Induzione dell'attività degli enzimi di fase I e II nei cheratinociti umani normali.

Abstract

La cute può essere considerata come un effettivo distretto di biotrasformazione di composti chimici. Lo scopo di questo lavoro è stato analizzare l'espressione dei sistemi enzimatici per il metabolismo di fase I e fase II nei cheratinociti umani in proliferazione dopo irradiazione con raggi UVB e dopo esposizione a tre classici induttori: beta-naphthoflavone (BNF), 3-methylcholantrene (MC), phenobarbital (PB). Cheratinociti umani normali sono stati coltivati con fibroblasti 3T3 mitomicinati in Dulbecco's modified Eagle's medium/Ham's F12. A subconfluenza le cellule sono state incubate con gli induttori o irradiate a differenti dosi di UVB. La fase I è stata analizzata con attività 7-ethoxyresorufin O-deethylase (EROD) e 7-pentoxyresorufin O-depenthylase (PROD). la frazione microsomiale è stata studiata mediante analisi western blot. L'attività EROD indotta dall'MC era più alta di 4 volte rispetto al BNF. L'esposizione a raggi UVB risultava dose dipendente (50-75 mJ) e tempo dipendente (6-24h). L'attività della glutatione-S-transferasi(GST), enzima di fase II determinato con cinetica enzimatica, veniva significativamente espressa con UVB e PB. Questi risultati dimostrano il ruolo della cute nel metabolismo esogeno e la possibilità di utilizzare colture di cellule epidermiche per studi farmacotossicologici di agenti topici usati in dermatologia

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