Czech Technical University in Prague. Computing and Information Centre.
Abstract
Tato bakalářská práce se zabývá značením protilátky etuximab pomocí 89Zr. Literární rešerše je věnována problematice využití 89Zr v immunoPET a shrnuje možnosti jeho chelatace. Dále se věnuje cetuximabu, což je uvedeno do kontextu s funkcí protilátek v imunitním systému. Byly popsány možnosti konjugace protilátky a chelátoru. V rámci experimentů se práce zabývala studiem poškození struktury cetuximabu po chelataci a po označení 89Zr. Zirkonium-89 bylo připraveno reakcí 89Y(p,n)89Zr a následně separováno. Jako chelátor byl použit H3DFOSqOEt. Byl zkoumán optimální molární poměr cetuximabu a H3DFOSqOEt pro konjugaci. Vzniklý konjugát byl zna£en 89Zr o různé aktivitě. Pro zjištění poškození struktury cetuximabu byla využita elektroforéza (SDS-PAGE) a HPLC. Pro zna£ení byl vybrán konjugát s molárním poměrem 1:20. Bylo zjištěno, že protilátka nevykazuje větší poškození ani tři dny po značení.This bachelor's thesis is focused on labelling of cetuximab antibody with 89Zr. In the rst part the usage of 89Zr in immunoPET is discussed and the possibilities of chelatation are mentioned. Cetuximab is introduced in the context of function of antibodies in the immune system. The methodes of conjugation of antibodies and chelators are described. The aim of the experimental part was to study changes in the structure of cetuximab antibody after labelling. Zirconium-89 was prepared by 89Y(p,n)89Zr reaction and then separated. H3DFOSqOEt was used as a chelator. The optimal molar ratio of cetuximab and H3DFOSqOEt was studied. The prepared conjugate was labelled with 89Zr. For analyses SDS-PAGE and HPLC were used. For labelling the conjugate with molar ratio 1:20 was chosen. Three days after labelling only minimal structural changes were recognized in the antibody
