Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2019Contexto: Embora a psicoterapia de exposição seja promissora no tratamento de doenças do foro nervoso e transtornos de medo como a perturbação de stress pós-traumático (PTSD), a maioria dos doentes não adquire total remissão da doença. Vários estudos sugerem a estimulação por corrente direta transcraniana (tDCS) como uma terapia capaz de facilitar o processo de extinção do medo, tendo este procedimento interesse como adjuvante para o aumento de eficácia da psicoterapia. Objetivo: O objetivo deste estudo foi explorar o efeito de tDCS repetitivo na aquisição e consolidação da extinção do medo, usando o paradigma do condicionamento e extinção do medo em ratinhos. Numa segunda experiência, teve-se como objetivo o estudo do mecanismo de ação do tDCS no córtex pré-frontal (PFC), através do uso de um procedimento de microdiálise em ratinhos, de modo a analisar o efeito do tDCS na libertação de neurotransmissores no PFC. Métodos: Uma semana pós-cirurgia, ratinhos C57BL/6J machos (N=31) foram sujeitos a um procedimento de condicionamento do medo por via auditiva, seguido de tDCS anodal a 0.2 mA, 2 x 20 min/dia, durante cinco dias. Posteriormente, um protocolo de extinção foi executado, avaliando a memória de extinção 1 e 21 dias após a extinção. Num outro procedimento, ratinhos (N=6) foram submetidos a microdiálise através de perfusão com fluído cerebrospinal artificial por uma sonda microdialítica, colocada no PFC, sendo recolhidas amostras antes, durante, e após estimulação. Resultados: Os resultados demonstraram diferença significativa entre os grupos experimentais na aquisição da memória de extinção. Aquisição acelerada da extinção foi observada em ratinhos sujeitos a tDCS, no entanto, não foram observados resultados significativos na retenção da extinção. Foram também observados uma redução do medo contextual nos ratinhos sujeitos a tDCS, assim como uma correlação entre o efeito de extinção e o patamar de base de medo em ratinhos. Os resultados da microdiálise não foram conclusivos. Conclusão: Estes resultados demonstram potencial para o uso de tDCS como adjuvante na extinção do medo. No entanto, serão necessários mais estudos para clarificar o seu mecanismo de ação, os seus efeitos na retenção da extinção em modelos patológicos, e o seu efeito a longo prazo.Background: Although there is promise for exposure-based psychotherapy in the treatment of anxiety and trauma-related disorders such as post-traumatic stress disorder (PTSD), most patients fail to achieve full remission. Several studies suggest that transcranial direct current stimulation (tDCS), a safe and non-invasive technique, can be used to facilitate the fear extinction process. Therefore, this procedure seems to be of interest to potentiate the efficacy of exposure-based therapy. Aim: The aim of this master thesis was to explore the effect of repeated tDCS on the acquisition and consolidation of fear extinction, using the fear conditioning and extinction paradigm in mice. In a second experiment, we aimed to help unravel the mechanism of action of tDCS in the prefrontal cortex (PFC) by exploring the effects of tDCS on the release of dopamine, serotonin and noradrenaline in this brain region, using a microdialysis procedure in mice. Methods: Following one week of recovery from surgery, male C57BL/6J (N=31) were subjected to auditory fear conditioning, followed by 2 x 20 min/day anodal tDCS at 0.2 mA for five consecutive days. Extinction training was then performed, and retention of fear extinction was evaluated 1 day and 21 days afterwards. Microdialysis experiment was performed in mice (N=6) by perfusing a microdialysis probe, placed during surgery in the PFC, with artificial cerebrospinal fluid. Samples were collected before, during, and after tDCS stimulation. Results: The results demonstrated a significant difference between the experimental groups in the acquisition of extinction. Accelerated acquisition of extinction was observed in mice subjected to tDCS, whereas, no significant effects on the retention of extinction were observed. Also, a reduction in contextual fear levels in tDCS mice could be observed, as well as a significant correlation between extinction effect and baseline level of fear in mice. Microdialysis results were not conclusive. Conclusion: These results show potential for the use of tDCS as an adjuvant to extinction training. However, further studies are necessary to clarify its mechanism of action and the effects on extinction retention in a model of PTSD, and long-term effect on retention of extinction memory.Vrije Universiteit Brusse
