Candida albicans interaction with enterocytes : impact on tight junction integrity

Abstract

Candida albicans est une levure dimorphique, commensale des muqueuses digestives, orales et/ou vaginales, la plus fréquemment isolée chez l’Homme. Les différences observées dans le mode d’invasion tissulaire de C. albicans, sont dues en partie à la structure des épithéliums oraux et digestifs. Ce dernier se présente en couche monocellulaire imperméable grâce à différentes jonctions telles que les jonctions serrées (tight junctions, TJ) dont les protéines fonctionnelles sont localisées au niveau membranaire. L’objectif de ce travail est de déterminer si l’infection des cellules entérocytaires Caco-2 par C. albicans entraine une modification de la structure des TJ. Tout d’abord, l’étude de la perméabilité tissulaire (analyse du passage para-cellulaire de molécules fluorescentes (Lucifer Yellow)) de monocouches de cellules Caco-2 cultivées en insert, infectées ou non par C. albicans, démontre une action modulatrice de la levure avec l’augmentation progressive de cette perméabilité tissulaire. Ensuite, l’analyse de l’expression protéique par NanoLC-MSMS ou par western blot de différentes protéines constitutives des TJ documentent une modification de leur structure, avec une diminution de ces protéines au niveau membranaire. Enfin l’étude de la localisation cellulaire de l’occludine, une protéine transmembranaire jouant un rôle clé dans l’intégrité des TJ, est réalisée par microscopie à fluorescence. Cet immunomarquage révèle la présence de doubles membranes, signe d’une perte de l’intégrité des TJ, et semble mettre en évidence une probable relocalisation cytoplasmique de cette protéine de la membrane vers le cytoplasme. Au final, ces données suggèrent qu’à fort inoculum, C. albicans pourrait faciliter son invasion au niveau des cellules entérocytaires en induisant une diminution de l’imperméabilité tissulaire, suite à l’altération de l’intégrité des TJ