A.F. Vinha

M. Beatriz P. P. Oliveira

M. Soares

P. Pires

Open Repository of the University of Porto

11º Encontro de Química dos Alimentos  
Atividade antioxidante de extratos aquosos de Cochlospermum angolense 
(Borututu) 
 
Ana F. Vinhaa,b,c, Anabela Costaa, Marta Soaresa,c, Pedro Piresc,d, MBPP Oliveira
 
a 
aREQUIMTE/Departamento de Ciências Químicas, Faculdade de Farmácia, Universidade Porto, 
Portugal. bFaculdade de Ciências da Saúde, Universidade Fernando Pessoa, Porto, Portugal. 
cCITS/Instituto Politécnico de Saúde do Norte, CESPU, V. N. Famalicão, Portugal. 
d
*acvinha@ufp.edu.pt 
Instituto Politécnico de Saúde, Benguela, Angola. 
Palavras-chave: Cochlospermum angolense, Atividade antioxidante, Planta medicinal, 
ABTS•+, DPPH, FRAP. 
 
RESUMO 
A utilização de plantas medicinais para fins terapêuticos ocorre, desde longa data, em determinadas 
regiões, por questões culturais e devido ao difícil acesso da população a medicamentos. Contudo, 
essa utilização tem aumentado significativamente nos últimos tempos, a nível global, dada a 
associação da ideia de inocuidade a produtos naturais. De acordo com a OMS, 
aproximadamente 80% da população mundial utiliza a medicina tradicional ou a fitoterapia no 
tratamento de várias doenças. O Borututu (Cochlospermum angolense) é uma planta angolana 
conhecida pelos seus efeitos benéficos no tratamento de determinadas síndromas patológicas 
e também pelo seu uso na culinária. 
No presente trabalho estudou-se a atividade antioxidante (captura do radical livre ABTS•+, 
DPPH e FRAP) e os teores de compostos antioxidantes (fenóis totais, flavonóides e taninos 
totais) de extratos aquosos das cascas frescas e secas de borututu, vulgarmente utilizados em 
infusões. Os extratos aquosos da casca fresca e seca do Borututu apresentaram diferenças 
significativas (p<0,05) em fitoquímicos, provando que o processo de secagem e de 
conservação influenciam a composição da planta. 
 
1. INTRODUÇÃO 
Numerosos dados científicos responsabilizam os radicais livres e compostos oxidantes pelo 
envelhecimento precoce e pelas doenças degenerativas associadas ao envelhecimento, tais 
como cancro, doenças cardiovasculares, cataratas, perda funcional do sistema imune e 
disfunções cerebrais [1-4]. As espécies reativas de oxigénio (ERO), tais como os radicais 
hidroxilo (•OH), hidroperoxilo (ROO•) e o anião radical superóxido (O2•–
A utilização de plantas medicinais para fins terapêuticos ocorre, desde longa data, em 
determinados regiões, por questões culturais e devido ao difícil acesso da população a 
medicamentos [5]. Contudo, esta utilização tem crescido significativamente nos últimos 
), causam danos 
profundos no ADN e nos processos metabólicos dos lípidos e das proteínas.  
11º Encontro de Química dos Alimentos  
tempos, a nível global, dada a associação da ideia de inocuidade a produtos naturais. De 
acordo com a OMS, aproximadamente 80% da população mundial utiliza a medicina 
tradicional ou a fitoterapia na ação terapêutica de várias doenças [6].  
A pesquisa fitoquímica tem como objetivo conhecer os constituintes químicos das espécies 
vegetais e/ou avaliar a sua presença. Mesmo quando não se dispõe de estudos químicos sobre 
as espécies de interesse, a análise fitoquímica preliminar pode indicar o grupo de metabolitos 
secundários relevantes na planta medicinal. O Borututu (Cochlospermum angolense) é uma 
planta angolana conhecida pelos seus efeitos benéficos no tratamento de determinadas 
síndromes patológicas e também pelo seu uso na culinária. Tanto os óleos essenciais como os 
componentes não voláteis (extratos) obtidos das plantas têm sido estudados quanto ao seu 
potencial antioxidante, demonstrando valores interessantes.  
O presente trabalho teve como principal objetivo estudar a composição química em 
compostos bioativos (fenólicos totais, flavonóides e taninos) de extratos aquosos obtidos da 
planta fresca e da planta seca. Pretendeu igualmente avaliar o seu potencial antioxidante, 
recorrendo a diferentes métodos analíticos, de forma a garantir o melhor rendimento, como 
planta medicinal. 
 
2. MATERIAIS E MÉTODOS 
2.1 Material vegetal 
A raiz de Borututu foi colhida, em Abril de 2012, na cidade de Benguela, Angola, 
transportada por via aérea sob atmosfera controlada e hermeticamente selada, ao abrigo da 
luz. O material vegetal foi separado em dois lotes, sendo um deles seco à temperatura 
ambiente (20ºC) e ao abrigo da luz e humidade, durante 1 semana. As amostras foram 
trituradas (Moulinex A5052HF) e 5 g de casca (seca e fresca) maceradas em 50 ml de água a 
40ºC±1ºC, durante 60 min. 
2.2 Determinação dos compostos fenólicos totais 
A determinação do teor de fenólicos totais dos extratos aquosos foi efetuada pelo método de 
Folin–Ciocalteau (Merck), segundo metodologia descrita [7], com ligeiras modificações e 
curva padrão de catequina. Os resultados foram expressos em mg de fenólicos totais em 
equivalente de catequina por 100g de amostra. 
2.3 Determinação do teor de flavonóides totais 
Para a determinação de flavonóides totais utilizou-se um método colorimétrico, seguindo 
metodologia previamente descrita [8]. A técnica envolveu a medida de absorção, a 425 nm, do 
complexo AlCl3-flavonóide, utilizando uma reta de calibração de apigenina (R2=0,99885). As 
determinações analíticas foram efetuadas num espetrofotómetro (UV-VIS Shimadzu, modelo- 
UV-1800). O teor de flavonóides totais, expresso em miligramas (mg) de apigenina por 100 g 
de amostra, foi calculado através da equação 1 (C-concentração de flavonóides, expressa em 
mg apigenina por 100 g de planta; A = absorvância; FD = fator de diluição; m = massa da 
11º Encontro de Química dos Alimentos  
amostra (g); E1%,1cm
 
= 336,5 absorção específica da apigenina). O ensaio foi realizado em 
triplicado.  
 
(1) 
2.4 Determinação do teor de taninos 
Os teores de taninos totais dos extratos aquosos foram quantificados espetrofotometricamente 
(Shimadzu, modelo- UV-1800) a 725nm. A 2 ml de cada extrato foram adicionados 2 ml de 
reagente Folin-Denis. Após 3 min de repouso, foram adicionados 2 ml de carbonato de sódio 
(8%), mantendo um período de repouso de 2 horas ao abrigo da luz. Para a quantificação fez-
se uma curva de calibração a partir de soluções de ácido tânico com diferentes concentrações. 
2.5 Atividade antioxidante 
Para avaliação da atividade antioxidante foram realizados três ensaios: DPPH com 1,1- 
difenil-2-picril-hidrazilo [9]; ABTS com 2,2’-azinobis(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfonato) [10]; 
e FRAP, poder antioxidante por redução de ferro [10]. Todas as leituras foram realizadas em 
triplicado recorrendo-se a um leitor de microplacas (BioTek Synergy HT, GENS5). 
2.6 Análise estatística 
A análise dos resultados foi efetuada pela aplicação da ANOVA e o teste Tukey 
pretendendo identificar as diferenças significativas entre as médias, usando o software 
Statistica® 6.0. O nível de significância considerado para a diferença entre as médias foi de 
5% (p < 0,05). Todas as análises foram realizadas em triplicado e os resultados apresentados 
como média ± desvio padrão (SD). 
 
3 RESULTADOS E DISCUSSÃO 
Os teores de fenólicos totais, flavonóides e taninos extraídos (meio aquoso) na planta fresca 
e submetida a um processo de secagem, com teor de humidade inferior a 10%, estão 
representados na Tabela 1. 
 
Tabela 1. Teores de fenólicos totais, flavonóides totais e taninos em extratos aquosos da raiz de 
Borututu fresca (EF) e seca (ES). 
Extratos  Fenólicos totais 
  
Flavonoides totais 
  
Taninos 
   
EF 331,3± 21,48A 78,7± 2,52  11,3 ± 0,78A 
ES 
A 
423,6 ± 23,16 196,6 ± 32,84B B 16,0 ± 0,89
*Os resultados estão expressos como média ± desvio padrão (n = 3); médias seguidas da mesma letra na coluna não  
B 
diferem estatisticamente (p > 0,05).  
 
Pela análise dos resultados verifica-se que tanto para os fenólicos totais, como para os 
flavonóides totais e taninos, os teores mais elevados foram obtidos nos extratos da planta 
seca, ou seja, raiz de Borututu após processo de secagem, sendo visível uma diferença 
significativa para as três varáveis estudadas (p < 0,05). Na Figura 1 (em baixo) estão 
esquematizadas as atividades antioxidantes para ambos os extratos, e mediante os diferentes 
métodos analíticos propostos. 
11º Encontro de Química dos Alimentos  
 
A atividade antioxidante mostrou diferenças significativas entre os dois extratos estudados 
(p < 0,05), tendo o processo de secagem aumentado a concentração dos compostos bioativos 
e, consequentemente, o seu poder antioxidante, atingindo valores de 166,77 mg Fe++g-1 
(FRAP) > 72,31 mg Trolox g-1 (ABTS) > 54,58 mg Trolox g-1  (DPPH) para o extrato seco e 
143,41 mg Fe++g-1 (FRAP) > 57,45 mg Trolox g-1 (ABTS) > 49,52 mg Trolox g-1 (DPPH) 
para a raiz fresca. As atividades antioxidantes, independentemente do método estudado, 
mostram uma relação positiva com os teores de compostos bioativos, o que vai de encontro 
com outros estudos publicados. O FRAP mostrou ser o método mais reprodutível, com 
valores superiores, independentemente da natureza dos extratos. Embora a atividade 
antioxidante seja elevada para esta matriz vegetal, a mesma mostrou-se inferior (1/2) à 
atividade antioxidante descrita para a erva-mate [11] e para o chá verde (142,3 mg 
Trolox/100ml) [5]. 
 
4 CONCLUSÕES 
Este estudo ainda preliminar permite concluir que a raiz de Borututu possui elevada 
quantidade de compostos antioxidantes e que os mesmos estão diretamente relacionados com 
a sua potencialidade nos ensaios in vitro. Estudos posteriores deverão ser realizados, com a 
identificação dos metabolitos secundários de maior relevância e sua possível correlação com 
cada um dos métodos estudados.   
Referências 
[1] S Chanda, R Dave, Afri J Microbiology Reschr, 2009, 3(13): 981-996. 
[2] L Rackova, M Oblozinsky, D Kostalova, V Kettmann, LBezakova, J Inflam, 2007, 4, 15. 
[3] U Singh, I Jialal, Pathophysiol, 2006, 13, 129-142. 
[4] H Wang, M Zhao, B Yang, Y Jiang, G Rao, Food Chem, 2008, 107, 1399-1406. 
[5] ASG Costa, A Nunes, IMC Almeida, MR Carvalho, MF Barroso, RC Alves, MBPP Oliveira, LWT 
- Food Sci Technol, 2012, in press.  
[6] E Puppo, CP Silva, J Basic Appl Pharmac Sci, 2008, 29(1), 53-58.  
[7] M Wettasinghe, FJ Shahidi, J Agric Food Chem, 1999, 47, 1801-1812.  
[8] RD Petry, KCB De Souza, VL Bassani, PR Petrovick, G González-Ortega, R Bras Farm 1998, 79, 
7-10.  
[9] DO Kim, SW Jeong, CY Lee, Food Chem, 2003, 81, 321-326. 
[10] L Lachman,  LWT - Food Sci Technol, 2010, 43, 52-58.[11] M Vieira, M Marachin, CM 
Pagliosa, R Podestá, RDMS Amboni, Int  Adv Cleaner Prod 2009, 1-11. 
0 
50 
100 
150 
200 
ABTS DPPH FRAP 
A
tiv
id
ad
e 
an
tio
xi
da
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e 
Método analítico para estudo dos diferentes … 
ES 
EF 
Figura 1. Atividade 
antioxidante pelos métodos 
do DPPH, ABTS e FRAP 
dos extratos aquosos da 
raiz de Borututu fresca e 
seca. 


Portuguese

Atividade antioxidante de extratos aquosos de Cochlospermum angolense (Borututu)

Repositório Aberto da Universidade do Porto

11º Encontro de Química dos Alimentos  Atividade antioxidante de extratos aquosos de Cochlospermum angolense (Borututu)  Ana F. Vinhaa,b,c, Anabela Costaa, Marta Soaresa,c, Pedro Piresc,d, MBPP Oliveira a aREQUIMTE/Departamento de Ciências Químicas, Faculdade de Farmácia, Universidade Porto, Portugal. bFaculdade de Ciências da Saúde, Universidade Fernando Pessoa, Porto, Portugal. cCITS/Instituto Politécnico de Saúde do Norte, CESPU, V. N. Famalicão, Portugal. d*acvinha@ufp.edu.pt Instituto Politécnico de Saúde, Benguela, Angola. Palavras-chave: Cochlospermum angolense, Atividade antioxidante, Planta medicinal, ABTS•+, DPPH, FRAP.  RESUMO A utilização de plantas medicinais para fins terapêuticos ocorre, desde longa data, em determinadas regiões, por questões culturais e devido ao difícil acesso da população a medicamentos. Contudo, essa utilização tem aumentado significativamente nos últimos tempos, a nível global, dada a associação da ideia de inocuidade a produtos naturais. De acordo com a OMS, aproximadamente 80% da população mundial utiliza a medicina tradicional ou a fitoterapia no tratamento de várias doenças. O Borututu (Cochlospermum angolense) é uma planta angolana conhecida pelos seus efeitos benéficos no tratamento de determinadas síndromas patológicas e também pelo seu uso na culinária. No presente trabalho estudou-se a atividade antioxidante (captura do radical livre ABTS•+, DPPH e FRAP) e os teores de compostos antioxidantes (fenóis totais, flavonóides e taninos totais) de extratos aquosos das cascas frescas e secas de borututu, vulgarmente utilizados em infusões. Os extratos aquosos da casca fresca e seca do Borututu apresentaram diferenças significativas (p<0,05) em fitoquímicos, provando que o processo de secagem e de conservação influenciam a composição da planta.  1. INTRODUÇÃO Numerosos dados científicos responsabilizam os radicais livres e compostos oxidantes pelo envelhecimento precoce e pelas doenças degenerativas associadas ao envelhecimento, tais como cancro, doenças cardiovasculares, cataratas, perda funcional do sistema imune e disfunções cerebrais [1-4]. As espécies reativas de oxigénio (ERO), tais como os radicais hidroxilo (•OH), hidroperoxilo (ROO•) e o anião radical superóxido (O2•–A utilização de plantas medicinais para fins terapêuticos ocorre, desde longa data, em determinados regiões, por questões culturais e devido ao difícil acesso da população a medicamentos [5]. Contudo, esta utilização tem crescido significativamente nos últimos ), causam danos profundos no ADN e nos processos metabólicos dos lípidos e das proteínas.  11º Encontro de Química dos Alimentos  tempos, a nível global, dada a associação da ideia de inocuidade a produtos naturais. De acordo com a OMS, aproximadamente 80% da população mundial utiliza a medicina tradicional ou a fitoterapia na ação terapêutica de várias doenças [6].  A pesquisa fitoquímica tem como objetivo conhecer os constituintes químicos das espécies vegetais e/ou avaliar a sua presença. Mesmo quando não se dispõe de estudos químicos sobre as espécies de interesse, a análise fitoquímica preliminar pode indicar o grupo de metabolitos secundários relevantes na planta medicinal. O Borututu (Cochlospermum angolense) é uma planta angolana conhecida pelos seus efeitos benéficos no tratamento de determinadas síndromes patológicas e também pelo seu uso na culinária. Tanto os óleos essenciais como os componentes não voláteis (extratos) obtidos das plantas têm sido estudados quanto ao seu potencial antioxidante, demonstrando valores interessantes.  O presente trabalho teve como principal objetivo estudar a composição química em compostos bioativos (fenólicos totais, flavonóides e taninos) de extratos aquosos obtidos da planta fresca e da planta seca. Pretendeu igualmente avaliar o seu potencial antioxidante, recorrendo a diferentes métodos analíticos, de forma a garantir o melhor rendimento, como planta medicinal.  2. MATERIAIS E MÉTODOS 2.1 Material vegetal A raiz de Borututu foi colhida, em Abril de 2012, na cidade de Benguela, Angola, transportada por via aérea sob atmosfera controlada e hermeticamente selada, ao abrigo da luz. O material vegetal foi separado em dois lotes, sendo um deles seco à temperatura ambiente (20ºC) e ao abrigo da luz e humidade, durante 1 semana. As amostras foram trituradas (Moulinex A5052HF) e 5 g de casca (seca e fresca) maceradas em 50 ml de água a 40ºC±1ºC, durante 60 min. 2.2 Determinação dos compostos fenólicos totais A determinação do teor de fenólicos totais dos extratos aquosos foi efetuada pelo método de Folin–Ciocalteau (Merck), segundo metodologia descrita [7], com ligeiras modificações e curva padrão de catequina. Os resultados foram expressos em mg de fenólicos totais em equivalente de catequina por 100g de amostra. 2.3 Determinação do teor de flavonóides totais Para a determinação de flavonóides totais utilizou-se um método colorimétrico, seguindo metodologia previamente descrita [8]. A técnica envolveu a medida de absorção, a 425 nm, do complexo AlCl3-flavonóide, utilizando uma reta de calibração de apigenina (R2=0,99885). As determinações analíticas foram efetuadas num espetrofotómetro (UV-VIS Shimadzu, modelo- UV-1800). O teor de flavonóides totais, expresso em miligramas (mg) de apigenina por 100 g de amostra, foi calculado através da equação 1 (C-concentração de flavonóides, expressa em mg apigenina por 100 g de planta; A = absorvância; FD = fator de diluição; m = massa da 11º Encontro de Química dos Alimentos  amostra (g); E1%,1cm = 336,5 absorção específica da apigenina). O ensaio foi realizado em triplicado.   (1) 2.4 Determinação do teor de taninos Os teores de taninos totais dos extratos aquosos foram quantificados espetrofotometricamente (Shimadzu, modelo- UV-1800) a 725nm. A 2 ml de cada extrato foram adicionados 2 ml de reagente Folin-Denis. Após 3 min de repouso, foram adicionados 2 ml de carbonato de sódio (8%), mantendo um período de repouso de 2 horas ao abrigo da luz. Para a quantificação fez-se uma curva de calibração a partir de soluções de ácido tânico com diferentes concentrações. 2.5 Atividade antioxidante Para avaliação da atividade antioxidante foram realizados três ensaios: DPPH com 1,1- difenil-2-picril-hidrazilo [9]; ABTS com 2,2’-azinobis(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfonato) [10]; e FRAP, poder antioxidante por redução de ferro [10]. Todas as leituras foram realizadas em triplicado recorrendo-se a um leitor de microplacas (BioTek Synergy HT, GENS5). 2.6 Análise estatística A análise dos resultados foi efetuada pela aplicação da ANOVA e o teste Tukey pretendendo identificar as diferenças significativas entre as médias, usando o software Statistica® 6.0. O nível de significância considerado para a diferença entre as médias foi de 5% (p < 0,05). Todas as análises foram realizadas em triplicado e os resultados apresentados como média ± desvio padrão (SD).  3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Os teores de fenólicos totais, flavonóides e taninos extraídos (meio aquoso) na planta fresca e submetida a um processo de secagem, com teor de humidade inferior a 10%, estão representados na Tabela 1.  Tabela 1. Teores de fenólicos totais, flavonóides totais e taninos em extratos aquosos da raiz de Borututu fresca (EF) e seca (ES). Extratos  Fenólicos totais   Flavonoides totais   Taninos    EF 331,3± 21,48A 78,7± 2,52  11,3 ± 0,78A ES A 423,6 ± 23,16 196,6 ± 32,84B B 16,0 ± 0,89*Os resultados estão expressos como média ± desvio padrão (n = 3); médias seguidas da mesma letra na coluna não  B diferem estatisticamente (p > 0,05).   Pela análise dos resultados verifica-se que tanto para os fenólicos totais, como para os flavonóides totais e taninos, os teores mais elevados foram obtidos nos extratos da planta seca, ou seja, raiz de Borututu após processo de secagem, sendo visível uma diferença significativa para as três varáveis estudadas (p < 0,05). Na Figura 1 (em baixo) estão esquematizadas as atividades antioxidantes para ambos os extratos, e mediante os diferentes métodos analíticos propostos. 11º Encontro de Química dos Alimentos   A atividade antioxidante mostrou diferenças significativas entre os dois extratos estudados (p < 0,05), tendo o processo de secagem aumentado a concentração dos compostos bioativos e, consequentemente, o seu poder antioxidante, atingindo valores de 166,77 mg Fe++g-1 (FRAP) > 72,31 mg Trolox g-1 (ABTS) > 54,58 mg Trolox g-1  (DPPH) para o extrato seco e 143,41 mg Fe++g-1 (FRAP) > 57,45 mg Trolox g-1 (ABTS) > 49,52 mg Trolox g-1 (DPPH) para a raiz fresca. As atividades antioxidantes, independentemente do método estudado, mostram uma relação positiva com os teores de compostos bioativos, o que vai de encontro com outros estudos publicados. O FRAP mostrou ser o método mais reprodutível, com valores superiores, independentemente da natureza dos extratos. Embora a atividade antioxidante seja elevada para esta matriz vegetal, a mesma mostrou-se inferior (1/2) à atividade antioxidante descrita para a erva-mate [11] e para o chá verde (142,3 mg Trolox/100ml) [5].  4 CONCLUSÕES Este estudo ainda preliminar permite concluir que a raiz de Borututu possui elevada quantidade de compostos antioxidantes e que os mesmos estão diretamente relacionados com a sua potencialidade nos ensaios in vitro. Estudos posteriores deverão ser realizados, com a identificação dos metabolitos secundários de maior relevância e sua possível correlação com cada um dos métodos estudados.   Referências [1] S Chanda, R Dave, Afri J Microbiology Reschr, 2009, 3(13): 981-996. [2] L Rackova, M Oblozinsky, D Kostalova, V Kettmann, LBezakova, J Inflam, 2007, 4, 15. [3] U Singh, I Jialal, Pathophysiol, 2006, 13, 129-142. [4] H Wang, M Zhao, B Yang, Y Jiang, G Rao, Food Chem, 2008, 107, 1399-1406. [5] ASG Costa, A Nunes, IMC Almeida, MR Carvalho, MF Barroso, RC Alves, MBPP Oliveira, LWT - Food Sci Technol, 2012, in press.  [6] E Puppo, CP Silva, J Basic Appl Pharmac Sci, 2008, 29(1), 53-58.  [7] M Wettasinghe, FJ Shahidi, J Agric Food Chem, 1999, 47, 1801-1812.  [8] RD Petry, KCB De Souza, VL Bassani, PR Petrovick, G González-Ortega, R Bras Farm 1998, 79, 7-10.  [9] DO Kim, SW Jeong, CY Lee, Food Chem, 2003, 81, 321-326. [10] L Lachman,  LWT - Food Sci Technol, 2010, 43, 52-58.[11] M Vieira, M Marachin, CM Pagliosa, R Podestá, RDMS Amboni, Int  Adv Cleaner Prod 2009, 1-11. 0 50 100 150 200 ABTS DPPH FRAP Atividade antioxidante Método analítico para estudo dos diferentes … ES EF Figura 1. Atividade antioxidante pelos métodos do DPPH, ABTS e FRAP dos extratos aquosos da raiz de Borututu fresca e seca. 

https://repositorio-aberto.up.pt/bitstream/10216/81188/2/106627.pdf

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