Construção de um sensor eletroquímico molecularmente impresso para a monitorização de Naloxona

Abstract

A relativa facilidade em aceder a drogas e outras substâncias psicoativas nos dias correntes provocou, à escala mundial, um significativo aumento do numero de overdoses nos seus consumidores. Devido às consequências graves e por vezes fatais de uma overdose, são frequentemente usados fármacos, como a naloxona (NLX), no tratamento destes casos clínicos. Neste trabalho foi desenvolvido um sensor eletroquímico seletivo, com o objetivo de monitorizar a NLX em amostras de soro humano, Para isso recorreu-se a tecnologia de impressão molecular (MIT) para preparar um polímero seletivo à NLX. Inicialmente procedeu-se a deposição de uma solução de nanotubos de carbono de parede múltipla (MWCNT) em elétrodos “sreen printed” de carbono (SPCE). O polímero molecularmente impresso foi obtido através de eletropolimerização por voltametria cíclica de uma solução ontendo ácido 4-aminobenzoico (4-ABA) na presença de NLX em tampão fosfato 0,1M pH 7. De seguida procedeu-se à extração da NLX usando uma solução de metanol/HCl 0,1M (50:50). A deteção e quantificação da NLX foram realizadas posteriormente, após incubação de 5 min em soluções de NLX e análise por voltametria diferencial por impulsos (DPV). Foram testadas e otimizadas as condições de polimerização, a concentração de MWCNT depositados, o pH do eletrólito e as condições de extração. O sensor desenvolvido apresenta um comportamento linear entre a intensidade de corrente de pico e a concentração de NLX numa gama entre 0,25 e 10µM (R2=0,9997), tendo-se estimado um limite de deteção (LOD) de 0,20µM e um limite de quantificação (LOQ) de 0,67µM. Para uma concentração de 4µM foi obtida uma repetibilidade de 4,6 % e uma reprodutibilidade entre diferentes sensores de 9,6%. A aplicabilidade do sensor foi testada em amostras de soro humano, dopadas com 2 e 8µM de NLX tendo-se obtido taxas de recuperação de 98 e 92%, respetivamente. O sensor desenvolvido é barato, de fácil fabrico, descartável e apresenta boa performance analítica para deteção de NLX em amostras reais.The relative ease of access to drugs and other psychoactive substances in current days caused, worldwide, a significant increase in the number of overdoses in their consumers. Due to the serious and sometimes fatal consequences of an overdose, drugs are often used, such as naloxone (NLX) in the treatment of such clinical cases. In this work a selective electrochemical sensor in order to monitor the NLX in human serum samples for that resorted to molecular imprinting technology (MIT) to prepare a selective polymer NLX. Initially carried by the deposition of a solution of multi-wall carbon nanotubes (MWCNT) on electrodes "sreen printed" carbon (SPCE). The molecularly imprinted polymer was obtained by cyclic voltammetry by electropolymerization of a solution containing 4-aminobencoico acid (4-ABA) in the presence of NLX in 0.1M phosphate buffer pH 7. Then it proceeded to the extraction using a solution NLX methanol / HCl 0.1M (50:50). The detection and quantification of NLX were subsequently carried out after incubation 5 min in NLX solutions and analysis by differential pulse voltammetry (DPV). They were tested and optimized the polymerization conditions, the concentration of MWCNT deposited, measuring the pH of the electrolyte and extraction conditions. The sensor developed has a linear relationship between the intensity of the peak current and the concentration of NLX in the range of 0.25 to 10μM r2 = 0.9997), having estimated a detection limit (LOD) of 0,20μM and one limit of quantitation (LOQ) of 0,67μM. At a concentration of 4μM 4.6% repeatability and reproducibility between different sensors of 9.6% was obtained. The applicability of the sensor was tested in samples of human serum, and 2 doped with 8μM of NLX thereby obtaining recovery rates of 98 and 92%, respectively. The developed sensor and cheap, easy to manufacture, disposable, and has good analytical performance for NLX detection in real samples

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