Orientador : Prof. Dr. Anderson Joel Martino AndradeCoorientador : Profª. Drª. Rosana Nogueira de MoraisDissetação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Fisiologia. Defesa: Curitiba, 29/08/2016Inclui referências : f. 74-84Área de concentração : Fisiologia endócrinaResumo: Nas ultimas décadas houve um aumento marcante na produção de produtos químicos industriais e, apesar de inúmeros benefícios, essas substancias também passaram a representar um desafio do ponto de vista de contaminação ambiental e saúde publica. A exposição a múltiplas substancias por diferentes vias faz da quantificação desses agentes em amostras biológicas (biomonitoramento) uma estratégia essencial para a avaliação da situação real de exposição e riscos a saúde humana. Dentre as substancias químicas que mais causam preocupação estão os desreguladores endócrinos, especialmente quando a exposição ocorre durante períodos críticos de susceptibilidade, como a gestação. Neste contexto, o estudo Curitibano de Investigação do Ambiente e Reprodução (CUIDAR) foi delineado como um estudo coorte gestacional no âmbito do programa de saúde maternoinfantil da cidade de Curitiba (Mãe Curitibana), com o objetivo de avaliar a exposição de gestantes a desreguladores endócrinos ambientais, possíveis preditores de exposição, bem como a relação entre tais exposições e desfechos endócrinos e reprodutivos em recemnascidos. Esta dissertação apresenta os resultados da fase piloto deste estudo, com 50 gestantes recrutadas no inicio da gestação em três unidades de saúde de Curitiba. Os seguintes critérios de inclusão foram utilizados: consentimento livre e esclarecido de gestantes moradoras de Curitiba, <16 semanas de gestação, idade entre 18 e 40 anos e gestação classificada como baixo risco. Foram aplicados questionários sobre os hábitos de vida familiares no inicio, metade e final da gestação e ao nascimento. Para as analises de desreguladores endócrinos por cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas foram utilizadas amostras urinarias do inicio da gestação e, adicionalmente, um "pool" constituído de alíquotas de 3 amostras representativas de todo o período gestacional: a primeira, a mediana e a ultima amostra coletadas. Foram quantificados 9 parabenos, 7 fenois e 24 metabolitos de ftalatos. Após o parto, os recem-nascidos do sexo masculino e feminino foram submetidos a um exame físico para avaliação genital e de medidas antropométricas, incluindo a distancia anogenital, marcador externo do ambiente androgênico pré-natal. Realizamos a analise de estatística descritiva para as concentrações urinarias maternas dos analitos analisados e examinamos as possíveis associações entre tais concentrações e fatores socio-demograficos e ligados ao estilo de vida. Nossos resultados mostraram um perfil de exposição distinto nas gestantes do CUIDAR em relação a estudos conduzidos em outros países, com concentrações urinarias menores de parabenos, porem concentrações maiores de diversos desreguladores endócrinos de preocupação toxicológica, como o bisfenol A, o triclosan e metabolitos de vários ftalatos anti-androgenicos, como o di-iso-butil ftalato (DiBP), o Di-n-butil ftalato (DBP) e o di-2-etilhexil ftalato (DEHP). Alem disso, detectamos a presença de metabolitos do di-iso-pentil ftalato (DiPeP), um ftalato não reportado em estudos de biomonitoramento em outros países, em todas as gestantes do CUIDAR. Nossos resultados confirmaram muitos dos preditores de exposição dos analitos mensurados, incluindo associações entre uso de produtos de cuidado pessoal e parabenos e fenois, índice de massa corporal e uso de plásticos e BPA e a relação de ftalatos com uso de garrafas plásticas, filmes plásticos, esmalte para unhas e alguns fatores dietéticos. O exame físico foi realizado em apenas 19 recém-nascidos, de forma que não foi possível examinar a relação das medidas antropométricas obtidas com as concentrações urinarias de desreguladores endócrinos. Nossos dados demonstram que estudos de biomonitoramento e epidemiologia reprodutiva devem ser priorizados no Brasil, a fim de entendermos o perfil de exposição da nossa população, possíveis impactos sobre a saúde, definição de estudos toxicológicos prioritários, bem como para a adoção de medidas de saúde publica e educação para minimizar a exposição a agentes químicos ambientais. Palavras chave: Biomonitoramento, Desreguladores endócrinos, Parabenos, Fenóis, Ftalatos, Saúde materno-infantil.Abstract: In the last decades, there has been a significant increase in the production of industrial chemicals that, despite several benefits, represent a challenge for the environment and pulic health. Quantification of chemicals in biological samples (biomonitoring) represent one of the best alternatives to estimate human exposure and health risks, especially considering the real scenario of multiple chemicals and routes of exposure. Endocrine disrupting chemicals are among the substances that cause most significant health concerns, particularly for exposure dutring critical windows of susceptibility, such as gestation. The Curitiba Reproductive and Environment Study (CARES) was designed as a gestational cohort within the framework of maternal health care program of Curitiba (Mae Curitibana) to determine the esposure of pregnant women to environmental endocrine disruptors, predictors of exposure, and possible endocrine and reproductive outcomes in newborns. This dissertation presents the pilot phase results with 50 women in early pregnancy in three health care units of Curitiba. The following inclusion criteria were used: free consenting pregnant women residing in Curitiba, < 16 weeks pregnancy, 18-40 years old, low risk pregnancies. Questionnaires on lifestyle habits were administered at the beginning, mid, and late gestation and following birth. For the analysis of endocrine disruptors through liquid chromatography/mass spectrometry, we used maternal urinary samples collected in early pregnancy and, additionally, a pool of 3 aliquots of samples representing the whole gestational period: first, median and last urine samples collected by participants. We quantified 9 parabens, 7 phenols, and 24 phthalate metabolites. After birth, male and female newborbns were submitted to a physical exam consisting of genital evaluation and anthropometric measurements, including the anogenital distance, an external marker of prenatal androgenic environment. We conducted descriptive statistics on maternal urinary concentrations of the analytes and examine possible associations between such concentrations and sociodemographic and lifestyle factors. Our results indicate a different exposure profile in CARES participants in relation to populations studies in other countries, with lower urinary concentrations of parabens, but higher concentrations of several endocrine disruptors of toxicological concern, including bisphenol A, triclosan, and metabolites of several antiandrogenic phthalates, such as di-iso-butyl phthalate (DiBP), di-n-butyl phthalate (DBP), and di-2(ethylhexil) phthalate (DEHP). In addition, we detected in all CARES participants the presence of di-iso-pentyl phthalate (DiPeP), a phthalate ester that is not reported in biomonitoring studies in other countries. Our results confirmed many predictors of exposure of the measured chemicals, including the associations between the use of personal care products and concentrations of parabens and phenols, body mass index and use of plastics and bisphenol A, and the relationship between phthalates and the use of plastic bottles, plastic films, nail polish, and some dietetic factors. The physical exam was performed in 19 newborns, precluding the analysis of associations between anthropometric measurements and urinary concentrations of endocrine disruptors. Overall, our results indicate that biomononitoring and reproductive epidemiology studies should be prioritized in Brazil to increase our understanding of the profile of chemical exposures in Brazilian populations, possible health outcomes associated with such exposures, and to set priorities in animal toxicology studies, public health policies and education programs to minimize exposure. Keywords: Biomonitoring, Endocrine Disruptors, Parabens, Phenols, Phthalates, Maternalchild health
