Bellyeiné Pozsgai Éva

Pécsi Egyetemi Archívum

New diagnostic and therapeutical possibilities in the treatment of glioblastoma multiforme  Új diagnosztikus és terápiás lehetőségek a glioblastoma multiforme kezelésében      Ph.D. Thesis Ph.D Tézisek    Dr. Bellyeiné Dr. Pozsgai Éva      University of Pécs, Department of Clinical Chemistry and Biochemistry    Program leader/ Program vezető: Prof. Dr. Sümegi Balázs     Pécs 2011.   Bevezetés   A malignus gliomák, mint a glioblastoma multiforme, a leggyakrabban előforduló primer agydaganatok. A daganatok standard kezelése multimodális: sebészi rezekciót követően adjuváns sugárterápiában és leggyakrabban temozolomid-alapú kemoterápiában részesül a beteg. A malignus agydaganatokra jellemző a diffúz infiltráció az agyszövetbe és az emelkedett rezisztencia a hagyományos daganat terápiákkal szembenAz utóbbi években elért jelentős terápiás fejlődés ellenére a malignus gliomak korai diagnosztizálása és sikeres kezelése továbbra is nagy kihívást jelent. A Hő sokk fehérjék (Hsp), a fehérjék egy olyan speciális ubikviter csoportját képezik, melyek a sejttúlélésben játszanak nagy szerepet. A kis molekulasúlyú hő sokk fehérjék molsúlya 2-43 kDa és hasonlóan a többi Hsp-hez, molekuláris chaperone-ként működnek valamint magas fokban expresszálódnak különböző rosszindulatú daganatban. A munkacsoportunk az elmúlt években fedezett fel és jellemzett egy új kis molekulasúlyú Hsp-t, a Hsp 16.2-t. Mivel az előzetes kísérletek arra utaltak, hogy a Hsp 16.2 megjelenik neuroectodermális daganatokban, ezért megvizsgáltuk, hogy a Hsp 16.2 expresszióját különböző típusú agydaganatokban. Az volt a célunk, hogy kiderítsük, van-e szerepe a Hsp16.2-nek a daganat kialakulásában, illetve, hogy a fehérje expressziója és a tumor malignitása között van-e összefüggés.  A hypothalamusban termelődő növekedési hormont serkentő hormon (GHRH) kötődik a hypophysis-típusú GHRH receptorokhoz (pGHRH-R) és növekedési hormon (GH) szekréciót indít el a hypophysisben. A GH stimulálja az inzulin-típusú növekedési faktor-I (IGF-I)-et, mely utóbbi fontos szerepet játszik a malignus transzformáció, metasztázis és tumorigenezis folyamataiban különböző daganatokban, beleértve az agydaganatokat is. Sikeresen alkalmazták a GHRH antagonistákat különféle daganat modellekben, mint pl. malignus gliomákban. A GHRH antagonisták hatását korábban nem vizsgálták a daganat sejttúlélésre és a sejt jelátviteli útvonalaira. A jelen tanulmányban két új potens GHRH antagonista, a JMR-132 és MIA-602, hatásmechanizmusát vizsgáltuk meg. Célunk volt, hogy megvizsgáljuk az agydaganat sejtek GHRH antagonista kezelésre adott szignál transzdukciós válaszát illetve, hogy felderítsük a MIA-602 in vivo hatásosságát.  A GHRH antagonisták in vivo daganat növekedésre, invázió és metasztázis képződésre kifejtett gátló hatását korábbi tanulmányok bizonyították. In vitro kísérletekkel vizsgáltuk a MIA-602 hatását a sejt proliferációra, motilitásra, invázióra, angiogenezisre valamint metasztázis képződéssel járó fehérje expresszióra három tumor sejtvonalon, például a DBTRG-05 glioblastoma sejteken.  A vizsgálatok céljai a következők kiderítése volt:  1. Jelen van-e a Hsp 16.2 a különböző típusú agydaganatokban? 2. Van-e összefüggés a Hsp 16.2 expressziója és az agydaganatok grádusa között? 3. Kifejeződik-e a pGHRH receptor és fő splice variánsa, az SV1, a glioblastoma sejtvonalakon? 4. Milyen módon befolyásolják a sejttúlélést a GHRH antagonisták? 5. Van-e hatásuk a GHRH antagonistáknak a fő jelátviteli útvonalakra a glioblastoma sejtvonalakon? 6. Miként befolyásolják a GHRH antagonisták a glioblastoma sejtek mitokondriális membrán potenciálját? 7. Csökkentik-e a GHRH antagonisták a glioblastoma daganat növekedését kísérletes állatmodellben? 8. Van-e a GHRH antagonistáknak in vitro hatásuk az invázió és metasztázis képződésre? 9. Alkalmasak lehetnek-e a GHRH antagonisták malignus gliomák kezelésére?     Eredmények és konklúziók  1. Hsp 16.2 kifejeződést találtunk a különféle agydaganatokban, az expresszió mértéke azonban különbözött a daganat típusa és grádusa szerint. Mind a 91 tumor mintában közel azonos intranukleáris jelölés volt látható, a különbség a citoplazmatikus festődésben mutatkozott.  2.  A Hsp 16.2 csak a daganat sejtekben volt jelen szignifikáns mennyiségben, ép sejtben alig, és a Hsp 16.2 mennyisége arányos volt a sejt anapláziájának mértékével. A citoplazmatikus Hsp 16.2 expresszió mértéke egyenesen arányos a különféle daganatok grádusával. Eredményeink alapján a Hsp 16.2 értékes markerként szolgálhat a primér agydaganatok diagnosztikájában valamint a Hsp 16.2 antiapototikus aktivitása daganatellenes terápiás célpontja is lehet.  3. A pGHRH receptor és fő splice variánsa, az SV1, is megtalálhatóak a DBTRG-05 és U-87MG glioblastoma sejtvonalakon. A pGHRH-R 60, az SV1 39,5 kDa-nál.  4. A GHRH antagonisták, JMR-132 és MIA-602, csökkentették a sejttúlélést mindkét glioblastoma sejtvonalon.  5. A GHRH antagonisták sejthalált a következő proapoptotikus útvonalakon indukálnak: a foszforilált Akt, GSK3β és ERK 1/2 csökkentése, a PARP és kaszpáz-3 hasítása és az intracelluláris fehérje (AIF, EndoG és Cyt C) transzlokációja révén.  6. A GHRH antagonisták megszüntetik a mitokondriális membrán integritását, mivel a mitokondriális membrán depolarizációját és ezáltal a proapoptotikus jelátvivő molekulák intermembrán térből történő kiszabadulását segítik elő.  7. In vivo, GHRH antagonista kezelésre a kísérletes glioblastoma jelentősen megkisebbedett (69%), mely a GHRH antagonista hatásosságát bizonyítja.  8. Az új GHRH antagonista, MIA-602 csökkentette a sejtek proliferációját, migrációját, invázióját és MMP produkcióját 3 különböző daganatos sejtvonalnál (agy, petefészek és emlődaganat). MIA-602 kezelés hatására megnőtt a caveolin-1 és E-cadherin expressziója, míg jelentősen csökkent a β-catenin és NF-κB szintje.  9. A kapott eredmények arra utalnak, hogy a GHRH antagonisták, mint például a MIA-602, a malignus agydaganatban szenvedőknél a daganatellenes terápia része lehet, mivel daganatnövekedés gátló hatásúak, és gátolják az áttétképződést.  Publications in the topic/ Publikációk a témában:  1: Pozsgai E, Schally AV, Zarandi M, Varga JL, Vidaurre I, Bellyei S. The effect  of GHRH antagonists on human glioblastomas and their mechanism of action. Int J Cancer. 2010 Nov 15;127(10):2313-22. PubMed PMID: 20162575. IF: 4.91  2: Pozsgai E, Schally AV, Halmos G, Rick F, Bellyei S. The inhibitory effect of a novel cytotoxic somatostatin analogue AN-162 on experimental glioblastoma. Horm Metab Res. 2010 Oct;42(11):781-6. Epub 2010 Jul 27. PubMed PMID: 20665426. IF: 2.685  3: Kovács M, Schally AV, Hohla F, Rick FG, Pozsgai E, Szalontay L, Varga JL, Zarándi M. A correlation of endocrine and anticancer effects of some antagonists  of GHRH. Peptides. 2010 Oct;31(10):1839-46. Epub 2010 Jul 13. PubMed PMID: 20633588. IF: 2.705  4: Bellyei S, Schally AV, Zarandi M, Varga JL, Vidaurre I, Pozsgai E. GHRH antagonists reduce the invasive and metastatic potential of human cancer cell lines in vitro. Cancer Lett. 2010 Jul 1;293(1):31-40. Epub 2010 Jan 12. PubMed PMID: 20064686. IF: 4.89  5: Pozsgai E, Gomori E, Szigeti A, Boronkai A, Gallyas F Jr, Sumegi B, Bellyei S. Correlation between the progressive cytoplasmic expression of a novel small heat shock protein (Hsp16.2) and malignancy in brain tumors. BMC Cancer. 2007 Dec 21;7:233. PubMed PMID: 18154656; PubMed Central PMCID: PMC2234428. IF: 2.709  6: Bellyei S, Szigeti A, Pozsgai E, Boronkai A, Gomori E, Hocsak E, Farkas R, Sumegi B, Gallyas F Jr. Preventing apoptotic cell death by a novel small heat shock protein. Eur J Cell Biol. 2007 Mar;86(3):161-71. Epub 2007 Feb 1. PubMed PMID: 17275951. IF: 3.224  7: Bellyei S, Szigeti A, Boronkai A, Pozsgai E, Gomori E, Melegh B, Janaky T, Bognar Z, Hocsak E, Sumegi B, Gallyas F Jr. Inhibition of cell death by a novel 16.2 kD heat shock protein predominantly via Hsp90 mediated lipid rafts stabilization and Akt activation pathway. Apoptosis. 2007 Jan;12(1):97-112. PubMed PMID: 17136496. IF: 3.043  8:  Sz Bellyei, E Pozsgai, B. Sumegi: Hsp16.2 in Cancers Book Chapter in: Small Stress Proteins and Human Diseases, Protein Science and Engineering, Nova Science Publisher, New York, 2010    IF in the topic/ Témához kapcsolódó IF: 23.841 Additional publications/ Egyéb publikációk:  1: Hocsak E, Racz B, Szabo A, Pozsgai E, Szigeti A, Szigeti E, Gallyas F Jr, Sumegi B, Javor S, Bellyei S. TIP47 confers resistance to taxol-induced cell death by preventing the nuclear translocation of AIF and Endonuclease G. Eur J Cell Biol. 2010 Nov;89(11):853-61. Epub 2010 Aug 12. PubMed PMID: 20708296. IF: 3.314  2: Hocsak E, Racz B, Szabo A, Mester L, Rapolti E, Pozsgai E, Javor S, Bellyei S, Gallyas F Jr, Sumegi B, Szigeti A. TIP47 protects mitochondrial membrane integrity and inhibits oxidative-stress-induced cell death. FEBS Lett. 2010 Jul 2;584(13):2953-60. PubMed PMID: 20556887. IF: 3.541  3: Papp A, Cseke L, Farkas R, Pavlovics G, Horvath G, Varga G, Szigeti A, Bellyei S, Marton S, Poto L, Kalmar K, Vereczkei A, Pozsgai E, Horvath OP. Chemo-radiotherapy in locally advanced squamous cell oesophageal cancer--are upper third tumours more responsive? Pathol Oncol Res. 2010 Jun;16(2):193-200. Epub 2009 Sep 17. PubMed PMID: 19760123. IF: 1.152  4: Szigeti A, Hocsak E, Rapolti E, Racz B, Boronkai A, Pozsgai E, Debreceni B, Bognar Z, Bellyei S, Sumegi B, Gallyas F Jr. Facilitation of mitochondrial outer  and inner membrane permeabilization and cell death in oxidative stress by a novel Bcl-2 homology 3 domain protein. J Biol Chem. 2010 Jan 15;285(3):2140-51. Epub 2009 Nov 9. PubMed PMID: 19901022; PubMed Central PMCID: PMC2804370. IF: 5.520  5: Boronkai A, Bellyei S, Szigeti A, Pozsgai E, Bognar Z, Sumegi B, Gallyas F Jr. Potentiation of paclitaxel-induced apoptosis by galectin-13 overexpression via activation of Ask-1-p38-MAP kinase and JNK/SAPK pathways and suppression of Akt and ERK1/2 activation in U-937 human macrophage cells. Eur J Cell Biol. 2009  Dec;88(12):753-63. Epub 2009 Aug 31. PubMed PMID: 19717209. IF: 3.955  6: Szigeti A, Minik O, Hocsak E, Pozsgai E, Boronkai A, Farkas R, Balint A, Bodis J, Sumegi B, Bellyei S. Preliminary study of TIP47 as a possible new biomarker of cervical dysplasia and invasive carcinoma. Anticancer Res. 2009 Feb;29(2):717-24. PubMed PMID: 19331227. IF: 1.390  7: Szapary L, Bagoly E, Kover F, Feher G, Pozsgai E, Koltai K, Hanto K, Komoly S, Doczi T, Toth K. The effect of carotid stenting on rheological parameters, free radical production and platelet aggregation. Clin Hemorheol Microcirc. 2009;43(3):209-17. PubMed PMID: 19847055.  8: Fehér G, Bagoly E, Kövér F, Koltai K, Hantó K, Pozsgai E, Komoly S, Dóczi T,  Tóth K, Szapáry L. [The effect of carotid stenting on rheological parameters, free radical production and platelet aggregation]. Orv Hetil. 2007 Dec 16;148(50):2365-70. Hungarian. PubMed PMID: 18055360.   IF: 18.872                                                    Total IF: 42.713  

Új diagnosztikus és terápiás lehetőségek a glioblastoma multiforme kezelésében

http://pea.lib.pte.hu/bitstream/handle/pea/16511/bellyeine-pozsgai-eva-tezis-hun-2011.pdf?sequence=3&isAllowed=y

Új diagnosztikus és terápiás lehetőségek a glioblastoma multiforme kezelésében

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Pécsi Egyetemi Archívum