Изложены результаты исследования полиморфизмов генов цитокинов у больных гипертонической болезнью со стадиями заболевания. Генетическим фактором риска развития III стадии заболевания следует считать аллель -308A, генотип -308AGTNFa, а также аллель +250GLta и генотип +250GGLta (p<0,05

Кривошей, И. В.

DSpace at Belgorod State University

НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ Серия Медицина. Фармация. 2013. № 25 (168). Выпуск 24 165ГЕНЕТИКАУДК 575.17ИЗУЧЕНИЕ АССОЦИАЦИЙ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ СО СТАДИЕЙ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИБелгородский государственный национальный исследовательский университетИ.В. КРИВОШЕЙВ статье изложены результаты исследования поли­морфизмов генов цитокинов у  больных гипертонической болезнью со стадиями заболевания. Генетическим факто­ром риска развития I I I  стадии заболевания следует счи­тать аллель -308A, генотип -308AGTNFa, а также аллель +250GLta и генотип +250GGLta (p<0,05).e-mail:Krivoshei.i.v@yandex.ru Ключевые слова: гипертоническая болезнь, стадия заболевания, полиморфизм генов цитокинов.Гипертоническая болезнь (ГБ) относится к числу наиболее частых сердечно-сосудистых заболеваний и является важнейшим фактором риска развития инсульта, ишемической болезни сердца, а также инфаркта миокарда, сердечной недостаточности, определяющих раннюю инва- лидизацию и высокую смертность в большинстве экономически развитых стран мира [1, 2, 3, 4, 5]. Среди взрослого населения России более 40% имеют повышенные цифры артериального давления. При этом следует подчеркнуть, что ГБ в большинстве случаев, а именно в 70%, протекает бессимптомно и, к сожалению, результативное лечение наблюдается только в 22% случаях несмотря на большое число антигипертензивных препаратов [3].ГБ имеет мультифакториальную природу и относится к полигенным заболеваниям [6, 7, 8]. Согласно литературным данным в 30-80% случаев развитие ГБ обусловлено генетическими фак­торами [9, 10].Генетические факторы оказывают детерминирующее влияние на изменчивость систоличе­ского и диастолического артериального давления [11, 12], при этом они составляют 38% и 42% соответ­ственно, а роль средовых факторов относительно незначима и равна 5,7% и 4% [13].Изучение молекулярно-генетических основ ГБ открывает перспективы для разработки эффективных мер профилактики, адекватной терапии, а также способов прогнозирования те­чения заболевания. Общая концепция роли генетических факторов в этиопатогенезе ГБ обос­нована, но остается много неясных вопросов относительно вклада конкретных генов. Относи­тельно недавно стал изучаться вопрос об участии генов цитокинового каскада в развитии ГБ. Вместе с тем результаты клинических и экспериментальных исследований немногочисленны и противоречивы.Цель работы -  анализ ассоциаций генетических вариантов факторов некроза опухо­лей и их рецепторов со стадиями ГБ.Материалом для исследования послужили образцы ДНК, выделенные из цельной венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции: 452 больных ГБ и 531 человек по­пуляционного контроля. В исследуемой нами группе из 452 больных ГБ у  81 пациента (17,92%) была установлена I стадия, у  228 пациентов (50,44%) была зафиксирована II стадия и у  143 па­циентов (3i,64%) -  III стадия заболевания. В выборки больных и популяционного контроля включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья и не имеющие родства между собой. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помо­щью клинических и лабораторно-инструментальных методов обследования. Клинико­лабораторное обследование больных проводилось на базе кардиологического отделения Белго­родской областной клинической больницы святителя Иоасафа.Таблица lСравнительный анализ частот аллелей игенотипов полиморфных маркеров генов факторов некроза опухолей II их рецепторов у  больных ГБ в зависимости от стадии заболевания (начало)Контроль ная группа(п=531)1Больные ГБOR (95% CI)Х2(Р)OR Х2(Р)OR (95% CI)Поли­мор­физмАллели,генотипыс I стадией ( n = 8 l )2со II стадией ( п = 228)3с III стадией (п=143)4Х2(Р)(95% CI)п % п % п % п % 1-2 1-2 1-3 1-3 1-4 1-4-308G 941 88,61 150 92,59 408 89,47 227 79,371,91(0,17)1,61(0,84-3,14) 0,161,09(0,76-1,58)15,82(0,001)0,50(0,35-0,71)аРч-308А 121 П ,39 12 7,41 48 ю,53 59 20,630,62(0,32-1,19)(0,69)0,92(0,63-1,32)2,02(1,41-2,89)<:o '-308GG 417 78,53 70 86,42 183 80,26 91 63,642,23(0,14)1,74(0,86-3,6о)0,19(о,66)1,11(0,74-1,67)12,67(0,001)0,48(0,32-0,73)0 со1 -308AG 107 20,15 10 12,35 42 18,42 45 31,472,29(0,13)0,56(0,26-1,16)0,20(0,65)0,90(0,59-1,35)7,63(0,001)1,82(1,18-2,80)-308АА 7 1,32 1 1,23 3 1,32 7 4,890,0005(1,00)0,94(0,04-7,70)0,0005(1,00)1,00(0,20-4,32)5,44(0,02)3,85(1Д9-12,50)+250G 286 26,93 33 20,37 112 24,56 101 35,312,81(0,09)0,69(0,45-1,06)0,81(0,37)0,88(0,68-1,15)7,34(0,01)1,48(1,11-1,97)а2+250А 776 73,07 129 79,63 344 75,44 185 64,69 1,44(0,94-2,21)1ДЗ(0,87-1,47)0,68(0,51-0,90)ооLO(М++250 GG 33 6,22 4 4,94 11 4,83 20 13,990,04(0,84)0,78(0,23-2,40)о ,34(0,56)0,77(0,36-1,61)8,35(0,005)2,45(1,31- 4,59)+250AG 220 41,43 25 30,86 90 39,47 61 42,662,84(0,09)0,63(0,37-1,07)0,18(0,67)0,92(0,66-1,28)0,03(0,87)1,05(0,71-1,55)+250 А А 278 52,35 52 64,20 127 55,70 62 43,353,51(0,06)1,63(0,98-2,73)0,59(0,44)1Д4(0,83-1,58)3,30(0,07)0,70(0,47-1,03)Окончание та б л .1Контроль ная группа(п=531)1Больные ГБХ2(Р)OR  (95% CI)Х2(Р)Поли­мор­физмАллели,генотипыс I стадией (n=8l)2со II стадией (п=228)3с III стадией (п=143)4Х2(Р)OR  (95% CI)OR  (95% CI)п % п % п % п %1-2 1-2 1-3 1-3 1-4 1-4+36 G 534 50,28 97 59,88 229 50,22 1б2 56,644,80(0,03)1,48(1,04-2,10)0,0005(1,00)1,00(0,80-1,25) 3,401,29(0,99-1,70)гЧВ!Рч+36 А 528 49,72 65 40,12 227 49,78 124 43,360,68(0,48-0,96)1,00(0,80-1,26)(0,07) 0,77(0,59-1,02)О3СО++36 GG 128 2 4 ,п 29 35,80 58 25,44 40 27,97 4,45(0,04)1,76(1,04-2,96)0,90(о,77)1,07(о,7 4 -1,5б)0,71(0,40)1,22(0,79-1,89)+36 AG 278 52,35 39 48,15 ИЗ 49,56 82 57,34 0,34(0,56)0,85(0,52-1,38)о ,39(о,53)0,54(0,39-0,76)о ,94(о,33)1,22(0,83-1,81)+36 А А 125 23,54 13 16,05 57 25,00 21 14,69 1,85(0,17)0,62(0,32-1,20)0,12(о,73)1,08(0,74-1,58)4,70(0,03)0,56(0,33- 0,95)+1663 G 457 54,80 103 63,58 2б1 57,24 I64 57,343,90(0,05)1,44(1,00-2,57)0,62(о,43)1,10(0,87-1,40)0,46(0,50)1,11(0,84-1,47)сч&Рн +1663 А 377 45,20 59 36,42 195 42,76 122 42,660,69(0,48-1,00)0,91(0,72-1,15)0,90(0,68-1,19)О +1663 GG 122 29,26 33 40,74 73 32,02 46 32,17 3,65(0,06)1,66(0,99-2,79)0,41(0,52)1Д4(0,79-1,64)0,30(0,58)1,15(0,75-1,76)сочОчОгН++1663 AG 213 51,08 37 45,68 115 50,44 72 50,35 о ,59(о,44)0,81(0,49- 1,33)0,01(о,94)0,98(0,70-1,36)0,003(0,96)0,97(0,65-1,45)+1663 А А 82 19,66 11 13,58 40 17,54 25 17,481,28(0,26)0,64(0,31-1,32)0,31(0,58)0,87(0,56-1,35)0 ,20(0,65)0,87(0,51-1,46)168 НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ С ГД  Серия Медицина. Фармация. 2013. № 25 (168). Выпуск24Изучались следующие генетические полиморфизмы: фактор некроза опухолиa(-308G/ATNFa), лимфотоксин a  (+250A/GLta), рецептор фактора некроза опухоли 1-го типа (+36A/GTNFR1), рецептор фактора некроза опухоли 2-го типа (+1663А^ТМ РК2).Анализ изуча­емых локусов осуществлялся с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей. Статистическая об­работка данных проводилась с использованием программных пакетов «STATISTICA for Windows 6.0» и «Microsoft Ехсе! 2007». Для сравнения частот аллелей и генотипов между раз­личными группами использовали критерий х 2 с поправкой Йетса на непрерывность. Вычисле­ния производили в таблицах сопряженности 2х2 [14].Результаты. При изучении распределения полиморфных генетических маркеров ци- токинов среди больных ГБ с различными стадиями заболевания, а также в контрольной группе установлены статистически достоверные различия в частотах генотипов и аллелей по локусам - 308 G/ATNFa, +250 A/GLta, +36 A/GTNFR1 (таблица 1). Установлено, что среди больных ГБ с Ш стадией заболевания, концентрация аллеля -308A гена TN Fa составила 20,63% и была наибольшей по сравнению как с контролем, где данный показатель составил 11,39% (Х2=15,82, p=0,001, рсог=0,002, OR=2,02, 95%Cl i,4i-2,89), так и с пациентами с I(7,41%, ^2=1,91, р=0,17) и II (i0,53%, ^2=0,16, р=0,69) стадиями заболевания. Частота генотипа -308AGTNFa среди пациен­тов с III стадией заболевания равна 31,47%, что также достоверно отличается от контрольной группы (20,15%, ^2=7,63, р=0,001, рсог=0,003, OR=i,82,95%Cl i,i8-2,80).Выявлены различия в распространенности аллеля +250GLta между пациентами с III стадией ГБ и контрольной группой: среди больных концентрация данного маркера состав­ляла 35,31%, а в контрольной группе 26,93% (х2=7,34, p=0,01, рсог=0,02, OR=i,48, 95%Cl i,ii-1,97). Наряду с этим обращает на себя внимание наибольшая частота генотипа +250GGLta среди пациентов с III стадией ГБ, где она составляет 13,99% и превышает соответствующие по­казатели как у  пациентов с другими стадиями заболевания (4,83-4,94%), так и популяционного контроля (6,22%, х 2=8,35, р=0,005, рcoг=Р,Р2, OR=2,45, 95% CI i,3 i-4,59).Таким образом, в результате проведенного исследования установлено важное патогене­тическое значение для ГБ фактора некроза опухоли a  (-308G/ATNFa) и лимфотоксина a  (+250A/GLta). Выявлены аллели и генотипы изучаемых генов цитокинов, которые ассоции­рованы с III стадией ГБ (развитие ассоциированных (сопутствующих)клинических состояний). Факторами риска развития III стадии заболевания следует считать аллель -308ATNFa (OR=2,02), генотип -308AGTNFa (OR=1,82), а также аллель +250GLta(OR=1,48) и генотип +250GGLta (OR=2,45). Протективными факторами развития III стадии заболевания являются аллели: -308GTNFa (Or =0,50), +250А Lta (OR=0,68) и генотип -308GGTNFa (OR=0,48).Литература1. Гогин, Е.Е. Артериальная гипертензия и гипертоническая болезнь / Е.Е. Гогин // Терапевтиче­ский архив. -  20i0. -  Т. 82, № 4. -  С. 5-i0.2. Кобалава, Ж.Д. Артериальная гипертония: ключи к диагностике и лечению / Ж.Д. Кобалава, Ю.В. Котовская, В.С. Моисеев. -  М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009 -  864 с.3. Российское медицинское общество по артериальной гипертонии (РМОАГ), Всероссийское науч­ное общество кардиологов (ВНОК). Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские реко­мендации (четвертый пересмотр). Системные гипертензии. -  20i0. -  № 3. -  С. 5-26.4. Mancia, G. Reappraisal of European guidelines on hypertension management: a European Socieety of Hypertension Task Force document / G. Mancia, S. Laurent, E. Agabiti-Rosei et al. // Hypertension. -  2009. -  Vol. 27. -  P. 2i2i-2i58.5. Wu, C.Y. Stroke risk factors and subtypes in different age groups: A hospital-based study / C.Y. Wu,H.M. Wu, J.D. Lee, H.H. Weng // Neurol India -  20i0. -  Vol. 58, № 6. -  P. 863-868.6. Новиков, П.В. ДНК-тестирование: моногенные и мультифакториальные болезни /П.В. Новиков // Российский медицинский журнал. -  20ii. -  Т. 19, № i2 (406). -  С. 794-800.7. Кривошей, И.В. Полиморфизм генов цитокинов и формирование сахарного диабета у больных гипертонической болезнью / И.В. Кривошей,П.К. Алферов, М.И. Чурносов // Научные ведомости БелГУ. Серия «Медицина. Фармация». -  20i3. -  Вып. 2i. -  № 4 (i47) -  С. i65-i69.8. Polonikov, A.V. The C7i8T polymorphism in the 3' -  untranslated region of glutathione peroxidase -  4 gene is a predictor of cerebral stroke in patients with essential hypertension / A.V. Polonikov, E.K. Vialykh, M.I. Churnosov, T. Illig, M.B. Freidin, O.V. Vasileva, O.Y. Bushueva, V.N. Ryzhaeva, I.V. Bulgakova, M.A. Solodileva // Hypertension Research. -  20i2. -  Vol. 35. -  P. 507-5i2.9. Маркель, А.Л. Генетика артериальной гипертонии / А.Л. Маркель // Вестник РАН. -  2008. -  Т. 78, № 3. -  С. 235-246.НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ Серия Медицина. Фармация. 2013. № 25 (168). Выпуск 24 16910. Пузырев, В.П. Генетический взгляд на феномен сочетанной патологии у человека /В.П. Пузырев // Медицинская генетика. -  2008. -  Т. 7, № 9. -  С. 3-9.11. Rechetnikov, E. The insertion-deletion polymorphism of the ACE gene is associated with increased blood pressure in women at the end pregnancy / E. Rechetnikov, L. Akuhov, I. Dobrodomova, Y. Dvornik,A. Polonikov, M. Churnosov // Renin Angiotensin Aldosterone Syst. -  2013.Oct. 22 (PMID 24150610).12. Решетников Е.А. Изучение роли индекса массы тела в характере ассоциаций генетических полиморфизмов вазоактивных гормонов с показателями артериального давления у женщин в конце бере­менности / Е.А. Решетников, Л.Ю. Акулова, И.С. Добродомова, С.П. Пахомов, И.Н. Сорокина, И.С. Поля­кова, И.В. Батлуцкая, М.И. Чурносов // Научные ведомости БелГУ. Серия «Медицина. Фармация». -  2011. -  Вып. 13, № 4 (99) -  С. 153-159.13. Martinez-Aguayo, C. Genetics of hypertensive syndrome/ C. Martinez-Aguayo, A. Fardella // Horm Res. -  2009. -  Vol. 71, № 5. -  P. 253-259.14. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета приклад­ных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. -  М. : Медиасфера, 2006. -  305 с.STUDY OF ASSOCIATIONS OF POLYMORPHISM OF CYTOKINE GENES WITH THE STAGE OF HYPERTENSIONBelgorod National Research UniversityI.V. KRIVOSHEI The article presents the results of the study of polymorphism of cytokine genes in hypertensive patients with stages of the disease. Ge­netic risk factor for the development of the III stage of the disease should be considered allele-308A, genotype-308AG TNF-a and allele +250G Lta and genotype +250GG Lta (p<0,05).e-mail:Krivoshei.i.v@yandex.ru Key words: hypertension, stage of disease, cytokine gene poly­morphisms.

Изучение ассоциаций полиморфизма генов цитокинов со стадией гипертонической болезни

http://dspace.bsu.edu.ru/bitstream/123456789/57231/1/Krivoshey_Izuchenie.pdf

Изучение ассоциаций полиморфизма генов цитокинов со стадией гипертонической болезни

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

DSpace at Belgorod State University

DSpace at Belgorod State University