research

Comprobación dunha interacción física de HMGB1 coa súa diana

Abstract

Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Bioloxía molecular, celular e xenética. Curso 2016/2017[Resumen] En estudios previos, mediante el sistema del doble híbrido en levaduras, se había descrito la interacción física entre la proteína humana HMGB1 y el factor transcripcional YY1, ambas relacionadas con procesos cancerígenos. Este método presenta alrededor de un 5% de falsos positivos, por lo que en el presente trabajo se ha intentado confirmar dicha interacción, en la línea celular de próstata tumoral PC-3, mediante la técnica de inmunoprecipitación, utilizando para la inmunoprecipitación anticuerpos anti-HMGB1 y para la detección de la proteína coinmunoprecipitada un anticuerpo anti-YY1. Los resultados obtenidos no fueron positivos, lo que no descarta que ambas proteínas puedan interaccionar en otras condiciones.[Abstract] In previous studies, using the yeast two hybrid system, the physical interaction between the human protein HMGB1 and the transcription factor YY1 was described, being both proteins related to carcinogenic processes. This method presents about 5% of false positives, therefore in the present work we have tried to confirm this interaction in the PC-3 tumor prostate cell line, by the co-immunoprecipitation technique. For the immunoprecipitation the anti-HMGB1 antibody was used, and for detecting the binding partner the anti-YY1 antibody. Negative results were obtained, which does not discard that both proteins might interact in other conditions.[Resumo] En estudos previos, mediante o sistema do dobre híbrido en lévedas, describíouse a interacción física entre a proteína humana HMGB1 e o factor transcripcional YY1, ambas relacionadas con procesos canceríxenos. Este método presenta alrededor dun 5% de falsos positivos, polo que no presente traballo inteutouse confirmar dicha interacción, na línea celular de próstata tumoral PC-3, mediante a técnica de inmunoprecipitación, empregando para a inmunoprecipitaciónanticorpos anti-HMGB1 e paraa detección da proteína coinmuniprecipitada un anticorpo anti-YY1. Os resultados obtenidos non fueron positivos, o que non descarta que ambas proteínas interaccionen noutras condicións

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