GesamtdissertationCanonical Transient Receptor Potential (TRPC) Kanäle sind nicht-selektive
Kationen-Kanäle und in viele Signaltransduktionsprozesse eingeschaltet. Die
Bedeutung von TRPC Kanälen bei der essentiellen Hypertonie ist bislang noch
nicht untersucht worden. TRPC-Kanäle wurden bei 51 Patienten mit essentieller
Hypertonie und 51 altersgleichen normotensiven Kontrollpersonen untersucht.
Die Expression von TRPC-Kanälen wurde mit Reverser-Transkriptase-Polymerase-
Kettenreaktion (RT-PCR), mit Immunoblotting und mit quantitativem in-cell
Western Assay bestimmt. Gen-silencing erfolgte mit spezifischer small-
interfering RNA (siRNA). Der Calcium- und der Gadolinium-Einstrom in Monozyten
wurden mittels Fluoreszenz-Spektrophotometrie bestimmt. In humanen Monozyten
wurden die Transkripte für TRPC3 und TRPC5 mittels RT-PCR nachgewiesen. TRPC3-
und TRPC5-Kanal-Proteine wurden in Monozyten mittels Immunoblots nachgewiesen.
Es zeigte sich eine gesteigerte Expression von TRPC3 und TRPC5 bei Patienten
mit essentieller Hypertonie im Vergleich mit normotensiven Kontrollpersonen
(normalisierte TRPC3 Expression: 3,21 ± 0,59 versus 1,36 ± 0,07 jeweils n =
20; p < 0,01; normalisierte TRPC5 Expression: 2,10 ± 0,28 versus 1,40 ± 0,52;
jeweils n = 12; p < 0,05). Bei Monozyten von Patienten mit essentieller
Hypertonie ergab sich ein signifikant gesteigerter Kationen-Einstrom im
Vergleich mit normotensiven Kontrollpersonen (Gadolinium/Calcium-Einstrom, 125
± 14% versus 80 ± 7%; jeweils n = 51; p < 0,01). Nach dem Einsatz von small
interfering RNA gegen TRPC5 kam es zu einer signifikanten Verminderung der
TRPC5-Kanal-Expression und zur Verminderung des Calcium- und des Gadolinium-
Einstroms. Weiterhin zeigte sich auch eine gesteigerte Expression von TRPC3
sowie ein gesteigerter Calcium-Einstrom in Monozyten von spontanhypertensiven
Ratten im Vergleich mit normotensiven Wistar-Kyoto-Ratten. Diese Ergebnisse
weisen auf eine wesentliche Bedeutung von TRPC-Kanälen in der Pathogenese der
essentiellen Hypertonie hin.Canonical transient receptor potential (TRPC) channels are nonselective cation
channels which are involved in cellular signal transduction. The role of TRPC
channels has not yet been investigated in the pathogenesis of essential
hypertension. We studied TRPC channels in 51 patients with essential
hypertension and 51 age-matched and sex-matched normotensive control subjects.
The expression of TRPC was measured using reverse transcriptase-polymerase
chain reaction (RT-PCR), immunoblotting, and quantitative in-cell western
assay. Gene silencing by small interfering RNA for specific TRPC knockdown was
also performed. The influx of calcium and gadolinium into monocytes was
determined using the fluorescent dye technique. TRPC3 and TRPC5 mRNA was
detected in human monocytes using RT-PCR. The expression of TRPC3- and
TRPC5-channel protein in human monocytes was confirmed using immunoblotting.
We observed a significant increase of TRPC3 and TRPC5 protein expression in
essential hypertensive patients compared with normotensive control subjects
(normalized TRPC3 expression, 3.21 ± 0.59 versus 1.36 ± 0.07; each n = 20; p <
0.01; normalized TRPC5 expression, 2.10 ± 0.28 versus 1.40 ± 0.52; each n =
12; p < 0.05). We observed an increased gadolinium/calcium-influx ratio in
essential hypertensive patients compared with normotensive control subjects
(gadolinium/calcium influx ratio, 125 ± 14% versus 80 ± 7%; each n = 51; p <
0.01). Knockdown of TRPC5 using small interfering RNA reduced channel
expression and caused a significant attenuation of calcium and gadolinium
influx. The calcium-influx was significantly increased in monocytes from
spontaneously hypertensive rats compared to normotensive Wistar-Kyoto-rats.
This study points to an important role of TRPC channels in essential
hypertension