Problemstellung: Humane beta-Defensine (hBDs) sind antimikrobielle Peptide,
die in der Formierung der angeborenen, lokalen Immunantwort eine wichtige
Rolle zu spielen scheinen. Die Bedeutung dieser Peptide in der menschlichen
Zahnpulpa ist noch nicht ausreichend geklärt. Zielsetzung: Das Ziel der Studie
war, die Genexpression der humanen beta-Defensine-1, -2, -3 und -4 sowie
TNF-α, COX-2, IL-1β und -6 im gesunden und entzündeten Pulpagewebe zu
untersuchen. Die Expression von proinflammatorischen Zytokinen diente in der
vorliegenden Arbeit als Kontrolle der tatsächlich vorhandenen Entzündung.
Material und Methoden: Die gesunden und entzündeten Pulpen wurden entweder
durch Vitalexstirpation oder post extractionem entnommen. Die Proben wurden
unter Zugabe von RNA-Stabilisationsreagens sofort nach der Entnahme bis zur
weiteren Verarbeitung in flüssigem Stickstoff schockgefroren und bei -80 °C
gelagert. Die mRNA wurde nach dem Homogenisieren der Proben mittels TRIzol-
Methode extrahiert und anschließend in einer Reverse-Transkriptase-Reaktion in
cDNA umgeschrieben. Die quantitative Analyse der Genexpression erfolgte
mittels Real-Time-Polymerasekettenreaktion. Die Auswertung der Ergebnisse
wurde mittels Mann-Whitney-U-Tests durchgeführt. Ergebnisse: Die Genexpression
von humanen beta-Defensinen und proinflammatorischen Zytokinen findet im
Pulpagewebe statt. HBD-2 und hBD-3 wurden sowohl in gesunden als auch in
entzündeten Pulpen nur schwach exprimiert. Für hBD-1 und hBD-4 konnten in
entzündeten Pulpen im Vergleich zu gesunden Proben signifikant erhöhte
Genexpressionen nachgewiesen werden. Die Genexpression für die
proinflammatorischen Zytokine TNF-α, COX-2 und IL-1β war gegenüber den
gesunden bei den entzündeten Pulpen erhöht. Für das proinflammatorische
Zytokin IL-6 konnten keine signifikante Unterschiede bezüglich der
Genexpression gefunden werden. Schlussfolgerung: Humane beta-Defensine-1 und
-4 sowie die proinflammatorischen Zytokine TNF-α, COX-2 und IL-1β werden in
entzündeten Pulpen verstärkt exprimiert. Die Expression dieser Peptide spielt
eine Rolle bei der entzündlichen Reaktion der menschlichen Pulpa.Statement of problem: Human beta-defensins (hBDs) are antimicrobial peptides
that play an important role in the innate host defense against bacterial
invasion, contribute to promotion of adaptive immune responses and show
chemotactic activities. Until now, the role of hBDs in the human dental pulp
has not been adequately investigated. Objectives: The aim of this study was to
determine the expression of hBD-1, -2, -3, -4 and proinflammatory cytokines
TNF-α, COX-2, IL-1β and -6 in healthy and inflamed human dental pulps. In the
present study cytokines were used as molecular diagnostic markers for pulpal
inflammation. Materials and methods: Samples of healthy and inflamed dental
pulps were obtained from extracted third molars and during treatment of
pulpitic teeth. Pulp tissue specimens were immediately frozen in liquid
nitrogen with addition of RNA stabilization reagent and stored at -80 °C.
Total RNA was extracted from homogenized pulp tissue using the TRIzol method
Gene expression was assessed using Reverse Transcriptase Reaction and Real-
Time-PCR. Differences in gene expression between healthy and inflamed pulps
were compared using Mann-Whitney-U test. Results: The expression of human
beta-defensins and cytokins was observed in human dental pulps. HBD-2 and -3
were only weakly expressed in healthy and inflamed pulps. In contrast, the
expression of hBD-1 and -4 was significantly increased in inflamed compared to
healthy pulps. The expression of TNF-α, COX-2, IL-1β (but not IL-6) was also
significantly increased during inflammation. Conclusions: These results
suggest that beta-defensins obviously play a role in the innate pulpal host
defence
