Corynebacterium pseudotuberculosis é o agente etiológico da linfadenite caseo- sa, uma doença comum dos pequenos ruminantes em todo o mundo que causa pro- cessos piogranulomatosos crónicos em diferentes espécies de animais de produção (Motta et al., 2010). É primariamente uma infeção dos linfonodos periféricos, mas com o tempo pode envolver linfonodos viscerais e órgãos internos. Quando estabe- lecida a doença é de difícil erradicação pois a terapêutica não é efetiva, assim como, a deteção dos animais infetados.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Coelho, Ana Cláudia

Quintas, Helder

Biblioteca Digital do IPB

 Título: Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantes Editor: Álvaro Mendonça Edição: Instituto Politécnico de Bragança · 2012 5300-253 Bragança · Portugal Tel. (+351) 273 303 200 · Fax (+351) 273 325 405 http://www.ipb.pt Design: Serviços de Imagem do Instituto Politécnico de Bragança Tiragem: 2600 exemplares Impressão:	 Escola	Tipográfica	–	Bragança Depósito legal: 350250/12 ISBN: 978-972-745-137-1 Versão digital:  http://hdl.handle.net/10198/7264Colaboração CientíficaProf.	Doutor	Álvaro	Pegado	Mendonça	–	ESA/IPBProf.	Doutora	Ana	Cláudia	Coelho	–	UTADDra.	Ana	Paula	Figueiras	–	DSVRN/DGAVDr.	Duarte	Diz	Lopes	–	ESA/IPB	-	Clinica	Veterinária	SantiagoProf	Doutor	Filipe	Silva	–	UTADDr.	Hélder	Quintas	–	ESA/IPB	-	ACRIGA,	Associação	de	Criadores	de	GadoProf.	Doutora	Isabel	Pires	–	UTADProf.	Doutor	Luís	Cardoso	–	UTADDra.	Madalena	Monteiro	–	LNIV/INRBProf.	Doutor	Miguel	Saraiva	Lima	–	FMV/UTL	LisboaProf.	Doutor	Nuno	Alegria	–	UTADDr.	Raimundo	Maurício	–	ESA/IPBProf.	Doutor	Ramiro	Valentim	–	ESA/IPBProf.	Doutora	Yolanda	Vaz		–	FMV/UTL	LisboaRelatório do ProjectoOTSA (POCTEP) 0108-OTSA-2-E. Observatório Transfronteiriço de Sanidade Animal127Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantesLinfadenite caseosa ou pseudotuberculose em pequenos ruminantesAna Cláudia Coelho 1 e Hélder Quintas 21 ) Laboratório de Microbiologia Médica, Departamento de Ciências Veterinárias, CECAV, Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD).5001-801 Vila Real, Portugal2) Sanidade Animal, Clínica de Grandes Animais. Departamento de Ciência Animal, Escola Superior Agrária do Instituto Politécnico de Bragança.ACRIGA – Associação de Criadores de Gado.IntroduçãoCorynebacterium pseudotuberculosis	é	o	agente	etiológico	da	linfadenite	caseo-sa,	uma	doença	comum	dos	pequenos	ruminantes	em	todo	o	mundo	que	causa	pro-cessos	piogranulomatosos	crónicos	em	diferentes	espécies	de	animais	de	produção	(Motta et al.,	 2010).	 É	 primariamente	uma	 infeção	dos	 linfonodos	periféricos,	mas	com	o	tempo	pode	envolver	linfonodos	viscerais	e	órgãos	internos.	Quando	estabe-lecida	a	doença	é	de	difícil	erradicação	pois	a	terapêutica	não	é	efetiva,	assim	como,	a	deteção	dos	animais	infetados.EtiologiaO	 género	 Corynebacterium pertence ao grupo das bactérias actinomicetas que também inclui outros agentes patogénicos para animais como Nocardia spp., Rhodococcus equi, Mycobacterium spp. e Arcanobacterium pyogenes (Quinn et al.,	1994).	Compartilha	com	estes,	as	características	microbiológicas	a	nível	da	parede	celular,	como	a	espessura,	presença	de	ácidos	micólicos,	ácidos	gordos	saturados	e	insaturados (Belchior et al.,	2006;	Motta	et al.,	2010,).	C. pseudotuberculosis são	bac-térias	intracelulares	facultativas,	Gram-positivas	(Paton	et al.,	2003).	Exibem	formas	pleomórficas,	 desde	 cocobacilos	 a	 bacilos	 filamentosos,	 imóveis,	 desprovidos	 de	esporos,	medindo	entre	0,5-0,6	µm	por	1,0-3,0	µm,	 isolados	ou	agrupados	 irregu-larmente	tipo	paliçada,	decorrentes	da	grande	quantidade	de	lípidos	na	sua	parede	celular,	particularmente,	o	ácido	corinomicólico	 (Quinn	et al.,	 1994;	Costa,	 2002).	São	bactérias	microaerófilos	(5%	de	CO2),	mas	toleram	condições	de	aerofilia	em	cul-tura	(Baird,	1997;	Mckean	et al.,	2007).	Em	termos	fenotípicos	são	microrganismos	catalase	e	urease	positivos,	fermentam	os	hidratos	de	carbono	sem	a	produção	de	gás.	Não	fermentam	a	glucose	(Quinn	et al.,	1994).	Este	agente	encontra-se	associa-do	a	diversos	quadros	clínicos	nos	equídeos	e	nos	ruminantes	domésticos	em	geral,	caracterizadas	pela	formação	de	abcessos	e/ou	linfadenite	(Baird,	1997;	Doherr	et al.,	1998;	Mckean	et al.,	2007).	128Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantesEpidemiologiaOs	agentes	causadores	da	 linfadenite	caseosa	são	cosmopolitas	de	distribuição	mundial	que	se	encontram	predominantemente	no	solo,	na	pele	e	nas	mucosas	dos	ani-mais. Podem manter-se viáveis durante longos períodos no ambiente e em secreções purulentas entre 6 a 12 meses (Motta et al.,	2010).	A	infeção	ocorre	por	contaminação	de	feridas	durante	o	maneio	de	rotina	como	a	tosquia,	castração	e	corte	de	cauda	(Riet--Corrêa	et al.,	2004).	Os	banhos	de	imersão	são	também	considerados	fatores	de	risco	(Radostits	et al.,	2007).	A	contaminação	da	água,	alimentos	e	feridas	é	frequente,	atra-vés das descargas purulentas resultantes das lesões supuradas. Estas também contami-nam	os	utensílios	e	as	alfaias	agrícolas	e	o	material	cirúrgico	usado	pelo	médico	veteri-nário	(Radostits	et al.,	2007).	Os	vetores	como	a	mosca	doméstica,	Stomoxys calcitrans e Culicoides apresentam	pouca	importância	epidemiológica	na	disseminação	do	agente	em	pequenos	ruminantes,	ao	contrário	dos	equinos	(Motta	et al.,	2010).A	transmissão	é	facilitada	pela	presença	de	feridas	na	pele,	mas	a	bactéria	pode	penetrar	através	da	pele	íntegra.	A	transmissão	ocorre	por	contato	direto	com	as	se-creções	infetantes	ou	mediadas	por	fómites	(Radostits	et al.,	2007).	As	portas	de	en-trada	são	diferentes	para	ovinos	e	caprinos,	o	que	explica	a	diferente	localização	ana-tómica	dos	abcessos.	Nos	ovinos,	o	principal	fator	de	risco	na	transmissão	do	agente	é	a	contaminação	da	pele	após	as	tosquias	e	banho	de	imersão	o	que	origina	abcessos	da	pele	em	diferentes	regiões	do	corpo.	Nos	caprinos	observa-se	uma	predominância	de	linfadenomegalia	na	região	da	cabeça	e	do	pescoço	devido	à	alimentação	destes	animais	com	forragens	grosseiras	(Costa,	2002;	Motta	et al.,	2010).A	linfadenite	caseosa	é	uma	das	doenças	infeciosas	com	prevalência	mais	eleva-da	em	países	com	tradição	na	criação	de	ovinos	e	caprinos,	incluindo	Nova	Zelândia,	Espanha,	França,	Austrália,	Suíça	e	Holanda	(Belchior	et al.,	2006).	Esta	 infeção	pode	causar	grandes	prejuízos	aos	produtores,	por	diminuição	da	qualidade	da	pele	e	da	lã,	redução	na	produção	de	carne	e	leite	em	ruminantes,	morte	ocasional	de	animais	com	disseminação	sistémica	do	organismo.	No	caso	dos	equinos	há	redução	da	capacidade	de	exercício	ou	treino	(Beard	et al.,	2004;	Motta	et al.,	2010).PatogeniaA	 infeção	natural	ocorre	por	via	oral,	 respiratória	ou	por	contaminação	de	feri-das.	A	bactéria	é	então	fagocitada	por	neutrófilos	e	macrófagos.	Nos	macrófagos,	as	bactérias	mantém-se	viáveis,	sendo	posteriormente	sequestradas	pelos	linfonodos	re-gionais,	principalmente,	os	pré-crurais,	pré-escapulares	ou	sub-mandibulares	nos	quais	induz	a	formação	de	piogranulomas	múltiplos.	Estes	podem	coalescer	e	formar	grandes	abcessos. Dependendo de vários fatores como a virulência da bactéria e o estado imu-nológico	do	animal,	pode	ocorrer	disseminação	do	agente	dos	linfonodos	para	outros	tecidos.	Também	pode	ocorrer	disseminação	por	via	linfática	para	outros	órgãos	como	o	pulmão,	fígado,	rins	e	encéfalo	(Paton	et al.,	2003;	Pugh,	2004;	Motta	et al.,	2010).Quadro clínico e lesionalA	doença	apresenta	um	período	de	incubação	longo	que	pode	variar	de	2	a	6	se-manas,	tornando	difícil	a	separação	dos	animais	infetados	dos	não	infetados	(Zarraga	129Guia sanitário para criadores de pequenos ruminanteset al.,	2006).	A	 introdução	de	um	animal	 infetado	em	um	rebanho	 leva	ao	apareci-mento	de	abcessos	nos	animais	no	período	de	dois	a	três	anos.	Uma	vez	introduzi-da	a	infeção	num	rebanho,	torna-se	muito	difícil	a	sua	erradicação	(Costa,	2002).	Os	abcessos	externos	(Figura	1)	predominam	nos	linfonodos	mandibulares,	parotídeos,	pré-femorais	ou	pré	escapulares	(Radostits	et al.,	2007),	embora	possam	ocorrer	tam-bém	nos	linfonodos	mesentéricos,	vísceras	abdominais	ou	torácicas	(Figura	2).	No	en-tanto,	são	raramente	encontrados	nos	rins,	coração,	testículos,	útero	e	articulações	(Zarraga et al.,	 2006).	Quando	ocorrem	 lesões	 internas,	 acarretam	perda	de	peso,	deficiência	reprodutiva,	podendo	levar	à	morte	do	animal.	Os	sinais	clínicos	mais	fre-quentes	no	caso	da	presença	de	abcessos	internos	são	a	perda	de	peso	crónica,	redu-ção	da	fertilidade	e	do	número	de	crias,	redução	da	produção	de	leite,	baixo	peso	dos	cordeiros	ao	desmame,	diminuição	da	qualidade	e	quantidade	da	lã.	A	presença	de	abcessos	nos	pulmões	determina	sinais	de	dispneia	crónica	(Williamson,	2001;	Costa,	2002; Belchior et al.,	2006;	Radostits	et al.,	2007).  Figura 1 – Abcessos nos linfonodos mandibulares, pré-femorais e pré escapulares  Figura 2 – Abcessos à necropsia: de notar o aspeto laminado característico do abcesso ao corte do linfonodo.130Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantesOs	abcessos	são	constituídos	por	pus	espesso	de	coloração	branca,	ou	esverde-ada,	com	consistência	pastosa,	que	contém	grande	quantidade	de	bactérias	viáveis	(Belchior et al.,	2006;	Mckean	et al.,	2007).DiagnósticoO	diagnóstico	pode	ser	efetuado	de	várias	formas:	clínico,	anátomo-patológico	e	bacteriológico.	Existem	também	os	métodos	imunológicos,	associados	à	imunidade	celular	e	à	imunidade	humoral.	No	diagnóstico	clínico	deve-se	proceder	à	palpação	dos	 linfonodos	superficiais	que	 estão	 aumentados	 e	 à	 observação	 do	 aspeto	macroscópico	 dos	 exsudados,	 à	presença	de	febre	e	emaciação	(Quinn	et al.,	1994;	Belchior	et al.,	2006).	As	análises	clínicas	revelam	leucocitose	por	neutrofília	e	monocitose,	anemia	hemolítica	do	tipo	macrocítica	normocrómica	(Riet-Corrêa	et al.,	2004;	Radostits	et al.,	2007).	Os	níveis	de	fibrinogénio	podem	estar	aumentados	nos	animais	com	abcessos.	Os	parâmetros	hematológicos	podem	estar	normais	em	animais	com	abcessos	crónicos	(Smith,	2003).O	diagnóstico	definitivo	é	obtido	através	da	cultura	microbiológica	do	agente	a	partir	do	conteúdo	dos	abcessos	obtidos	por	punção	ou	biópsia,	ou	obtidos	post mortem	(Nozaki	et al.,	2000).Na	visualização	do	agente	através	de	microscopia	direta	pelo	método	de	Gram	ou	Giemsa	observam-se	cocobacilos	Gram-positivos,	irregulares	ou	pleomórficos	que	se	assemelham	a	“letras	chinesas”	(Cetinkaya	et al.,	2002;	Zarraga	et al.,	2006).Em	meio	de	agar	sangue	ovino	ou	bovino	(5%)	e	desfibrinado,	as	colónias	de	C. pseudotuberculosis	são	observadas	ao	fim	de	48	horas	de	incubação,	sendo	peque-nas,	brancas	e	de	aspeto	seco	rodeadas	por	um	ténue	halo	de	beta-hemólise.	Para	confirmação	é	 realizado	o	 teste	de	CAMP	 (Costa,	 2002;	Baird	e	 Fontaine,	 2007).	A	prova	de	 redução	de	nitratos	a	nitritos	permite	diferenciar	os	biotipos	em	ovis ou equi, que	apresentam,	respectivamente,	reações	nitrato-negativas	e	nitrato-positivas	(Cetinkaya	et al.,	2002;	Zarraga	et al.,	2006).Existem	outras	técnicas	de	diagnóstico	como	a	citologia	aspirativa	por	agulha	fina.	Esta	apresenta	como	vantagem	o	baixo	custo	e	a	simplicidade	de	execução,	sen-do	considerada	um	método	prático	em	ovinos	e	caprinos	(Ribeiro	et al.,	2001).	Existem	vários	métodos	serológicos	utilizados	no	diagnóstico	como	a	imunoflu-orescência	indireta,	a	imunodifusão	em	gel	de	agar,	a	fixação	de	complemento,	a	téc-nica	de	ELISA	e	hemaglutinação	indireta	(Belchior	e	tal.,	2006;	Baird	e	Fontaine,	2007).	Atualmente	estão	disponíveis	“kits”	de	ELISA,	que	detetam	animais	infetados	entre	os	30	a	60	dias	pós-infeção,	com	especificidade	e	sensibilidade	à	volta	dos	85%	(Valli	e	Parry,	2007).	Os	métodos	serológicos	apresentam	como	principal	desvantagem	os	resultados	falso-positivos,	devido	à	semelhança	antigénica	entre	as	corinebactérias	ou,	em	animais	vacinados	(Cetinkaya	et al.,	2002;	Zarraga	et al.,	2006).As	técnicas	de	biologia	molecular	utilizadas	no	diagnóstico	da	linfadenite	case-osa	são	consideradas	altamente	sensíveis	e	específicas,	embora	apresentem	como	desvantagem	a	necessidade	de	 laboratórios	 especializados	e	 as	 eventuais	 reações	cruzadas com espécies geneticamente relacionadas como C. ulcerans (Belchior et al.,	2006;	Baird	e	Fontaine,	2007).131Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantesControlo e prevençãoIdentificar	os	animais	infetados	e	fazer	a	sua	remoção	rápida	do	rebanho	cons-titui	o	método	mais	eficiente.	A	desinfeção	das	instalações	e	dos	equipamentos	con-taminados	é	indicada	com	desinfetantes	comuns,	como	iodo,	amónia	quaternária	ou	hipoclorito.Deve-se	proceder	a	limpeza	e	desinfeção	de	agulhas,	material	cirúrgico	e	alicates	de	tatuagem.	Recomenda-se	a	limpeza	periódica	e	a	desinfeção	dos	locais	usados	nos	banhos	desparasitantes.	Deve-se	dar	especial	atenção	à	higiene	na	tosquia	e	ao	corte	da cauda. Deve-se manter o material de tosquia e de corte de cascos limpos e livres de contaminações por material infetante. Todos os animais que apresentarem abcessos deverão	ser	isolados	até	que	tenham	seu	diagnóstico	elucidado	(Smith,	2003;	Zarraga	et al.,	2006).A	vacinação	contra	C. pseudotuberculosis	pode	causar	uma	redução	da	doença	entre 60 a 95% (Eggleton et al.,	 1991;	Paton	et al.,	 1995).	Quando	não	existe	vacina	comercialmente	disponível	alguns	autores	defendem	a	utilização	de	autovacinas	por	demonstrarem	igualmente	resultados	satisfatórios	(Winter	e	Clarkson,	2012).TratamentoUm	dos	grandes	problemas	do	tratamento	da	linfadenite	caseosa	é	o	facto	do	agente apresentar sensibilidade in vitro	a	antibióticos	que	não	apresenta	in vivo. Em laboratório	ocorre	sensibilidade	aos	antibióticos	do	grupo	dos	beta-lactâmicos,	ami-noglicosídeos,	fluorquinolonas,	macrolídeos,	tetraciclinas	e	rifampicina	(Costa,	2002;	Senturk	et al.,	2006).	A	falha	no	sucesso	terapêutico,	in vivo	deve-se	provavelmente,	à	dificuldade	do	fármaco	atravessar	a	cápsula	espessa	constituída	por	tecido	conjun-tivo	que	reveste	os	abcessos	e	o	denso	conteúdo	caseoso	presente	no	interior	dos	piogranulomas	(Baird	e	Fontaine,	2007).A	extirpação	cirúrgica	dos	abscessos	e	ou	linfonodos	externos	pode	ser	efetua-da	no	tratamento	de	animais	de	grande	valor	zootécnico.	Outra	opção	é	lancetar	os	nódulos,	com	limpeza	diária	até	a	cicatrização	com	tintura	de	iodo	2	a	5%,	aliado	ao	tratamento	com	antibióticos	até	oito	semanas	(Baird,	2006).	Implicações em saúde públicaA	infeção	humana	por	C. pseudotuberculosis é	rara,	mas	existem	relatos	de	al-guns	casos, principalmente,	em	indivíduos	imunodeprimidos	(House	et al.,	1986;	Be-lchior et al.,	2006). A	infeção	em	humanos,	apresenta	um quadro clínico semelhante ao	encontrado	em	ovinos	e	caprinos,	sendo	a	principal	 fonte	de	 infeção	o	contato	direto com o material purulento proveniente de abcessos caseosos (Mills et al.,	1997;	Belchior et al.,	2006).ReferênciasBaird	GJ	(2006).	Treatment	of	ovine	caseous	lymphadenitis.	Vet	Rec.	159,	500.Baird	GJ	 (1997).	Caseous	 lymphadenitis:	 an	 increasing	cause	 for	 concern.	Vet.	Rec.	140,	611.Baird	 GJ,	 Fontaine	 MC	 (2007).	 Corynebacterium pseudotuberculosis and its role in 132Guia sanitário para criadores de pequenos ruminantesovine	caseous	lymphadenitis.	J.	Comp.	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Linfadenite caseosa ou pseudotuberculose em pequenos ruminantes

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Linfadenite caseosa ou pseudotuberculose em pequenos ruminantes

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