Zusammenfassend lässt sich sagen, dass es möglich war, eine reproduzierbare SP
in Zelllinien des Magenkarzinoms des Menschen darzustellen und zu isolieren.
Diese Zellen unterschieden sich sowohl morphologisch als auch hinsichtlich
ihres biologischen Verhaltens von der Restpopulation. Sie besaßen die
Fähigkeit, eine der Ausgangspopulation entsprechende Gesamtpopulation zu
bilden und zeigten so die Fähigkeit zur Ausdifferenzierung ebenso wie die der
asymmetrischen Zellteilung. Die SP-Zellen exprimierten vermehrt
stammzelltypische Oberflächenmarker wie MSI1 und CD133 und zeigten auch in der
genomischen Analyse eine vermehrte Expression von Genen, die für
Stammzelleigenschaften kodieren. Die so identifizierten Faktoren waren bei der
Färbung eines Magenkarzinomkollektivs selektiv unterschiedlich stark in den
Tumoren exprimiert und zeigten einen eindeutigen Zusammenhang zum Überleben
der Patienten und könnten als prognostische Faktoren des Magenkarzinoms
Anwendung finden. SP-Zellen eignen sich somit zur Identifikation und
Charakterisierung von Stammzelleigenschaften von Magenkarzinom-Zellinien.The side population (SP) of tumor cell lines shares characteristics with tumor
stem cells. The objective of this study was to phenotypically and
genotypically characterize the SP of gastric cancer cell lines. SP cells were
obtained from AGS and MKN45 gastric cancer cells using Hoechst 33342 staining
and fluorescence- activated cell sorting. The cells were subsequently studied
morphologically at cytology and immunocy- tochemistry, on the transcriptional
level via gene ar- ray, and in cell culture using recultivation assays. Genes
differentially expressed in SP cells were evalu- ated at immunohistochemistry
in tissue samples from 486 patients with gastric cancer. The SP cells were
smaller and rounder then non-SP cells. SP cells self- renewed in recultivation
experiments and differenti- ated into SP and non-SP cells. Recultivated SP and
non-SP cells exhibited distinct phenotypes in culture insofar as cell shape
and colony formation. SP cells demonstrated increased levels of the stem cell
mark- ers CD133 and Musashi-1. Transcriptional analyses demonstrated that SP
cells express genes that encode for stem cell properties including FZD7, HEY1,
SMO, and ADAM17. It was observed that ADAM17 and FZD7 are differentially
expressed in human gastric cancer, and FZD7-positive cancers are associated
with signifi- cantly shorter patient survival. In conclusion, human gastric
cancer cell lines enclose a phenotypically and genotypically distinct cell
population with tumor stem cell features. Phenotypic characteristics of this
distinct cell population are also present in gastric cancer tissue, and
correlate with patient survival
