Este trabalho teve como objectivo estudar os efeitos de alguns factores vaginais e cervicais – grau de lubrificação vaginal, tipo de Os cervical externo, local de deposição do sémen e ocorrência de refluxo cervical – sobre a taxa de fertilidade pós-IA em ovelhas Churra Galega Bragançanas (CGB).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Correia, Teresa Montenegro

Dendena, Marina

Mateus, Óscar

Maurício, Raimundo

Quintas, Helder

Valentim, Ramiro

Álvaro, Armindo

Portuguese

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EFEITOS DO GRAU DE LUBRIFICAÇÃO VAGINAL, TIPO DE OS CERVICAL EXTERNO, LOCAL DE DEPOSIÇÃO DO SÉMENE REFLUXO CERVICAL SOBRE A TAXA DE FERTILIDADE PÓS-INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM OVELHASDA RAÇA CHURRA GALEGA BRAGANÇANAÓscar Mateus1, Marina Dendena1, Teresa Correia2, Raimundo Maurício1, Armindo Álvaro3, Hélder Quintas2 y Ramiro Valentim21Instituto Politécnico de Bragança – Escola Superior Agrária, Campus de Santa Apolónia, 5300-253 Bragança, Portugal2CIMO, Instituto Politécnico de Bragança, Campus de Santa Apolónia, 5300-253 Bragança, Portugal3Instituto Superior Politécnico do Kwanza Sul, Sumbe, Kwanza Sul, AngolaOBJECTIVOEste trabalho teve como objectivo estudar os efeitos de alguns factoresvaginais e cervicais – grau de lubrificação vaginal, tipo de Os cervicalexterno, local de deposição do sémen e ocorrência de refluxo cervical –sobre a taxa de fertilidade pós-IA em ovelhas Churra Galega Bragançanas(CGB).MATERIAL E MÉTODOSLocal: Trás-os-Montes, Bragança (Latitude 41º 48’ 33’’N, Longitude 6º 44’3’’W e Altitude 670 metros).Período de estudo: 04/04/16 a 08/07/16.Animais: 68 ovelhas adultas (2-8 anos) de CGB, paridas há 6 meses.Pesagem e condicão corporal: Início do trabalho.Alimentación: Feno de prados naturais (ad libitum) e 350-400 g/animalde alimento concentrado comercial.Ciclicidade ovárica:- Avaliação pré-tratamento con progestagénios: recolha de amostras desangue entre 04-18 de Abril, 2 vezes/semana (3-4 dias de intervalo).Anestro sazonal: Níveis de P4 < 0,5 ng/ml- Avaliação da resposta aos tratamentos: recolha de amostras de sanguedurante 5 dias pós-remoção das esponjas vaginais.Resposta ovárica completa: Níveis de P4 > 0,5 ng/mlTratamento hormonal:Ejaculados:- Recolhidos por vagina artificial.- Características seminais: volume ≥ 1,7 ml, motilidade progressiva ≥ 75%e concentração espermática ≥ 3,0 x 109 espermatozóides/ml.- Diluidor seminal: Andromed®.- Método de conservação: fresco ou refrigerado.- Doses seminais: ≥ 200 x 106 espermatozóides.Inseminação artificial: 55 + 1 hora pós-administração de eCG.Diagnóstico de gestação: 40 dias pós-IA.Os principais resultados são apresentados de seguida:CONCLUSÃO– Na primeira quinzena de Abril, 74,6% das ovelhas CGB estavam cíclicas.– Todas as ovelhas responderam ao tratamento progestagénico curto + eCG.– Quarenta dias pós-IA, 85,1% das ovelhas estavam gestantes.– O tipo de Os cervical afectou a taxa de fertilidade.– A taxa de fertilidade foi maior entre as ovelhas com lubrificação vaginal normal,pós-inseminação vaginal ou ultrapassada a primeira prega cervical e na ausênciade refluxo cervical.RESULTADOSLocal deposição do sémen Taxa de FertilidadeVaginal 8/9 (88,9%a)1ª prega 45/51 (88,2%a)2ª prega 4/6 (66,7%b)Os Cervical Taxa de FertilidadeBico de Pato 17/21 (81,0%a)Ranhura 7/7 (100,0%b)Rosa 17/22 (77,2%c)Papila 6/6 (100,0%d)Prega 8/9 (88,9%a)Quadro 2. Efeito do local de deposição do sémen sobre a taxa de fertilidadea=a, para P>0,05; a≠b para P≤0,001.Quadro 1 – Anatomia de Os cervical externo e sua relação com a taxa de fertilidadea≠b, b≠c, para P≤0,01; a≠c, a≠d, b≠c, c≠d, para P≤0,001.Día 0 … Día 7Colocação de esponjas: FGA (20 mg)+ PGF2a (100 µl)Remoção das esponjas+ eCG (500 UI)Em meados de Abril, 74,6% das ovelhas estavam cíclicas (P4 > 0,5 ng/ml).A eficácia do tratamento hormonal foi de 100,0%.A taxa de fertilidade observada foi de 85,1%.O grau de lubrificação vaginal afectou a taxa de fertilidade - Normal: 100% vs. Abundante: 84,0% (c2 = 17,4; P<0,0001).Refluxo Cervical Taxa de FertilidadeSem 32/39 (88,9%a)ligeiro 15/16 (93,8%a)Com 3/4 (75,0%b)Quadro 3. Efeito do refluxo cervical sobre a taxa de fertilidadea=a, para P>0,05; a≠b, para P≤0,01.

Efeitos do grau de lubrificação vaginal, tipo de Os cervical externo, local de deposição do sémen e refluxo cervical sobre a taxa de fertilidade pós-inseminação artificial em ovelhas da raça Churra Galega Bragançana

Nos ovinos, um dos principais obstáculos à disseminação da técnica de IA resulta da dificuldade em ultrapassar o canal cervical. Nestes animais, a IA passa, essencialmente, pela deposição do sémen na vagina ou no canal cervical. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar os efeitos de alguns fatores vaginais e cervicais – grau de lubrificação vaginal, tipo de Os cervical externo, local de deposição do sémen e ocorrência de refluxo cervical – sobre a taxa de fertilidade pós-IA.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   1  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ  RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   2  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ                          Ana Sofia Santos   Ana Sofia Santos   Mariana Almeida     Associação Portuguesa de Engenharia Zootécnica (APEZ) Apartado 60, 5001-909 Vila Real  Telma G. Pinto  Mariana Almeida e Telma G. Pinto   Apartado 60,  5001-909 Vila Real  rpz@apez.pt 912 239 527  A publicação deste número foi possível graças ao apoio da Comissão Ciêntífica do XXI ZOOTEC – 21º Congresso Nacional de Zootecnia.  RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   155  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ EFEITOS DO GRAU DE LUBRIFICAÇÃO VAGINAL, TIPO DE OS CERVICAL EXTERNO, LOCAL DE DEPOSIÇÃO DO SÉMEN E REFLUXO CERVICAL SOBRE A TAXA DE FERTILIDADE PÓS-INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM OVELHAS DA RAÇA CHURRA GALEGA BRAGANÇANA Óscar Mateus1, Marina Dendena1, Teresa Correia2, Raimundo Maurício1, Armindo Álvaro3, Hélder Quintas2 e Ramiro Valentim2 1Instituto Politécnico de Bragança Campus de Santa Apolónia 5300-253 Bragança, Portugal 2CIMO, Instituto Politécnico de Bragança Campus de Santa Apolónia 5300-253 Bragança, Portugal e-mail: valentim@ipb.pt 3Instituto Superior Politécnico do Kwanza Sul Sumbe, Kwanza Sul, Angola  Introdução Nos ovinos, um dos principais obstáculos à disseminação da técnica de IA resulta da dificuldade em ultrapassar o canal cervical (Morrell, 2011 e Valentim et al., 2016). Nestes animais, a IA passa, essencialmente, pela deposição do sémen na vagina ou no canal cervical (Cseh et al., 2012 e Valentim et al., 2016). O presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar os efeitos de alguns fatores vaginais e cervicais – grau de lubrificação vaginal, tipo de Os cervical externo, local de deposição do sémen e ocorrência de refluxo cervical – sobre a taxa de fertilidade pós-IA.  Material E Métodos Este estudo foi realizado em Bragança, mais precisamente na Quinta do Pinheiro Manso (Latitude 41º 48’ 33’’N, Longitude 6º 44’ 3’’W e Altitude 670 metros), entre 4 de abril e 8 de julho 2016. Nele foram usadas 68 ovelhas adultas da raça Churra Galega Bragançana, com idades compreendidas entre os 2-8 anos. A última parição tinha ocorrido cerca de 6 RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   156  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ meses antes. As ovelhas foram alimentadas em pastoreio de prados naturais e suplementadas, em grupo, com feno de prados naturais (ad libitum) e 300-350 g/dia/ovelha de alimento concentrado comercial. Este ensaio teve início com a pesagem das ovelhas em uma balança com jaula (52,2 ± 7,8 kg) e a determinação da sua condição corporal (3,4 ± 0,5 pontos) segundo a tabela de classificação australiana (Russel et al., 1969).  Avaliação da Atividade Ovárica A atividade ovárica das ovelhas foi avaliada através da determinação dos níveis plasmáticos de progesterona (P4) – técnica de RIA. Os coeficientes médios de variação intra e inter-ensaio foram, respetivamente, de 5,5 e 12,1%.  Avaliação da Ciclicidade Pré-tratamento Nas primeiras duas semanas de ensaio (4 e 18 de abril), com o objetivo de determinar o estado fisiológico inicial (cíclicas vs. anestro) das ovelhas, procedeu-se a colheitas de amostras de sangue, com 3-4 dias de intervalo. Considerou-se que as ovelhas estavam em anestro sazonal quando, na totalidade das amostras recolhidas, os níveis plasmáticos de P4 foram inferiores a 0,5 ng/ml.  Avaliação da Resposta Ovárica Com o intuito de identificar a formação do primeiro corpo lúteo (CL) pós-tratamento, nos cinco dias pós-remoção das esponjas vaginais procedeu-se à recolha de amostras de sangue periférico. Considerou-se que o primeiro CL se havia formado quando os níveis plasmáticos de P4 ultrapassaram, pela primeira vez, os 0,5 ng/ml.  Tratamento de Controlo da Atividade Reprodutiva No dia 20 de abril, as ovelhas foram tratadas com esponjas vaginais impregnadas com 20 RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   157  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ mg de FGA (Acetato de Fluorogestona; Chrono-Gest®, Intervet, Portugal). Nessa altura, as ovelhas receberam uma injeção intramuscular de 100 µg de cloprostenol (Estrumate®, MSD Animal Health). O tratamento progestagénico teve a duração de 7 dias. Quando da remoção das esponjas vaginais (27 de abril), as ovelhas foram injetadas intramuscularmente com 500 UI de eCG/ovelha (Intergonan®, Intervet). Durante o período de tratamento, uma das ovelhas perdeu a esponja vaginal, pelo que foi excluída do estudo.  Doses Seminais Os ejaculados utilizados na preparação das doses seminais tinham um volume ≥ 1,7 ml, uma motilidade progressiva ≥ 75% e uma concentração espermática ≥ 3,0 x 109 espermatozóides/ml. Estes foram diluídos com um diluidor comercial. Cada palhinha de sémen continha, pelo menos, 200 x 106 espermatozóides. Foram usadas palhinhas de 0,25 ml.  Inseminação Artificial a Tempo Fixo As ovelhas foram inseminadas com sémen fresco ou refrigerado, independentemente de terem manifestado cio, 55 + 1 horas pós-administração de eCG. A deposição do sémen foi feita sempre o mais profundamente possível, com o auxílio de fórceps vaginais, luzes LED, pistoletes Quicklock e bainhas Minitube.  Parâmetros de Inseminação Avaliados Os parâmetros avaliados foram: grau de lubrificação vaginal (normal ou abundante), Os cervical externo (Figura 1), local de deposição do sémen (vaginal, 1ª prega ou 2ª prega) e ocorrência de refluxo cervical (sim, ligeiro, não). RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   158  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ  Figura 1. Classificação quanto à aparência externa do orifício cervical: a) bico de pato, b) fenda, c) rosa, d) papila e e) aba (Kershaw et al., 2005).  Diagnóstico de Gestação Quarenta dias após a remoção das esponjas vaginais, procedeu-se ao diagnóstico de gestação por ultrassonografia em tempo real, com o auxílio de um ecógrafo Mindray Z5Vet e de uma sonda rectal multifrequência de (5,0-10,0 MHz).  Análise Estatística No sentido de identificar diferenças estatisticamente significativas entre parâmetros, efetuaram-se análises de variância. A comparação entre médias realizou-se segundo o teste de Bonferroni/Dunn. Com o objetivo de se compararem frequências utilizou-se o teste do 2.  Resultados E Discussão De acordo com Correia (1996), a estação de anestro das ovelhas Churras Bragançanas estende-se de março a maio. Contudo, no presente trabalho, nas duas semanas anteriores à aplicação do tratamento progestagénico curto + eCG (4-18 de abril), 74,6% (n = 50) das ovelhas apresentaram, em pelo menos uma das recolhas de sangue, níveis plasmáticos de progesterona superiores a 0,5 ng/ml, ou seja, estavam “cíclicas”. Esta diferença está provavelmente associada a variações anuais das condições ambientais. RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   159  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ Todas as ovelhas responderam ao tratamento progestagénico curto + eCG. Igual resposta foi observada por Conradi (2018). Quarenta dias após a inseminação artificial, 85,1% das ovelhas estavam gestantes. Resultado idêntico (84,1%) foi encontrado por Conradi (2018). Segundo Palacios (2010), as ovelhas com uma lubrificação vaginal muito reduzida ou excessiva tendem a apresentar taxas de fertilidade mais baixas. No presente trabalho, o grau de lubrificação afetou a taxa de fertilidade (Normal: 100% vs. Abundante: 84%) ( 2 = 17,4; P<0,0001). Nos ovinos, a taxa de fertilidade pós-IA é condicionada pela complexa estrutura do cérvix, nomeadamente pelo seu Os externo e pela conformação do canal cervical (Kershaw et al., 2005). No presente trabalho, a entrada no canal cervical condicionou a taxa de fertilidade (Quadro 1).  Quadro 1. Anatomia de Os cervical externo e sua relação com a taxa de fertilidade Os Cervical Taxa de Fertilidade Bico de Pato 17/21 (81,0%a) Ranhura 7/7 (100,0%b) Rosa 17/22 (77,2%c) Papila 6/6 (100,0%d) Prega 8/9 (88,9%a) a≠b, b≠c, para P≤0,01; a≠c, a≠d, b≠c, c≠d, para P≤0,001.  Na inseminação cervical, a taxa de fertilidade é maior quanto mais profundamente for depositado o sémen (Kaabi et al., 2006). Porém, devido à conformação do canal cervical das ovelhas, o sémen é normalmente depositado na vagina ou no início do canal cervical (Kaabi et al., 2006). No presente trabalho, o local de deposição do sémen afetou a taxa de fertilidade (Quadro 2). Foi menor quando este foi deixado depois da 2ª prega.  Quadro 2. Efeito do local de deposição do sémen sobre a taxa de fertilidade RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   160  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ Local deposição do sémen Taxa de Fertilidade Vaginal 8/9 (88,9%a) 1ª prega 45/51 (88,2%a) 2ª prega 4/6 (66,7%b) a=a, para P>0,05; a≠b, para P≤0,001.  De acordo com Cseh et al. (2012), o refluxo cervical deve ser evitado. Efectivamente, a ocorrência de refluxo cervical influenciou a taxa de fertilidade (Quadro 3).  Quadro 3. Efeito do refluxo cervical sobre a taxa de fertilidade Refluxo Cervical Taxa de Fertilidade Sem 32/39 (88,9%a) ligeiro 15/16 (93,8%a) Com 3/4 (75,0%b) a=a, para P>0,05; a≠b, para P≤0,01.  Conclusões – Entre 4 e 18 de abril, 74,6% das ovelhas Churras Bragançanas estavam cíclicas. – A eficiência do tratamento progestagénico curto + eCG foi de 100%. – Quarenta dias após a inseminação artificial, 85,1% das ovelhas estavam gestantes. – O tipo de Os cervical afetou a taxa de fertilidade. – A taxa de fertilidade foi maior entre as ovelhas com lubrificação vaginal normal. – As melhores taxas de fertilidade foram obtidas pós-inseminação vaginal ou ultrapassada a primeira prega cervical. – O refluxo cervical diminuiu a taxa de fertilidade.   RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   161  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ Referências Bibliográficas Correia, TMMAA, 1996. Contributo para o estudo da sazonalidade reprodutiva das ovelhas da raça autóctone portuguesa Churra Galega Bragançana. CHIAM-IAMZ, Saragoça, Espanha, 84 pp.. Cseh, S, Faigl, V e Amiridis, GS, 2012. Anim Reprod Sci 130: 187-192. Conradi, A, 2018. Sincronização da actividade ovárica e inseminação artificial em ovelhas da raça Churra Galega Bragançana. ESAB, Bragança, Portugal, 78 pp.. David, I, Kohnke, P, Lagriffoul, G, Praud, O, Plouarboué, F, Degond, P e Druart, X, 2015. Anim Reprod Sci 161: 75-81. Kaabi, M, Alvarez, M, Anel, E, Chamorro, CA, Boixo, JC, de Paz, P e Anel, L, 2006. Theriogenology 66: 1876-1883. Kershaw, CM, Khalid, M, McGowan, MR, Ingram, K, Leethongdee, S, Wax, G e Scaramuzzi, RJ, 2005. Theriogenology 64 (5): 1225-1235. Morrell, JM, 2011. Artificial insemination: Current and future trends. In: Artificial insemination in farm animals. M Manafi (Ed), InTech, Rijeka, Croácia, 312 pp.. Palacios, E, Palacín, l, Asecla, JA, Forcada, E, Martín, S, Martino, A, 2006. Acta de las XXXI Jornadas de la SEOC, Zamora, 352-354 pp.. Russel, AJF, Doney, JM e Gunn, RG, 1969. J Agri Sci 72: 451-454. Valentim, R, Rodrigues, I, Montenegro, T, Sacoto, S, Azevedo, J e Gomes, MJ, 2016. Agrotec 21: 10-13.   EFFECTS OF VAGINAL LUBRICATION, EXTERNAL CERVICAL OS, SITE OF SEMEN DEPOSITION AND CERVICAL REFLUX IN THE FERTILITY RATE OF ARTIFICIALLY INSEMINATED CHURRA GALEGA BRAGANÇANA EWES  The aim of this paper was to study the effects of vaginal lubrication grade, external RPZ – Revista Portuguesa de Zootecnia   162  XX ZOOTEC – 20º Congresso Nacional de Zootecnia | APEZ cervical Os type, site of semen deposition and cervical reflux in the fertility rate of artificial inseminated Churra Galega Bragançana ewes. Oestrous was synchronized with a short-term progestogen plus eCG treatment. Ewes were inseminated 55 + 1 hour post-sponges’ removal. All ewes ovulated post-treatment. Forty days after insemination 85.1% ewes were pregnant. The external cervical Os type affected the fertility rate. Fertility rate were higher in less lubricated ewes, after semen deposition in the vagina or post first cervical ring and in the absence of cervical reflux.  Keywords: Ewe, Churra Galega Bragançana, artificial insemination                     

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