Isolados do fungo entomógeno Beauveria bassiana (Deuteromycetes, Moniliales), provenientes de várias regiões do Brasil, têm demonstrado, através de bioensaios, alta patogenicidade a adultos de Cerotoma arcuata (0livier, 1791), importante praga de feijão (Phaseolus vulgaris) e caupi ( Vigna unguiculata)

DAOUST, R. A.

LORD, J. C.

MAGALHÃES, B. P.

ROBERTS, D. W.

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.. EFEITO DE Beauve r ia bass i ana SOBRE Ce r o t oma a r c uata (OLIVIER , 1791) (COLEOPTERA : CHRYSOMELIDAE ) APÔS EXPOSIÇÃO DE ESPOROS DO FUNGO A TUB~RCULOS DE TAIUIÁ (Ce ra tosan thes hilari ana ) 1 Bonifácio P. Magalhàes2 Richard A. Daoust3 ABSTRACT Jeffrey C. Lord 2•3 Donald W. Roberts 3 Effect of Beauveria bassiana on Ce r otoma a r cuata (Olivier , 1791) (Coleoptera: Chrysomelidae) after exposure of spores to taiuiá tubers (Ce ratosanthes hilar ian~ The effects of exposure to the chrysomelid attracting tuber Ceratosan thes hilariana and bean leaves on the viabili-ty a nd pathogenicity of Bea uveria bassiana were evaluated. Nei ther the bean surface nor slices of the tuber significantly affected the fungus viability or mortality of adult Ce r otoma a rcuata (Olivier , 1791) and subsequent sporulation 9n treated insects i n the laboratory . Recebido em 10/09/86 Pesquisa realizada sob o convênio existente entre a EMBRAPA/CNPAF e o Instituto Boyce Thompson AID/CRSP/TITLE XII . 2 Centro Nacional de Pesquisa de Arroz e Feijão (CNPAF) , EMBRAPA , Caixa Postal 179 , 74000 Goiânia , GO . 3 Boyce Thompson Institute, Cornell University, Tower Road , Ithaca, NY 14853. 328 MAGALHÃES et al~~ l NTROOUÇlíO Iso l ados do fun go entomógeno Beauveria bassiana (Deutero-mycetes , Moniliales) , provenientes de várias regiões do Bra-sil (CONTROLE . .. 1 984) , têm demonstrado , através de bioen-saios , alta patogenicidade a adultos de Ce r otoma arc uata (0-livier , 1791), importante praga de feijão (Ph aseo t u s vutgaris ) e caupi (Vigna u n guicula ta ). A cucurbitácea Ce r ato s ant hes hi l ariana , vulgarmente co-nhecida como taiuiá, possui uma substância chamada cucur bita-cin, com propriedades arrestantes e estimul antes de alimenta çâo de C. arcuata e Diabrotica speciosa (NISHIDA e t al . , 1986). Esta substância está presente também em outras espécies de cu curbitáceas que possuem características atrativas a outras es pécies de crisomelídeos (METCALF et al . , 1980 e METCALF et al . , 1982) . Assim , admite-se que foi devido ao cucurbitacin que tubé rculos de taiuiá tratados com o inseticida metomil evidenciaram grande atratividade a C. a r c uat a e D. s pecio sa (YOKOYAMA et al ., 1982). O taiuiá tem s i do associado também com o fungo 8 . bass i a na (DAOUST et al ., 1 984), de modo que os inse t o s , além de se infectarem, passem também a disseminar o patógeno na área . Neste sentido , foi estudada a es tabilidade de B. bas s iana em taiuiá , d emonstrando - se que fatias do tubérculo dessa p l anta oferecem melhores condições para manutenção da viabilidadedos esporos do fungo que cadáveres de e. a rcu a t a e folhagem de caupi , mantidos e m diferentes ambientes (DAOUST et al . , 1985). Um aspecto importante, mas ainda não esclarecido , possível perda da patogenicidade de 8 . bassiana após t empo de exposição a tubérculos de taiuiá . MATER IAL E METOOOS é a certo A manutenção da patogenicidade de 8 . bass iana , quando as sociado ao taiuiá , foi estudada através de um experimento (re pe tido três vezes) realizado de janeiro a setembro de 1985~ no Centro Naci onal de Arroz e Feij ão (CNPAF ) , em Coiânia , Coiás. Foi utilizado o isolado CP 5 de B . bassiana , originalmen te isolado de C. arcuata , coletado no Estado do Amazonas e a= tualmente mantido na col eção de entomopatógenos do CNPAF . Es-te isolado apresentou a maior patogenicidade a C. arcuata en tre os 11 isolados testados (CONTROLE . . . 1984 ). A multiplica= An. SoQ. En.tomo.l. 8.'!.M.le., 15 (2 ) , 1 986. ção do fungo foi feita em meio de cultura à base de dextrose e ágar . 329 batata, Os esporos de B. bassiana foram expostos a quatro dife-rentes condições (tratamentos): 1) sobre 20 fatias circulares de tubérculos de taiuiá, de 2,5 cm de diâmetro por 0,5 cm de espessura, que foram submersas numa suspensão de 50 ml, con-tendo 2 gramas de esporos, ou seja, cerca de 2 x 1011 espo-ros, mais Tween 80 (0,5%) e, em seguida, fixadas por alfine-tes a um suporte de isopor; 2) sobre 6 plantas de feijão cul-tivadas em vasos de plástico, com cerca de 30 dias de idade, que foram pulverizadas com uma suspensão de cerca de 101 1 es-poros/rol, na base de 1 ml por trifolíolo, por meio de um mi-cropulverizador adaptado a partir de um pincel a ar, marca Paasche, tipo H, com 13 litros de fluxo de ar/minuto , ,de modo a permitir a recuperação de quantidade suficiente de esporos; 3) esporos puros, em põ (apenas nos 2 primeiros experimentos); 4) suspensão contendo 1 g de esporos em forma de pó/50 ml de água+ Tween 80 (0,5%). As fatias de taiuiá e as plantas de feijão foram manti-das em incubadora a 26 ± 10c, durante quatro dias, enquanto os esporos, em forma de pó e em suspensão , foram mantidos em recipientes de vidro, pelo mesmo período , em refrigerador, a 4°c. Os esporos foram recuperados com o auxílio de um becker, com capacidade para 50 ml, contendo 10 ml de água destilada e Tween 80 (0 , 5%), mergulhando-se as fatias de taiuiá na água, e removendo- se os esporos com um pincel . Em cada experimento o material recuperado de 10 fatias, em 10 ml de água , propor cionou uma concentração de 109 esporos/rol . Procedimento seme lhante foi adotado para recuperação dos esporos das folhas (cerca de 1,4 x 109/ ml) , sendo que, para a remoção , ao invés de pincel, foi utilizado um cotonete de algodão. O cotonete permitiu uma recuperação mais eficiente que o pincel, em rela ção ao número de esporos. Após a exposição e recuperação dos esporos, foram fei-tos, para os 4 tratamentos, um teste de viabilidade e uma pa-dronização Ge dosagem para 5 x 108 esporos viáveis/rol. Foi a -dotado o delineamento de tratamentos inteiramente casualiza-dos, com 10 repetições. A parcela constituiu-se de urna placa de Petri, de 9 cm de diâmetro por 2 cm de altura, contendo 5 insetos. O fungo foi pulverizado diretamente numa suspensão de 0,3 ml (cerca de 14.300 esporos/mm 2 ) por grupo de 5 adul-tos de C. arcuata , previamente anestesiados com C0 2 , utilizan do uma torre calibrada para 13 litros de fluxo de ar por minu to. Foi registrado o número de insetos mortos aos 3,6/7 e 9/10 dias após a aplicação dos tratamentos. A confirmação de infecção foi feita através da observação de esporulação exter 330 MAGALHÃES et alii na do fungo em cadáveres mantidos em placas de Petri com pa-pel de filtro umedecido. A análise estatística dos dados de mortalidade de insetos foi feita individualmente por expenmen to, enquanto que com os dados de insetos infectados foi feita uma análise conjunta . As médias de mortalidade foram ajusta-das de acordo com o número de repetições, usando-se o proces-so dos quadrados núnimos (RAY, 1 982) e comparados pelo teste t . As médias de infecção foram comparadas pelo teste de Tukey. RESULTADOS E DISCUSSAO A viabilidade dos esporos de 8 . bassiana praticamentenii> se a l terou (Quadro 1), em função da exposição sob diferent es condições. Nos experimentos 1 e 2, os esporos expostos sobre fatias de taiuiá apresentaram valores superiores aos encontra dos inicialmente antes da exposição, enquanto que sobre fo= lhas de feijão os valores foram mais reduzidos nos ensaios 1 e 3. A causa mais provável deste resultado pode estar relacio nada com a natureza dos componentes químicos da folhagem, que afetariam a viabilidade, muito embora as informações sobre o assunto sejam bastante escassas (ROBERTS & CAMPBELL, 1977). QUADRO 1 - Viabilidade de esporos de Beauve~ia bassi ana antes e apõs exp~ sicão, durante quatro dias, sob diferentes condições. Viabilidade ( 7. ) Condições de exposição Experimento Experimento 2 Experimento 3 Antes da exposição 97 86 99 Após a exposição em Fo l has de feijão 72 91 84 Fatias de tubérculos de taiuiá 99 96 94 Esporos puros em pó 100 98 Esporos puros em suspensão 1 00 94 98 An. Soe.. En.tomol. Blt.0..6.U, 15(2), 1986. 3 31 A comparação das porcentagens médias de mortalidade e infecção (Quadros 2 e 3), cons iderando os diferentes dias de avaliação, demonstra que as diferenças entre os tratamentos, com exceção da testemunha, são minimas. Em quase todos os le-vantamentos, foi constatado que os esporos expostos ao taiuiá provocaram mortalidade e infecção confirmadas, significativa-mente iguais aos esporos em folhas de f e ijão. Inclusive, aos 9/10 dias (último levantamento), a mortalidade e infecção, con firmadas em taiuiã , mantiveram-se significativamente maiores que na testemunha, em que, também, observou-se urna alta morta lidade. Entretanto, este alto indice de mortalidade na teste munha provavelmente não foi relacionado com a doença provoca= da pelo patógeno, mas, s im, com o efeito do stress decorren-te da manipulação e anestesia dos insetos com co,, especial-mente no experimento 3 , onde, mesmo com valores inferiores, a t estemunha não diferiu significativamente dos demais tratamen tos, exceto taiuiá, aos 9/10 dias. Os resultados permitem concluir que a exposição de espo-ros de B. bassiana a tubérculos de taiuiá, nas condições do experimento, não afetou a viabilidade nem a patogenicidade do fungo. Considerando que o fungo, associado ao taiuiá para con trole de e. arcuata , deve ficar exposto no campo, pesquisas sobre sua patogenicidade, nestas condições, são ainda necessá rias. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem ao Dr. José Francisco da Silva tins, pela revisão do texto e sugestões apresentadas, ao Francisco José P. Zimmermann, pela análise estatistica e Técnico de Laboratório Sebastião Martins dos Santos, pela da na condução dos experimentos . Mar-Dr. ao aj~ 332 MAGALHÃES et ~l~~ QUADRO 2 - Morta 1 idade ( % ) de adultos de Cei•ot oma aPcuata tratados com Beauvel'ia bassiana cujos esporos foram expostos durante quatro dias sob diferentes condições. 1 Dias Co ndiçõ e s d e exposição 3 6/7 9 / 1 O EXPERIMENTO Folhas de feijão 2 1 a 44 b 87 a Fatias de tubérculos de taiuiá 24 a 85 a 98 a Esporos puros em pó 34 a 74 ab 94 a Esp0ros puros em suspensão 36 a 85 a 92 a Testemunha o b 4 c 37 b EXPERIMENTO 2 Folhas de feijão 11 a 87 a 96 ab Fatias de tubérculos de taiuiá 7 a 60 a 9 1 ab Esporos puros em po 4 a 63 a 82 b Esporos puros em suspensão 9 a 83 a 100 a Testemunha 2 a 23 b 57 c EXPERIMENTO 3 Folhas de feijão 9 a 7 1 a 96 ah Fatias de tubérculos de taiuiá 14 a 47 a 100 a Esporos puros em suspensão 12 a 6 1 a 96 ab Testemunhas 3 a 35 a 77 b As médias seguidas da mesma letra não diferem significativamente pelo teste de t, ao nível de 5% de probabilidade. ,, An. Soe. fotomol. Bluu..d, 15 (2) , 1986. 333 QUADRO 3 - Infecção (%) confirmada, em adultos de Cerotoma arcuata, causa da por Beauveria bassiana cujos esporos foram expostos duran-=-te quatro dias sob diferentes condições . Condições de exposição Experimentos 1 2 3 Folhas de feijão 1 O a 53 ab 16 a Fatias de tubérculos de taiuiâ 9 a 62 a 12 a Esporos puros em po 7 a 40 b Esporos puros em suspensão 14 a 36 b 12 a Testemunha o b o b o b As médias seguidas da mesma letra não diferem significativamente pelo teste de Tukey, ao nível de 57. de probabilidade. L~TERATURA CITADA CONTROLE microbiológico de pragas. ln: EMPRESA BRASILEIRA DE PESQUISA AGROPECUÂRIA. Centro Nacional de Pesquisas de Ar-roz e Feijão, Goiânia , GO. Re latório Cientifico - Centro Na -cional de Pesquisa de Arro z e Feijão . Goiânia, 1984 . p.354 - 372. -DAOUST, R.A . ; FERNANDES , P .M.; MAGALHÃES, B.P.; YOKOYAMA, M. Pathogenicity of Beauveria bassiana applied to cowpea fo-liage and cucurbitacid tubers, Cayaponia sp., to a dul t Dia br otica speciosa and Cerotoma sp. (Co leoptera, Chrysomeli= dae) in Brazil . ln : SOCIETY FOR INVERTEBRATE PATHOLOGY AN-NUAL MEETING, 17., Davis , California , USA, 1984 . p .40-41. (Abstract ). DAOUST, R.A.; PEREI RA , R.M. i ROBERTS , D.W . The survival of con idia of entomogenous fungi on insect cadavers , cowpea foliage and beetle-attracting tuber s in Brazil . In : SOCIE-TY FOR INVERTEBRATE PATHOLOGY ANNUAL MEETING , 18 . Sault Ste. Marie, Ontario, Canada , 1985 . p. 32 (Abstract ). 334 MAGALHÃES et al~~ METCALF, R.L.; METCALF, R. A.; RHODES, A.M. cucurbitacins as kairomones for diabrotic'.te beetles. Pr o c. natn. Acad. Sei. U. S .A . 77 (7): 3769-377..2, 1980. METCALF, R.L . ; RHODES, A.M.; METCALF, R.A.; FERGUSON, J.; MET CALF, E.R.; PO-YUNG LU. Cucurbitacin contents and disbro= ticite (Coleoptera: Chrysomelidae) feeding upon Cucurbita spp. Envir o n . Ent . 11 (4): 931-937, 1982. NISHIDA, R. ; FUKAN , H. ; TANAKA, Y. ; MAGALHÃES, B. P. ; YOKOYAMA, M. ; BLUMENSCHEIN, A. Isolation of feeding stimulants of Brazilian leaf beetles (Diabr otica speciosa and Cerotoma arcuata ) from the root of Ceratosanthes hiZariana (Mimeo-grafado) . 1986. RAY, A. A., ed. SAS user 's guide ; statistics. Cary, North Ca-rolina, SAS Institute, 1982. 584p . ROBERTS , D.W. & CAMPBELL, A.S. Stability of entomopathogenic fungi. Ent . Soe . Am . Misc . PubL 10 (3): 19-76, 1977. YOKOYAMA, M.; FERREIRA, E.; CARVALHO, J . R.P. de. Combinação de métodos no controle de vaquinhas Diabrotica spe ciosa e Ce r otoma sp . In: REUNIÃO NACIONAL DE PESQUISA DE FEIJÂO , 1~ Goiãnia, Goiás, 1982 . Anais ... Goiânia, EMBRAPA/CNPAF, 1982. p . 269-270 (EMBRAPA-CNPAF. Docwnentos, 1). RESUMO Os e feitos da exposição de esporos de Beauveria bassian~ por um periodo de quatro dias, a tubércul9s de taiuiá (Cerato santhes hiZariana ) e folhas de feijão, foram avaliados com relação à viabilidade dos esporos e à patogenicidade a adul-tos de Cerotoma arcuata (Olivier , 1791). O taiuiá e a folha-gem de feijão não diferiram significativamente quanto à viabi lidade, patogenicidade e subseqüente esporulação do fungo em insetos tratados e mantidos em laboratório. .. 

Efeito de Beauveria bassiana sobre Cerotoma arcuata (Olivier, 1791) (Coleoptera: chrysomelidae) após exposição de esporos do fungo a tubérculos de taiuiá (Ceratosanthes hilariana).

Magalhães, B. P.

Lord, J. C.

Daoust, R. A.

Roberts, Donald W.

DigitalCommons@USU

Efeito De Beauveria Bassiana Sobre Cerotoma Arcuata (Olivier, 1791) (Coleoptera: Chyrsomelidae) Apos Exposicao De Esporos Do Fungo a Tuberculos De Taiuia (Ceratosanthes Hilariana).

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/198101/1/seb-v15.pdf

Efeito de Beauveria bassiana sobre Cerotoma arcuata (Olivier, 1791) (Coleoptera: chrysomelidae) após exposição de esporos do fungo a tubérculos de taiuiá (Ceratosanthes hilariana).

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