Toxoplasma gondii is an obligate intracellular parasite, capable of infecting humans and other warm-blooded animals. It is typically associated with the adequately named infection, toxoplasmosis.
The aim of the present work was to develop serotyping by selecting different synthetic GRA8 C-terminal polymorphic peptides with 64 human serum samples (of known strain types) to determine the peptides’ ability to differentiate strain types of T. gondii (I, II, III and atypical).
Serotyping is a typing method consisting of an immunoenzymatic assay (enzyme-linked immunosorbent assay [ELISA]) using synthetic polymorphic peptides derived from Toxoplasma gondii antigens.
Sera samples were processed through indirect ELISA and the colour product formed measured by absorbance at 415 nm. Data obtained was processed in a Receiver Operating Characteristic (ROC) curve to determine the sensibility and specificity of each peptide.
Of the four GRA8II peptides used (217, 221, 246 and 258), only GRA8II 221 proved to have some ability to differentiate strains of type II from non-type II with an 85,8% probability of doing so. However, with such poor results for the remaining three peptides (all three with a probability of successfully distinguish between different strains types under 60%), GRA8 may not be an ideal peptide to be used for serotyping.Toxoplasma gondii é um parasita intracelular obrigatório, capaz de infetar humanos e outros animais de sangue quente. T. gondii é tipicamente associado à infeção pela qual é responsável, designada por toxoplasmose. O objetivo do presente trabalho foi testar novos péptidos polimórficos de GRA8 por serotipagem com 64 amostras de soro humano (com linhas clonais conhecidas) para determinar a capacidade dos péptidos de diferenciar linhas clonais de T.gondii. A serotipagem é um método constituído por um ensaio imunoenzimático (ELISA) que utiliza péptidos polimórficos sintéticos derivados de antigénios de T. gondii. As amostras de soro foram processadas através de ELISA indireta e o produto de cor formado foi avaliado medindo a sua absorbância a 415 nm. Os dados obtidos foram processados numa curva Receiver Operating Characteristic (ROC) para determinar a sensibilidade e especificidade de cada péptido. Dos quatro péptidos de GRA8II usados (217, 221, 246 e 258), apenas o péptido GRA8II 211 demonstrou ter alguma capacidade para ser usado na distinção entre estirpes tipo II de estirpes não-tipo II, com uma probabilidade de 85,8% de o fazer com sucesso. No entanto, os resultados menos satisfatórios verificados para os restantes três péptidos (todos com uma probabilidade de distinguir com sucesso entre tipos de estirpes abaixo de 60%) sugerem que GRA8 talvez não seja o péptido mais indicado para ser usado em serotipagem
