Alonso Moraga, A.

Campos, S. J.

Muñoz Serrano, A.

Tasset, C. I.

idUS. Depósito de Investigación Universidad de Sevilla

BASE CIENTÍFICA DE LA CULTURA DEL ACEITE DE OLIVA.VALOR ANTIOXIDANTE DEL ACEITE DE OLIVA Y SUSFENOLES PARA EL MANTENIMIENTO DE LA INTEGRIDADDEL ADNCampos. S.J., Tasset, C.I. , Muñoz-Serrano A. y Alonso-Moraga A.Departamento de Genética, Universidad de Córdoba, Campus de Rabanales, 14071Córdoba, Spain. E-amil: Correo de contacto: ge1almoa@uco.esINTRODUCCIÓNEl aceite de oliva, particularmente, el extra virgen, desempeña unaimportante función protectora de nuestra salud: reduce el riesgo de enfer-medades cardiovasculares (Covas, 2007), de arteriosclerosis y de otrosmuchos problemas causados por el envejecimiento. A diferencia de las gra-sas de origen animal, que favorecen estas enfermedades. El Aceite de Oliva,la grasa más consumida en el mundo, ha sido la que más han disfrutado lospaíses del entorno mediterráneo durante miles de años.Unas de las causas mayores de algunas enfermedades y de la degenera-ción celular es la agresión de los radicales libres que conduce a procesos oxi-dativos. El estrés oxidativo es causado por un desequilibrio entre la cantidadde radicales libres necesaria para nuestro organismo, y los que se producenen exceso. Una cantidad elevada de radicales libres puede perjudicar lasestructuras celulares, modificar el ADN e intervenir negativamente sobre elproceso normal del envejecimiento. Por ello es importante contrarrestar losradicales libres utilizando el aceite de oliva. Sobre las cantidades adecuadasde aceite de oliva todavía existen dudas y por lo tanto prosiguen los estu-dios para comprender al detalle los mecanismos de acción del aceite deoliva.321Las virtudes del aceite de oliva van más allá de la protección contra lasenfermedades cardiovasculares. Algunos de los antioxidantes llamados “poli-fenoles” en el aceite de oliva pueden tener la habilidad de destruir sustan-cias que producen la proliferación de las células cancerígenas (Colomer andMenéndez, 2006).El objetivo fundamental de este trabajo es la evaluación de la capacidadantigenotóxica y tumoricida del aceite de oliva y de sus componentes mayo-ritarios.MATERIAL Y MÉTODOSEn este trabajo se estudiaron diferentes variedades de aceite de oliva vir-gen extra:1- Variedad Picual2- Variedad Nevadillo3- Variedad Hojiblanca4- Variedad Casta de CabraSe estudiaron también los fenoles mayoritarios del aceite de oliva asaber: El Tirosol, la Trioleina y el Escualeno. Se hizo también un tratamien-to combinados de diferentes aceites o sus componentes frente a peróxidode hidrógeno y aceite de soja, corregidos para su control concurrentePor el análisis de genotoxicidad hemos seleccionado el test de mutacio-nes y recombinaciones somáticas en células de discos imaginales alares deDrosophila melanogaster (Graf, 1984). El test detecta la pérdida de hetero-cigosidad debida a una gran variedad de eventos que alteran el materialgenético. Los tratamientos se realizan sobre larvas heterocigotas para dosmarcadores: mwh y flr, mutaciones que en homocigosis producen un feno-tipo distinguible al microscopio óptico en las alas de las moscas adultas. Eneste trabajo se realizaron tratamientos crónicos con larvas de 3 días. Por lostanto, el tiempo de exposición de las células imaginales al compuesto es de48h. Se tratan unas 100 larvas por tubo y éstos se incuban a 25ºC hasta queemergen las moscas adultas. Después de emerger, los adultos transehete-rocigotos mwh/flr3 se montan en portas y analizados al microscopio fotóni-co. El análisis de los datos esta basado en la comparación de las frecuenciasobservadas entre las series tratadas y los controles mediante la prueba esta-dística X2 (Frei and Würgler, 1988).Para la evaluación de la citotoxicidad se utilizó un ensayo de crecimientoy viabilidad celular en células de leucemia humana HL-60. La actividad tumo-ricida del aceite de oliva y de sus compuestos fenólicos mayoritarios fueConsejería de Agricultura y Pesca322Tradición Alimentaria. La cultura del aprovechamiento de las razas autóctonasdeterminada siguiendo el crecimiento de los cultivos celulares durante 72horas. Los cultivos celulares crecen en el medio de cultivo RPMI-1640 ante-riormente mezclado con las diferentes concentraciones de las sustanciasensayadas.RESULTADOS Y DISCUSIÓNNinguno de los subproductos de almazara estudiados es genotóxico en eltest SMART, independientemente del método de obtención, por tanto aler-tamos de su inocuidad desde el punto de vista de daño genético. El aceitede oliva virgen extra no es genotóxico, independientemente del tipo de acei-tuna del que provenga, del tipo de elaboración, o del tipo de cultivo que sehaya llevado a cabo. El aceite de soja, o el de orujo sí lo son. De los trescomponentes distintivos del aceite de oliva virgen extra, la trioleína y tirosoly el escualeno, hemos encontrando este último ligeramente genotóxicopudiendo actuar como agente oxidante (figura1).El efecto marcadamente antimutagénico frente al peróxido de hidrógenode todos los aceites de oliva ensayados demuestra su capacidad antioxidan-te para inhibir el daño genético producido por estrés oxidativo. Las aguas delavado, aun siendo antioxidantes, tienen menor potencia que los aceites,debido a su alto contenido en polifenoles pero bajo o nulo en trioleína (figu-ra 1).La trioleína y el tirosol son antimutagénicos (figura 1), tanto frente alperóxido de hidrógeno como frente al aceite de soja tomado como modelode mezcla compleja mutagénica. Ambas sustancias secuestrarían las espe-cies reactivas de oxígeno formadas por los agentes oxidantes H2O2 e hidro-peróxidos del ácido linoleico, aunque en éstos últimos electrofílicos la activi-dad antigenotóxica de la trioleína y el tirosol es más específica. El escuale-no sólo reduce la genotoxicidad del aceite de soja, por lo que se observa unaoxidación competitiva con los lípidos ya descrita por otros autores.323Figura 1. Resumen de los resultados obtenidos en los tratamientos combina-dos de diferentes aceites o sus componentes frente a peróxido de hidrógenoy aceite de soja, corregidos para su control concurrente.Consejería de Agricultura y Pesca324Se ha llevado a cabo un estudio de citotoxicidad en células HL-60 delaceite de olivo y de sus fenoles mayoritarios. La graficas2-A que el aceite deoliva no ejerce un efecto fuerte sobre las células HL-60, ya que su tasa decrecimiento se encuentra ligeramente por debajo del control y no hay efec-to de dosis. El débil efecto citotóxico del aceite de oliva puede ser debido ala acción de algunos de sus componentes. Por ellos se estudio la capacidadde inhibición del crecimiento tumoral del a triolena, el tirosol y el escualeno,que son los componentes distintivos del aceite de oliva virgen extra. Tradición Alimentaria. La cultura del aprovechamiento de las razas autóctonas325Escualeno D1008060402000 2 4 6 8Concentración (mM)y=100e-0,30xTirosol C1008060402000 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14Concentración (mM)y=-796,0x+100CrecimientoTumoral%CrecimientoTumoral%Trioleina B1008060402000 2 4 6 8 10 12  14 16Concentración (ul/M)y=85,34e-0,00xAceite de oliva A1008060402000 2 4 6 8 10   12  14  16Concentración (mM)y=1000e-0,04xCrecimientoTumoral%CrecimientoTumoral%Al igual que ocurre con el aceite de oliva, la trioleina (figura 2-B), pareceno inferir en el crecimiento celular, manteniendo la densidad de poblacióncelular ligeramente por debajo del control. Tampoco existe efecto de dosis.El trisol interfiere débilmente en el crecimiento tumoral (figura 2-C), gene-ralmente encontrándose por debajo del control, del mismo modo que elaceite de oliva. Cuando se ensaya el Escualeno, se observa un claro efectode dosis (figura 2-D), de tal manera que conforme aumenta la concentra-ción disminuye el porcentaje de células vivas por ml. Se puede decir que elEscualeno inhibe el crecimiento del cultivo.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICASColomer R, Menéndez JA. 2006 .Mediterranean diet, olive oil and cancer. ClinTransl Oncol. 8:15-21.Covas M. I. Olive oil and the cardiovascular system. 2007. Pharm. Res55:175-186.Frei H, Würgler F E (1988) Statistical methods to decide whether mutageni-city test data from Drosophila assays indicate a positive, negative, orinconclusive result. Mutat. Res., 203: 297-308.Graf U, Würgler F E, Katz A J, Frei H, Juon H, Hall C B, Kale P G. 1984.Somatic mutation and recombination test in Drosophila melanogaster.Environ. Mutagen., 6: 153-188.Consejería de Agricultura y Pesca326

Base científica de la cultura del aceite de oliva. Valor antioxidante del aceite de oliva y sus fenoles para el mantenimiento de la integridad del ADN

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