ЖЕНСКИЕ БОЛЕЗНИВУЛЬВОВАГИНИТ /ТЕРКАНДИДЫАНТИМИКОТИКИЛЕКАРСТВЕННАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ У МИКРООРГАНИЗМОВМИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ /ИС

Чернякова, Н. И.

Electronic arhive of Vitebsk State Medical University Library  (Репозиторий библиотеки Витебского государственного медицинского университета)

101  На первом этапе ПЦР-ПДРФ-анализа амплифицировали VA РНК область генома с вырож-денными праймерами VA3a [5’-CGG T[G/C]A GGC G[T/C]G CGC AGT C-3’], VA3b (5’-CGG TAA GAC GGG CGC AAT C3’) VA6 [5’-CGC AGC AC[C/G/T/A] GGA TGC ATC T-3’]. Реакцию выпол-няли в объеме 50 мкл. В состав реакционной смеси входило по 25 пмоль каждого из праймеров, 60мМ ТрисHCl (рН8,5), 15mM (NH4)2SO4, 2,2 mM MgCl2, 200 мкмоль dNTP, 2,5 ед Taq-полимеразы (АмплиСенс, Россия) и 10 мкл выделенной ДНК аденовируса. Условия реакции были следующими: начальная денатурация – 1 мин при 94ºC, 35 циклов амплификации (1 мин при 94ºC, 1 мин при 45ºC, 3 мин при 72ºC), заключительная элонгация – 8 мин при 72ºC. Реакцию проводили на амплификаторе Mastercycler Gradient (Eppendorf, Германия). Размер полученного ПЦР продукта определяли методом электрофореза в 1,5% агарозном геле в трис-ацетатном буфере.  Обратную транскрипцию и амплификацию с детекцией в режиме «реального времени» проводили, используя программируемый амплификатор «IQ5» (Bio-Rad, США). Результаты ис-следования анализировались с применением встроенного в используемый прибор программного обеспечения. Кривые накопления флуоресцентного сигнала анализировали по двум каналам FAM/Green и JOE/Yellow/HEX. Результаты интерпретировали на основании наличия (или отсутст-вия) пересечения кривой флуоресценции с установленной на соответствующем уровне пороговой линией. Интерпретацию результатов проводили в соответствии с инструкцией по применению ис-пользуемого набора реагентов. Результаты и обсуждение. По результатам проведенного анализа за период 2009-2011 года нами была установлена циркуляция на территории Витебской области четырех генотипов адено-вирусов (В1, В2, С, и F  с преобладанием генотипа С. Генотип В1, включающий в себя серотипы 3, 7, 16, 21 обнаруживался в г. Витебске и вызывал заболевания с поражением верхних дыхательных путей. Генотип, содержащий генетическую субъединицу В2 (серотипы 11, 14, 34, 35), вызывал за-болевания, которые характеризовались наличием тонзиллярного синдрома.  Генотип С характери-зовался проявлениями фарингита, кишечный синдром по типу гастроэнтерита при аденовирусной инфекции соответствовал генотипу F (серотипы 40,41). Выводы. Метод полиморфизма длин рестриции фрагмента генома (ПДРФ) изолятов адено-вирусов подтверждает генетическую неоднородность аденовирусов на территории Витебской об-ласти. При сравнительном анализе используемого нами метода ПДРФ с методом Hirt было уста-новлено, что последний позволяет получить в 10 раз меньше по количеству генома аденовирусов из-за потерь по каждому этапу выделения. Данное сравнение подтверждает большую экономиче-скую эффективность применения в клинической практике. В системе доказательной медицины метод ПДРФ аденовирусов имеет важное научно-практическое значение в решении вопросов эпи-демического расследования прогнозирования течения при вспышечном характере заболеваний, при определении тактики у пациентов с аденовирусной инфекцией, в оценке возможности разви-тия тех или иных осложнений.  Литература: 1. Berk, J. Adenoviridae / J. Berk  // Fields Virology / eds. D. M. Knipe [et al.]. – Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Pa, USA. – 6th ed. – 2013. – P. 1704–31. 2. Wold W. S. M. Adenoviruses / W. S. M. Wold, M. G. Ison // Fields Virology / eds. D. M. Knipe [et al.]. – Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Pa, USA. – 6th ed. – 2013.   ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИМИКОТИКАМ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ КАНДИДОЗНЫХ ВУЛЬВОВАГИНИТАХ  Чернякова Н.И. УО «Витебский государственный медицинский университет»  Актуальность. Одним из наиболее частых возбудителей инфекционных заболеваний вуль-вы и влагалища являются грибы рода Candida (30 – 45%). Известно, что даже после успешного ле-102  чения хронического кандидозного вульвовагинита (ХКВВ) у 50% больных симптомы заболевания появляются вновь[1]. Лечение ХКВВ остается актуальной проблемой, несмотря на внедрение в клиническую практику эффективных и хорошо переносимых антимикотиков – имидазолов и триазолов. Широ-кое использование этих препаратов, возможно, определило современную тенденцию к росту числа рецидивирующих и хронических форм кандидозной инфекции. Кроме того, механизм действия новых препаратов, а именно нарушение синтеза ферментных систем гриба, значительно повышает риск развития резистентности к антимикотикам у клинических штаммов грибов[2]. Имеющиеся в литературе данные позволяют прийти к заключению, что виды возбудителей кандидозного вульвовагинита, выделяемые на различных территориях, и их чувствительность к антифунгальным препаратам значительно различаются[3]. Таким образом, для успешной диагностики и терапии хронического кандидозного вульво-вагинита необходимо внедрять в практику  методы лабораторной диагностики чувствительности дрожжеподобных грибов к антимикотикам. В централизованной бактериологической лаборатории УЗ «Витебский областной клиниче-ский центр дерматовенерологии и косметологии» освоен метод микробиологической  диагностики и определения чувствительности дрожжеподобных грибов к противомикробным лекарственным средствам, который можно использовать в практике врача-дерматовенеролога для своевременной и достоверной диагностики и назначения рациональной этиотропной терапии. Цель исследования: изучение лекарственной резистентности клинических изолятов дрожжеподобных грибов рода Candida для совершенствования медикаментозной терапии хрони-ческого кандидозного вульвовагинита. Материал и методы. Материалом для  исследования  служили клинические изоляты дрожжеподобных грибов рода Candida, выделенные  у пациенток с диагнозом хронического кан-дидозного вульвовагинита по направлению поликлинического отделения УЗ «Витебский област-ной клинический центр дерматовенерологии и косметологии» за период январь – ноябрь 2016г.. Этиологический диагноз устанавливался на основании клинико-анамнестических данных, бакте-риоскопического и микробиологического исследования. Забор биологического материала проводился по стандартным микробиологическим мето-дикам в соответствии с инструкцией по применению Министерства Здравоохранения Республики Беларусь «Микробиологические методы исследования биологического материала» [4]. Культиви-рование биологического материала проводилось на питательных средах ООО «Химмедсинтез» с использованием селективных добавок.  За указанный период было выделено 35 клинических изолятов дрожжеподобных грибов рода Candida. Оценку чувствительности к антимикотикам идентифицированных микроорганизмов проводили диско-диффузионным методом в соответствии с инструкцией по применению «Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» [5].  Результаты и обсуждение. Как следует из полученных нами данных, представленных в таблице 1, выделенные штаммы дрожжеподобных грибов р. Candida проявили высокую чувстви-тельность к нистатину (85,7%), амфотерицину В (65,7%), клотримазолу (60,0%). К препаратам азолового ряда чувствительность исследуемых  штаммов оказалась значительно ниже –  флукона-зол (31,4%), итраконазол (31,4%), кетоконазол (25,7%).  Таблица 1. Резистентность к антимикотикам клинических изолятов дрожжеподобных грибов р. Candida (n=35) Антимикотики Чувствителен Умеренно устойчив Устойчив Амфотерицин В 23 – 12 Нистатин 30 – 5 Клотримазол 21 – 14 Флуконазол 11 11 13 Итраконазол 11 6 18 Кетоконазол 9 7 19 103   Полученные результаты явно свидетельтвуют о высоких цифрах резистентности к препара-там имидазолов и триазолов культур дрожжеподобных грибов р. Candida, выделенных у пациеток с диагнозом хронического кандидозного вульвовагинита. Это связано с преимущественным  при-менением  данных препаратов в процессе терапии ХКВВ. Выявленная резистентность, возможно, и явилась причиной неэффективной терапии и привела к хронизации заболевания.  Таким образом, в терапии хронических форм кандидозного вульвовагинита необходимо применять препараты из разных групп, предупреждая развитие резистентности. Выводы. 1. Внедрение методов микробиологической диагностики и изучения лекарственной рези-стентности клинических изолятов дрожжеподобных грибов рода Candida необходимо для досто-верной диагностики ХКВВ, дифференциальной диагностики и проведения рациональной этио-тропной терапии. 2. Наиболее оптимальным при изучении лекарственной резистентности в клинической практике является диско-диффузионный метод определения чувствительности. 3. Определение чувствительности дрожжеподобных грибов к антимикотикам долно быть неотъемлемой частью индивидуального подбора лекарственных средств для пациенок с ХКВВ. Литература: 1. Эффективность и приемлемость комбинированной терапии хронического рецидиви-рующего вульвовагинального кандидоза / В.Н. Прилепская [и др.] // Акушерство и гинекология. – 2007. – № 6 – С. 53–55. 2. Мониторинг видового состава и чувствительности к антимикотикам дрожжеподоб-ных грибов, выделенных из влагалища женщин репродуктивного возраста / А.С. Анкирская [и др.] // Клин. микробиология и антимикробная химиотерапия. – 2006. – № 1 – С. 87–95. 3. Возбудители генитального кандидоза у женщин и их чувствительность к антимико-тикам / Л.Д. Кунцевич [и др.] // Вестн. дерматологии и венерологии. – 2009. – № 4 – С. 45–48. 4. Микробиологические методы исследования биологического материала: инструкция по применению МЗ РБ № 075-0210: утв.19.03.2010. – 123 с. 5. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: инструкция по применению МЗ РБ № 226–1200 ; утв.15.12.2008. – 84 с.   ВИРУС ГЕРПЕСА И КОРОНАРНЫЙ АТЕРОСКЛЕРОЗ  Шпигун Н.В., Солодовникова С.В., Акулич Н.Ф., Крылова Е.В. УО «Витебский государственный медицинский университет»  Актуальность. Болезням системы кровообращения (БСК) отводится важное место в струк-туре общей заболеваемости и смертности во всех странах мира. На первое место в структуре БСК в Республике Беларусь выходит ишемическая болезнь сердца, течение которой опасно нестабиль-ным состоянием: острым коронарным синдромом, а также развитием инфаркта миокарда, про-грессирующей стенокардии и сердечной недостаточности, что приводит к смертности и инвалиди-зации населения.  Известно, что в основе ИБС лежит атеросклероз коронарных артерий, в патогенезе которо-го господствующее положение занимает дислипидемия. Однако в настоящее время заболевание рассматривается как многофакторное. Помимо наследственных нарушений рецепторного аппара-та, эндотелиальной дисфункции и нарушения липидного обмена, в качестве одного из этиопатоге-нетических факторов рассматриваются также разнообразные латентные вирусные инфекции [1, 2]. Экспериментально была установлена способность герпесвирусов нарушать обмен липидов в клет-ках экспериментальных животных и вызывать отложение в них кристаллов холестерина, создавая модель атеросклеротического поражения [3]. В настоящее время, несмотря на многочисленные работы, посвященные этой проблеме, её нельзя считать решенной. 

Изучение чувствительности к антимикотикам дрожжеподобных грибов при хронических кандидозных вульвовагинитах

http://elib.vsmu.by/bitstream/handle/123/11838/dos_72_2017_101-103.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Изучение чувствительности к антимикотикам дрожжеподобных грибов при хронических кандидозных вульвовагинитах

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Electronic arhive of Vitebsk State Medical University Library (Репозиторий библиотеки Витебского государственного медицинского университета)