN (1946). 
Non liquefanno il gel pectico (PATON, 1959), né provocano marciume di fettine 
di patata « in vitro » (LELLIOTT et al., I.c.). 
Non ossidano 'il gluconato di sodio (LELLIOTT et al., I.c.). 
218 
Tabella 1 • Risultati dei saggi biochimici. 
Saggi Periodi di osservazione in 
2 3 4 5 6 7 15 
Acidità da: arabinosio + + + + + + + 
galattosio + + + + + + + 
glucosio + + + + + + + 
fucosio + + + + + + + 
mannoslo + + + + + + + 
ramnosio + + + + + + + 
xilosio + + + + + + + 
cellobiosio + + + + + 
lattoslo 
maltoslo 
raffinosio 
saccarosio + + + + + 
inulina 
destrina 
salicina 
dulcitolo 
glicerina + + + + + 
mannitolo + + + + + 
sorbltolo + + + + + 
Utilizzazione di: citrato + + + + + + + 
lattato ± ± ± ± ± ± ± 
malato + + + + + + + 
succinato + + + + + + + 
tartrato ± ± ± ± ± ± ± 
Idrolisi di: amido + 
gelatina + + + 
caseina + 
esculina + 
Metabolismo del glucosio: ossidativo + + + + + + + 
fermentativo 
Produzione di 2·chetogluconato 
Arginina deidrolasi 
Riduzione dei nitrati 
Produzione di indolo 
Produzione di H2S 
Ossidasi 
Catalasi + 
Marciume patata 
liquefazione del pectato 
Produzione di ammoni da peptone 
Produzione di ammoni da urea + 
Produzione di tlrosinasi 
Produzione di leciti nasi 
Azione sul latte tornasolato + 
lipolisi del Tween 80 
lipolisi della margarina 
Utilizzazione fonti di carbonio: alanina 
glucosio + + + + + + + 
inositolo + + + + + + + 
trealosio 
treonina 
valina 
+ reazione positiva 
± reazione debolmente positiva 
reazione negativa 
219 
Non producono lecitinasi; non lipolizzano il Tween 80, né la margarina. 
Come fonti di carbonio per la crescita (MISAGHI e GROGAN, 1969) saggiate 
secondo la tecnica di LEDERBERG e LEDERBERG (1952), utilizzano glucosio e 
inositolo, non alanina, trealosio, treonina e valina. 
I risultati di tali saggi biochimici sono riassunti nella tabella n. 1. 
IDENTIFICAZIONE DEL PATOGENO - DIFFUSIONE - MEZZI DI LOTTA 
In base ai caratteri morfologici, colturali e biochimici il microrganismo da noi 
isolato deve essere ascritto al gruppo la dello schema di LELLIOTT et al., I.c.) e 
più precisamente a Pseudomonas syringae van Hall. Tale identificazione è suf-
fragata anche dal risultato della prova sierologica effettuata mediante "tube 
test ,,; infatti il ceppo Pseudomonas syringae ATCC 19310 ha reagito positiva-
mente con l'antisiero al nostro isolato. 
Pseudomonas syringae è uno schizomicete cosmopolita, ubiquitario e altamente 
polifago. ELLIOn (1951) e STAPP (1958) lo annoverano anche su pomodoro, ma 
riteniamo si tratti di semplici citazioni di vecchia data. Nella letteratura fitopato-
logica più recente, a quel che ci consta, P. syringae è stato indicato in USA 
quale agente di una maculatura fogliare su piantine da trapianto (JONES et al., 
1981). Altre due segnalazioni, l'una di VOLCANI (1954) in Israele su frutti, 
l'altra di ERCOLANI (1966) in Italia su fusto di pianti ne, si riferiscono rispettiva-
mente a un ceppo pectinolitico di P. syringae e ad una pseudomonade pectolitica 
assimilabile a quelle del gruppo Il di LELLIOn et al., (I.c.). 
Circa i mezzi di lotta contro questa batteriosi, a parte quelli preventivi - im-
piego di sementi sane e accorgimenti agronomici (contenimento delle conci-
mazioni azotate e dell'irrigazione, aereazione dell'ambiente, ecc.) atti a creare 
condizioni poco favorevoli allo sviluppo del patogeno - efficaci si sono dimo-
strati i trattamenti da noi effettuati con composti a base di rame subito dopo la 
comparsa della malattia. 
RIASSUNTO 
Gli Autori riferiscono su una grave • maculatura batterica. del pomodoro, riscontrata in questi 
ultimi anni in Sardegna, in coltura protetta. 
Vengono descritte la sintomatologia, le cause predisponenti e l'epidemiologia della malattia. 
L'agente patogeno è stato isolato in coltura pura e, in base ai caratteri morfologici, colturali, 
biochimici e sierologici, identificato con Pseudomonas syringae van Hall. 
Vengono inoltre indicati i mezzi di prevenzione e di cura atti ad impedire la diffusione della 
malattia. 
220 
SUMMARY 
rOMATO BACTERIAL SPOT CAUSED BY PseudC'monas syringae van Hall. 
The Authors report on Il serious bacterlal spot of greenhouse tomato found In Sardlnia (Italy) 
on last years. 
The symptomatology, epidemlology and inducing factors are described, as well as the results of 
pathogenlclty test. 
The causai agent has been isolated in pure culture and Identified by means of morfological, 
cultural, blochemlcal, and serologlcal characters as Pseudomonas syringae van Hall. 
Furthermore, methods of dlsease preventlon and control are brlefly exposed. 
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La «maculatura batterica» del pomodoro (<i>Lycopersicum esculentum</i> Mill.) causata da <i>Pseudomonas syringae</i> van Hall.

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