Klivényi, Péter

Hungarian

Klivényi Péter

University of Szeged

Immunhisztokémiailag a baktérium tokjának több, eltérő antigenitású, genus- vagy species-függő epitopja tüntethető fel. A bakteriális genom néhány specifikus szakasza -esetleg polimeráz láncreakcióval (PCR) történő szaporítást követően - jelölt DNS-oligonukleotidokkal detektálható. Irodalom 1. Lyme Disease and Related Disorders - 2nd International Symposium, Vienna, Austria, September 1985. 2. Johnston et al. Lyme arthritis. Spirochetes found in synovial microangiopathic., lesions. Am J Pathol 1985;118:26-34. A polimeráz láncreakció szerepe a Lyme-neuroborreliosis diagnózisában Klivényi Péter SZOTE, Neurológia A Lyme-neuroborreliosisban (LNB) az anamnézis, a klinikai tünetek nem mindig típusosak. Ezért nevezik a Lyme-kórt "nagy imitátornak". A szerológiai próbák a.i álpozitív és az álnegatív eredmények miatt nem megbízhatóak, a liquorvizsgálat sem ad , mindig pontos eredményt a hagyományos laboratóriumi tesztekkel. Az eddigi laboratóriumi diagnosztikai módszerek közül az egyetlen elérhető direkt lehetőség a tenyésztés. Ezért használtak a szerzők a Borrelia burgdorferi DNS-ének kimutatására egy molekuláris biológiai módszert, a polimeráz láncreakciót (PCR). Módszerek: A kiválasztott betegeket a következő 4 csoportba osztották: biztos LNB, valószínű LNB, lehetséges LNB, egyéb neurológiai betegség (tumor, stroke, syphilis stb.). Vizsgálataikat speciálisan kiépített és felszerelt laboratóriumokban (légkondicionálás, védőruházat) végezték. Első lépés a kórokozó DNS-ének preparálása a liquorból, majd nukleotidok, primer és DNS-polimeráz enzim hozzáadása után inkubálás következik. Ezután a folyamatot megismételték (ún. első és második kör). A keletkezett oligonukleotidok kimutatása enzimmel kapcsolt primerrel történt (hibridizáció). Eredmények: A szerzők úgy találták, hogy a biztos és a valószínű LNB betegcsoportban 46% a lehetséges LNB csoportból 13%, míg az egyéb neurológiai betegek esetén 3% volt a pozitív eredmény. Konklúzió: A polimeráz láncreakció és hibridizációs technika nagyon érzékeny módszer a Borrelia burgdorferi DNS-ének kimutatására (1-3 DNS molekula/ml liquor). Már a fertőzés után két héttel pozitív lehet a vizsgálat. Specificitása messze meghaladja az eddigi metodikákat (álpozitív reakciót csak 3%-ban adott). A módszer rutinszerű alkalmazásának számos akadálya van. Nagyon alacsony a kórokozók száma a szövetekben és a liquorban; a felületi antigén rendkívül variábilis; a szövetekben DNS-polimeráz inhibitorok vannak; a pozitív PCR sem bizonyít aktív fertőzést, mert a DNS származhat elpusztult baktériumból is. A módszer helyének tisztázása a diagnosztikában további klinikai tapasztalatokat igényel. Előnye hogy gyors, érzékeny, reprodukálható. Hátránya, hogy rendkívül költséges. Kiemelendő, hogy a módszer a biztos és a lehetséges LNB esetében is csak 46%-ban pozitív. 65 Irodalom 1. Pachner AR et al. Detection of Borrelia burgdorferi DNA in cerebrospinal fluid by polymerase chain reaction. Ann Neurol 1992;32:284. 2. Jaulhac B et al. Detection of Borrelia burgdorferi in cerebrospinal fluid of patient with Lyme borreliosis. N Engl J Med 1991 ;324:1440. 3. Pachner AR et al. Central nervous system manifestation of Lyme disease. Arch Neurol 1989;46:790-795. 66 

A polimeráz láncreakció szerepe a Lyme-neuroborreliosis diagnózisában

http://acta.bibl.u-szeged.hu/18423/1/szote_neuro_065-066.pdf

A polimeráz láncreakció szerepe a Lyme-neuroborreliosis diagnózisában

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

University of Szeged