Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2016/2017[Resumen] El descubrimiento de los sistemas CRISPR-Cas y concretamente del sistema
CRISPR-Cas9 ha supuesto una revolución en el campo de la ingeniería genómica y la
biotecnología, puesto que permite editar cualquier región del genoma de cualquier
organismo de manera altamente eficaz, precisa y económica. Así, desde su
descubrimiento como un sistema natural de inmunidad adaptativa en organismos
procariotas, sus características estructurales y funcionales han sido estudiadas y
redefinidas hasta obtener variantes de CRISPR-Cas9 que incrementan la versatilidad de
esta maquinaria para su empleo en investigación e industria. En el presente trabajo se
realiza una revisión teórica de las características generales, estructura y función de
CRISPR-Cas9 en la naturaleza así como de las funciones y aplicaciones que lo perfilan
como una de las más novedosas y eficaces herramientas biotecnológicas conocidas.
Además, para ejemplificar su empleo como mecanismo de edición genómica, se llevará a
cabo el diseño de un proyecto experimental mediante el diseño de un oligonucleótido que
permitirá la introducción y expresión de la proteína GFP (Green Fluorescent Protein) en el
organismo eucariota Saccharomyces cerevisiae.[Abstract] The discovery of CRISPR-Cas systems and specifically the CRISPR-Cas9
system has led to a revolution in the field of genomic engineering and biotechnology, since
it allows to edit any region of the genome of any organism in a highly effective, precise and
economical way. Thus, since its discovery as a natural system of adaptive immunity in
prokaryotic organisms, its structural and functional characteristics have been studied and
redefined until obtaining variants of CRISPR-Cas9 that increase the versatility of this
machinery for its use in research and industry. In the present work a theoretical review of
the general characteristics, structure and function of CRISPR-Cas9 in the nature as well
as of the functions and applications that profile it as one of the most novel and effective
known biotechnological tools. In addition, to exemplify its use as a genomic editing
mechanism, the design of an experimental project will be carried out by designing an
oligonucleotide that will allow the introduction and expression of the GFP (Green
Fluorescent Protein) protein in the eukaryotic organism Saccharomyces cerevisiae.[Resumo] O descubrimento dos sistemas CRISPR-Cas e concretamente do sistema CRISPRCas9
supuxo unha revolución no campo da inxeniería xenómica e a biotecnoloxía, posto
que permite editar calquera rexión do xenoma de calquera organismo de maneira
altamente eficaz, precisa e económica. Así, dende o seu descubrimento como un sistema
natural de inmunidade adaptativa en organismos procariotas, a súas características
estructurais e funcionais foron estudadas e redefinidas ata obter variantes de CRISPRCas9
que incrementan a versatilidades desta maquinaria para o seu emprego en
investigación e industria. No presente traballo realízase unha revisión teórica das
características xerais, estructura e función de CRISPR-Cas9 na natureza así como das
funcións e aplicacións que o perfilan como unha das máis novedosas e eficaces
ferramentas biotecnolóxicas coñecidas. Ademáis, para exemplificar o seu emprego como
mecanismo de edición xenómica, levaráse a cabo o deseño dun proxecto experimental
mediante o deseño dun oligonucleótido que permitirá a introducción e expresión da
proteína GFP (Green Fluorescent Protein) no organsimo eucariota Saccharomyces
cerevisiae