International Laboratory for Research on Animal Diseases

CGSpace (CGIAR)

This simplified diagram illustrates the steps by which bovine T lymphocyte cells recognizeantigen.Peptide molecules of degraded antigens are presented to T lymphocytes on the surface ofantigen­presenting cells, such as a macrophage, in a binding cleft of a bovine MHC molecule. Tcells recognize antigen only when it is associated in this way with a 'self' MHC molecule.Types of MHC molecules vary among individual animals. ILRAD scientists need methods withwhich to characterize these MHC molecules to determine if this polymorphism will affect theefficacy of the novel p67­based vaccine against East Coast fever now under development at theLaboratory.Ph.D. ThesesA Trypanosoma congolense­specific antigen released in the courseof an infection is identified as a thiol protease precursorStandardized reagents, including trypanosome antigens, are needed to support research in theepidemiology of trypanosomiasis. A peptide doublet of Trypanosoma congolense with amolecular weight of 38/40 kiloDaltons (kDa) and recognized by diagnostic monoclonal antibodieswas used to raise polyclonal antibodies. One of these antibodies was used to screen acomplementary DNA (cDNA) library from which 14 positive clones were identified. Antibodysubpopulations selected by 10 of the 14 clones specifically recognized the 30/40­kDapolypeptides in lysates of different isolates of T. congolense. These recombinant antigen­selected antibody subpopulations appeared to have retained the species­specificity of the originalpolyclonal.A clone with a cDNA insert of 1.6 kilobases, which had hybridized with all the other positiveclones, was further characterized and sequenced. Results of a time­course digestion of T.congolense DNA with restriction enzymes revealed that the gene encoding the T. congolensespecies­specific antigen occurs as an imperfect tandem repeat in the genomes of theseparasites, with an estimated copy number of between 20 and 30.The gene appears to be polymorphic among three isolates of T. congolense. A completenucleotide sequence of the cDNA was obtained. Analysis of the whole of the deduced aminoacid sequence revealed a number of domains identified as potential signal sequences. Ahomology search in databases revealed a high degree of identity of the deduced proteinsequence to cysteine proteases from both animal and plant sources.The gene is one of two studied that encode antigens secreted by trypanosomes or released bythe parasites on dying into the blood and other tissues of mammalian hosts. Characterizing theseantigens and making them available will offer scientists standardized reagents for use in studiesof trypanosome epidemiology.Assan B. JayeA Gambian ILRAD Research Fellow.Summary of a thesis abstract presented for a Ph.D. granted in 1993 by theDepartment of Biology and Biochemistry, Brunel University, UK.ILRAD Ph.D. supervisors:Onesmo ole­MoiYoi & Phelix Majiwa An extra chromosomal DNA molecule of Theileria parva encodesmitochondrial proteinTheileria parva, a protozoan parasite of cattle, contains an extra chromosomal DNA moleculewith an apparent mobility of 7.1 kilobases in agarose gels. This molecule was characterized todetermine whether it played a role in parasite virulence or, more importantly, in the unique abilityof T. parva to 'transform' bovine lymphocytes. In addition, as an extra chromosomal element, itwas potentially a good starting point for the construction of transfection vehicles.A total of 5893 base pairs of this extra­chromosomal molecule have been fully sequenced andanalysed. The molecule is linear in structure and contains inverted repeat sequences at itstelomeres. The sequence shows that the DNA may code for apocytochrome b and polypeptide Iand III of cytochrome c oxidase, protein components of the last two mitochondrial electrontransport complexes. Apocytochrome b is of interest because it may be the target ofhydroxynapthaquinones the class of drugs used in chemotherapy for East Coast fever.The DNA molecule also contains several unique short stretches of discontinuous sequences thatare similar to both large (LSU) and small (SSU) ribosomal subunit RNA of Escherichia coli. Fivefragmented ribosomal RNA­like sequences, LSU1­LSU5, can be folded by inter­and intra­molecular base pairing into the phylogenetically conserved domains IV and V of the LSUribosomal RNA. Other short stretches of sequence with similarity to SSU rRNA and otherregions of LSU rRNA were tentatively identified. ,The protein coding potential of the DNA molecule is characteristic of mitochondrial DNA and itsstructure and the presence of scrambled rDNA sequences is reminiscent of the mitochondrialDNA of Chlamydomonas reinhardtii. Other protozoan parasites in the same phylum as Theileria,such as Plasmodium, Babesia, Eimeria and Toxoplasma, contain related DNA molecules. Thesemolecules are different in structure to the T. parva molecule but the conservation of the codingpotential argues for a functional significance of this family of related DNA molecules.Alladin KairoA Kenyan ILRAD Research Fellow.Summary of a thesis abstract for a Ph.D. awarded in 1993 by the Department of MedicalParasitology, London School of Hygiene and Tropical Medicine.ILRAD Ph.D. supervisor: Vish NeneILRAD Reports is published quarterly by the International Laboratory for Research on Animal Diseases(ILRAD), in Nairobi, Kenya. The newsletter is written and produced in­house using desktop publishingequipment and is printed in Nairobi by Majestic Printing Works. It has a circulation of 3,500 English and

A Trypanosoma congolense-specific antigen released in the course of an infection is identified as a thiol protease precursor

https://cgspace.cgiar.org/bitstream/10568/16325/1/Trypanosoma_congolense.pdf

A Trypanosoma congolense-specific antigen released in the course of an infection is identified as a thiol protease precursor

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

CGSpace (CGIAR)