Total composition of alkaloids obtained by microwave extraction was determined by chromatographic mass spectroscopic method. It was revealed that the major components are matrine (64.80%), sophoramin (20.71%). Embryotoxicity and antiviral activity of total alkaloids against avian influenza virus was also evaluated

Балташ, Р. М.

Кокораева, А. К.

Electronic archive of Tomsk Polytechnic University

XIV МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ «ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ НАУК» 16  Россия, Томск, 25-28 апреля 2017 г. Том 4. Биология и фундаментальная медицина                             СУММА АЛКАЛОИДОВ ТРАВЫ GOEBELIA ALOPECUROIDES BGE., ПОЛУЧЕННАЯ МЕТОДОМ МИКРОВОЛНОВОЙ ЭКСТРАКЦИИ Р.М. Балташ, А.К. Кокораева Научный руководитель: PhD доктор, доцент Г.Ж. Байсалова  Евразийский Национальный университет им. Л.Н. Гумилева,  Казахстан, г. Астана, ул. Мунайтпасова, 5, 010000 E-mail: risabaltash@gmail.com  TOTAL ALKALOIDS OF GOEBELIA ALOPECUROIDES BGE. GRASS OBTAINED BY MICROWAVE EXTRACTION METHOD R.M. Baltash, A.K. Kokorayeva Scientific Supervisor: PhD, associate professor G.Zh. Baisalova L.N. Gumilyov Eurasian National University, Kazakhstan, Astana, Munaitpasov str., 5, 010000 E-mail: risabaltash@gmail.com  Abstract. Total composition of alkaloids obtained by microwave extraction was determined by chromatographic mass spectroscopic method. It was revealed that the major components are matrine (64.80%), sophoramin (20.71%). Embryotoxicity and antiviral activity of total alkaloids against avian influenza virus was also evaluated.  Введение. Растения рода Goebelia Bge. семейства Fabaceae широко распространены на территории Казахстана и издавна используются в качестве лекарственных растений в народной и традиционной медицине. Лекарственное действие растений этого рода обусловлено содержащимися в них биологически активными веществами – в основном алкалоидами и флавоноидами. Корневища с корнями Goebelia alopecuroides Bge. (G. alopecuroides Bge.) являются сырьем для получения  препарата «Фланорин», который обладает гепатопротекторным действием [1]. В китайской традиционной медицине семена этого растения были использованы как противовоспалительное и антибактериальное средство [2]. Целью данной работы является получение, определение состава и оценка эмбриотоксичности и противовирусной активности суммы алкалоидов травы G. alopecuroides Bge.. Материалы и методы исследования. Растительное сырье, травы G. alopecuroides Bge. были собраны в мае 2016 года в Республике Казахстан, Кзыл-Ординская область, село Иркуль. Навеску воздушно-сухой измельченной травы экстрагировали в микроволновом реакторе этиловым спиртом при 70ºC, мощности 200 W в течение 20 минут.  После проведения микроволновой (МВ) экстракции спиртовой экстракт отфильтровывали на разборной тефлоновой воронке в вакууме водоструйного насоса, а растительное сырье вторично заливали 15 мл этилового спирта и МВ экстракцию повторяли еще раз. После двух экстракций этанольные экстракты объединяли. Растворитель удаляли на ротационном вакуумном испарителе, остаток высушивали в вакууме масляного насоса, взвешивали и определяли выход общего экстракта. Выход экстракта составил 15,86 ±1,01%. XIV МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ «ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ НАУК» 17  Россия, Томск, 25-28 апреля 2017 г. Том 4. Биология и фундаментальная медицина                             В колбу с высушенным этанольным экстрактом приливали по 20 мл хлороформа и 15 мл 2%-ного водного раствора соляной кислоты. Интенсивно перемешивали. От смолы отделяли в делительной воронке. Далее хлороформный слой экстрагировали трижды 15 мл водного раствора соляной кислоты. Полноту извлечения алкалоидов проверяли качественной реакцией на алкалоиды [3]. Полученный общий кислый экстракт доводили до pH 10, добавляя порциями сухой карбонат натрия. Щелочной раствор экстрагировали 20 мл хлороформа шесть раз. Полноту извлечения алкалоидов проверяли, как описано выше Объединенные хлороформные вытяжки сушили над безводным сульфатом магния 12 часов. От сульфата магния отделялись фильтрованием через складчатый бумажный фильтр. Растворитель удаляли на ротационном испарителе, остаток сушили в вакууме масляного насоса, и взвешивали. Выход суммы алкалоидов составил 1.00%. Для определения качественного и количественного состава суммы алкалоидов травы G. alopecuroides Bge. использован метод хромaто-мaсс спектроскопии с идентификацией компонентов по базе данных. Исследования по изучению эмбриотоксичности и противовирусной активности проводили в трехкратной повторности на 10-дневных куриных эмбрионах (КЭ), каждая экспериментальная группа состояла из пяти эмбрионов. Для экспериментов препарат (экстракт побегов софоры) разводили в фосфатно-солевом буферном (ФСБ) растворе (pH 7,2) c концентрацией 50 мг на 1 мл раствора и выдерживали около 30 мин при температуре 36,6°С до полного растворения.  Для изучения эмбриотоксичности препарат в дозе от 10 до 0,08 мг, растворенный в ФСБ растворе, в объеме 0,2 мл вводили в хорионаллантоисную полость эмбриона. Контролем служила группа, которой вводили ФСБ раствор без добавления препарата. Результаты учитывались по количеству погибших КЭ в течение всего периода до вылупления цыплят. Для изучения вирусингибирующей активности использовали вирус гриппа птиц A/крачка/Южная Африка/1/61 (H5N3). К приготовленным разведениям препарата добавляли равный объем вируса (100 ЭИД50/0,2мл). Полученную смесь выдерживали 60 мин при 36,6°С, затем вводили в хорионаллантоисную полость КЭ в объеме 0,2 мл. Контролем служили две группы эмбрионов: 1-ая – чистый раствор ФСБ, 2-ая – вирус в смеси с равным объемом ФСБ. Опытные и контрольные группы КЭ инкубировали при 36,6°С в течение 48 ч. Противовирусное действие определяли по наличию гемаглютинирующей активности вируса в аллантоисной жидкости. Результаты. Как показывают хромато-мaсс спектроскопические данные, основными компонентами, обнаруженными в сумме алкалоидов травы G. alopecuroides Bge., являются матрин (1) и структурно родственные алкалоиды софорамин (2), софоридан (3), цитизин (4)  (нa рисунке 1, 2-4), идентифицированы минорные алкалоиды 5,6-дидегидроспартеин-2-он и изософорамин (рисунок 1).  4NNOHHHNNO2NNOHH HHNNHHHH31  Рис. 1. Структурные формулы основных алкалоидов G. alopecuroides Bge. XIV МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ «ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ НАУК» 18  Россия, Томск, 25-28 апреля 2017 г. Том 4. Биология и фундаментальная медицина      Таблица 1  Компонентный состав сумм алкалоидов из трaвы G. alopecuroides Bge. Rt Компонент ММ % 20.142 не идентифицировaн 232 3.49 22.079 цитизин 190 1.26 22.388 5, 6-дидегидроспартеин-2 -он 246 0.46 23.241 не идентифицировaн 246 0.80 23.533 софоридан 248 0.98 23.697 не идентифицировaн 246 2.68 23.757 матрин 248 64.80 24.032 не идентифицировaн 246 2.38 24.411 не идентифицировaн 262 0.94 25.022 d-термопсин 244 0.34 25.117 изософорамин 244 0.61 25.358 софорамин 244 20.71  В ходе проведенных исследований у суммы алкалоидов выявлено токсическое действие в дозах 2,5 - 10 мг/КЭ, в дозе 1,25 – 0,08 мг/КЭ токсического влияния на развитие КЭ не выявлено. Также установлено, что препарат в дозах от 0,08 до 10 мг/КЭ не обладает способностью подавлять репродукцию вируса гриппа птиц A/Крачка/Южная Африка/1/61 (H5N3).  Заключение. В результате проделанной работы получен и определен качественный и количественный состав суммы алкалоидов травы  G. alopecuroides Bge.. Также оценена  эмбриотоксичность и противовирусная активность суммы алкалоидов в отношении вируса гриппа птиц A/Крачка/Южная Африка/1/61 (H5N3).   СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ  1. Халилов Р.М., Котенко Л.Д., Нигматуллаев А.М., Маматханов А.У. Характеристика корней с корневищами Pseudosophora alopecuroides: Материалы IV Всероссийской конф. книга 2 – Барнаул, 2009. – С. 75-76. 2. Guan Y, Ma CH, Huang XY and et.al. Components of Sophora alopecuroides seeds // Chemistry natural compounds. – 2009. №45. – C. 545-546. 3. Химический анализ лекарственных растений: учебное пособие для фармацевтических вузов / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич – М.: Высш. школа, 1983. – 176 с. 

Total alkaloids of Goebelia alopecuroides bge. grass obtained by microwave extraction method

http://earchive.tpu.ru/bitstream/11683/44856/1/conference_tpu-2017-C21_V4_p16-18.pdf

Total alkaloids of Goebelia alopecuroides bge. grass obtained by microwave extraction method

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Electronic archive of Tomsk Polytechnic University