Orientadora : Profª. Drª. Eliane Carneiro GomesOrientador : Prof. Dr. Walfrido Kühl SvobodaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 21/02/2014Inclui referênciasÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Os arbovírus de maior interesse em saúde pública pertencem à família Flaviviridae, gênero Flavivirus. Os Flavivirus são transmitidos por vetores artrópodes hematófagos e têm nos animais vertebrados, como os primatas não humanos e o homem, os seus hospedeiros. Estes vírus representam um sério problema de saúde pública no Brasil e no mundo devido ao seu potencial epidêmico e por serem responsáveis por elevadas taxas de morbidade e mortalidade. Esta situação requer estudos para identificação destes vírus nos seus hospedeiros e vetores, possibilitando a previsão de epidemias em humanos. A implementação de metodologias virológicas como a reação de transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase pode desempenhar um importante papel no diagnóstico de Flavivirus. O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de arbovírus (gênero Flavivirus) de interesse em saúde pública em primatas não humanos nos estados do Paraná e Mato Grosso do Sul, aplicando técnicas de biologia molecular a fim de fornecer subsídios aos serviços de saúde pública para contribuir na prevenção e controle de epizootias e epidemias a partir das informações epidemiológicas sobre a circulação de Flavivirus nas regiões estudadas. Foram utilizadas amostras de sangue (46) e soro (34) de 80 primatas não humanos de três diferentes gêneros: Alouatta, Callithrix e Sapajus que viviam em regiões onde havia a possibilidade de contato com seres humanos. Todas as amostras (80) foram provenientes de animais visivelmente saudáveis, caracterizando uma ação de vigilância ativa de epizootias. As amostras foram analisadas no período de dezembro de 2012 a agosto de 2013. Para o processamento destas amostras foi estabelecido e padronizado um protocolo inédito utilizando a técnica de transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase. Posteriormente, as amostras foram submetidas à eletroforese em gel de poliacrilamida e sequenciamento genético quando necessário, porém, não foi evidenciada a presença de Flavivirus em nenhuma amostra. Estes resultados, mesmo sendo negativos, contribuem com informações epidemiológicas sobre a não circulação destes vírus neste grupo de primatas não humanos durante o período analisado e o protocolo laboratorial inédito empregado foi considerado adequado. Desta forma, se fazem necessárias ações de investigação mais abrangentes, contemplando um maior número de indivíduos bem como outros hospedeiros destes vírus. Pesquisas sobre a circulação de Flavivirus em grupos de animais que vivem em regiões próximas a seres humanos podem auxiliar os serviços de saúde pública na elaboração de estratégias de prevenção e controle destas doenças.Abstract: The arboviruses that are most relevant to public health belong to the Flaviviridae family, Flavivirus genus. The flaviviruses are transmitted by blood-sucking arthropod vectors and the vertebrate animals as nonhuman primates and man are their hosts. These viruses represent a serious public health problem in Brazil and worldwide in view of their epidemic potential and high morbidity and mortality rates. Thus, studies are needed to identify these viruses in their hosts and vectors, enabling a prediction of epidemics in humans. The implementation of virological methods such as reverse transcription reaction followed by the polymerase chain reaction may play an important role in the diagnosis of Flavivirus. The aim of this study was to investigate the presence of arboviruses (Flavivirus genus) of interest in public health in nonhuman primates in the states of Paraná and Mato Grosso do Sul, applying molecular biology techniques to provide subsidies to public health services to contribute to prevention and control of animal diseases and epidemics from epidemiological information on the movement of flaviviruses in the studied region. Samples of 80 nonhuman primates: blood samples (46) and serum samples (34) from three different genera Alouatta, Callithrix and Sapajus living in locations close to human populations were used. All samples (80) were obtained from visibly healthy animals, featuring an action of active surveillance of animal diseases. The samples were analyzed from December 2012 to August 2013. To process these samples was established and standardized a novel protocol using the technique of reverse transcription followed by polymerase chain reaction. Subsequently, the samples were subjected to electrophoresis in polyacrylamide gel and genetic sequencing when needed, however, was not detected the presence of Flavivirus in any sample. These results, even negative, contribute with epidemiological information on the non-circulation of these viruses in this group of nonhuman primates during the period analyzed and the novel laboratory protocol used was considered adequate. Thus, actions for more comprehensive research are needed, covering a larger number of individuals as well as other hosts of these viruses. Researches of Flavivirus circulation in groups of animals living near humans regions can assist public health services in strategies to prevent and control these diseases
