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persönlicher Dank
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungen
Einleitung
Literaturübersicht
Material und Methoden
Eigene Untersuchungen
Diskussion
Zusammenfassung
Summary
Literaturverzeichnis
Danksagung
SelbständigkeitserklärungDas bovine Corpus luteum stellt ein hervorragendes Modell zur Untersuchung der
kontrollierten An- und Rückbildung von Blutgefäßen dar. Ziel dieser
Dissertationsarbeit war die morphometrische Untersuchung eines spezifischen
vaskulären Anbildungs- und Rückbildungsmusters während der Entwicklung und
Rückbildung des Gelbkörpers. Ein möglicher Zusammenhang zwischen den
morphometrischen Ergebnissen und dem Auftreten bestimmter, die Angiogenese
beeinflussender Faktoren, nämlich VEGF, VEGF-R2 und Ang-2, sollte dargestellt
werden. Außerdem sollten die einzelnen Phasen der Angiogenese und insbesondere
die der Anti-Angiogenese im Hinblick auf Gefäßdichte und Apoptosen
dokumentiert werden. Als Organproben dienten 47 bovine Corpora lutea
verschiedener Zyklusstadien. Dabei kamen neben licht- und
elektronenmikroskopischen Untersuchungen auch lektinhistochemische und
immunhistochemische Methoden sowie Apoptosetests zur Anwendung. Ein wichtiges
Ergebnis dieser Studie war, dass sich das Corpus hämorrhagicum in drei Zonen
gliedert. Das Zentrum des sich entwickelnden Gelbkörpers, Zone 1, besteht aus
Erythrozyten und Fibrin. Die sich nach außen anschließende Zone 2 ist durch
VEGF-positive Makrophagen, die durch Freisetzung von VEGF die Migration und
Proliferation von Endothelzellen während der frühen lutealen Angiogenese
fördern, Erythrozyten und Bindegewebe charakterisiert. Im frühen und späten
Residualgelbkörper kommt es zu einer massiven Einwanderung von Makrophagen,
die den programmierten Zelltod lutealer Endothelzellen vermitteln können. Das
wichtigste Ergebnis dieser Studie war, dass im Corpus luteum in Rückbildung
eine neue Angiogenesewelle auftritt, wie der Anstieg der kapillären Dichte und
die gleichzeitige Vergrößerung der Anzahl VEGF-positiver Zellen belegen. Die
erneute Angiogenesewelle während des Abbaus des Gelbkörpers könnte
gleichzeitig den Aufbau des Gelbkörpers des nachfolgenden Zyklus vermitteln.
Die Ergebnisse der Untersuchung des Corpus albicans ergaben gleichfalls einen
erneuten Anstieg der Kapillarenanzahl und des prozentualen Flächenanteils der
Gefäßlumina in Stadium 10 des Corpus albicans. Es ist anzunehmen, dass das
Corpus albicans von außen nach innen organisiert wird. Erstmalig gelang die
immunhistochemische Darstellung von VEGF-R2 und Ang-2 in vaskulären glatten
Muskelzellen aus dem bovinen Corpus luteum. Es ist anzunehmen, dass VEGF und
Ang-2 Mitogene für vaskuläre glatte Muskelzellen im bovinen Ovar darstellen.
Die ultrastrukturellen Untersuchungen ergaben, dass die durch den Verschluss
größerer Blutgefäße durch abgeschwemmte Zellen bedingte Mangeldurchblutung den
auslösenden Faktor für den programmierten Zelltod von lutealen Endothelzellen
darstellen könnte. Ein weiteres wichtiges Ergebnis dieser Studie war, dass
Hochleistungskühe im Vergleich zu Kühen, die zu Zweinutzungsrassen zu zählen
sind, eine intensivere luteale Angiogenese zeigen und die bei
Hochleistungsmilchkühen auftretenden Störungen der ovariellen Funktionen
möglicherweise durch eine Hochregulierung angiogener Prozesse oder einen
Defekt der Gegenregulation der Angiogenese (Anti-Angiogenese) bedingt sein
könnten.The bovine corpus luteum is an excellent model for controlled vascular
development and regression. The aim of this study was to examine the pattern
of blood vessel growth and regression during the development and luteolysis of
the corpus luteum. A potential coherence between the morphometric results and
factors involved in angiogenesis, namely VEGF, VEGF-R2 and Ang-2 should be
pointed out. Each step of angiogenesis and particulary anti-angiogenesis
should be documented with regard to vascular density and apoptosis. 47 bovine
corpora lutea from different stages of the oestrous cycle were examined by
light- and electron-microscopy, lectinhistochemistry, immunohistochemistry and
TUNEL-Test. An important result of this study was that the corpus
hämorrhagicum could be divided into three zones: the central zone of the
developing corpus luteum consisting of erythrocyts and fibrin; the outer zone
characterized by erythrocyts, connective tissue and VEGF-positive macrophages
which might stimulate migration and proliferation of endothelial cells during
early luteal angiogenesis. In the early and late regressing corpus luteum many
macrophages could be observed which might be responsible for the programmed
cell death of endothelial cells. The most important result of the present
study was that during late luteal regression a new angiogenic phase sets in. A
moderate increase of capillaries becomes obvious and the VEGF-immunolabelling
is high during late regression. It is possible that the new angiogenic phase
in the regressing corpus luteum is not only important for regression of the
corpus luteum but also for the development of the corpus luteum of the
following cycle. The results of this study show further more an increase of
capillaries and blood vessel lumina in stadium 10 of the corpus albicans.
Therefore it may be that the corpus albicans is organized from the outer to
the inner zone. For the first time VEGF-R2 and Ang-2 could be shown in
vascular smooth muscle cells of the bovine corpus luteum indicating that these
two factors are important mitogens for vascular smooth muscle cells in the
bovine ovary. Ultrastructural analysis shows that the obliteration of blood
vessels by cells causes a reduction of blood flow which might trigger
programmed cell death of luteal endothelial cells. Another important result of
this study was that high-performance cows show a more intensive luteal
angiogenesis than other cows. This may indicate that ovarial dysfunctions in
these animals are the result of an increased angiogenesis or an defect of
anti-angiogenesis
