PROPRIETA\u2019 IMMUNOSTIMOLANTI DI PROTECTM IN TROTA IRIDEA (ONCORHYNCHUS MYKISS)

Abstract

L\u2019utilizzo di alimenti funzionali consente di migliorare lo stato di salute dei pesci allevati, incrementare le performance di crescita, salvaguardare la morfologia del tratto gastrointestinale e l\u2019equilibrio della microflora intestinale, aumentare la resistenza alle malattie infettive (Newaj-Fyzu & Austin, 2015). Questo studio \ue8 stato finalizzato ad indagare in vitrogli effetti immunostimolanti del prodotto commerciale ProtecTM(Skretting, Mozzecane VR) sull\u2019attivit\ue0 di \u201cburst respiratorio\u201d e sulla proliferazione dei leucociti di trota iridea (Oncorhynchus mykiss). Lo studio \ue8 preliminare ad una prova in vivoattualmente in corso finalizzata a valutare l\u2019effetto di ProtecTMsulla risposta immunitaria della trota.L\u2019attivit\ue0 di \u201cburst respiratorio\u201d dei leucociti purificati da rene anteriore di trota (60-100 g, n=6) incubati in micropiastra per 90 minuti con ProtecTM(tal quale o sonicato) LPS, zymosan (160 \u3bcg/ml) e PMA (2.5 \u3bcg/ml, controllo positivo) \ue8 stata misurata mediante chemiluminescenza con luminolo. La proliferazione dei leucociti (n=6) incubati per 72 ore con ProtecTM(tal quale o sonicato), LPS, zymosan (160 \u3bcg/ml e 20 \u3bcg/ml) e PHA (20 \u3bcg/ml, controllo positivo) \ue8 stata valutata mediante metodo colorimetrico con MTT (Bulfon et al., 2016). La prova in vivo, condotta presso una troticoltura intensiva del Friuli Venezia Giulia, contempla un gruppo di trote di controllo (peso medio iniziale 5 g) alimentato con mangime commerciale (Optiline HE, Skretting, Mozzecane VR) e un gruppo di trote alimentato per 10 settimane con ProtecTM. Il razionamento verr\ue0 adattato progressivamente alla crescita dei pesci, secondo quanto indicato dalla ditta mangimistica. Al termine del trial, le trote verranno sottoposte a prelievo di sangue e rene anteriore previa anestesia con MS222 (100 mg/l), per la valutazione dell\u2019attivit\ue0 del lisozima nel siero e dell\u2019attivit\ue0 di \u201cburst respiratorio\u201d dei leucociti (Bulfon et al., 2016).I risultati ottenuti in vitrodimostrano che ProtecTM\ue8 in grado di stimolare significativamente l\u2019attivit\ue0 di \u201cburst respiratorio\u201d e la proliferazione dei leucociti di trota iridea (P 640,05). Specificatamente, ProtecTMsonicato induce una risposta di \u201cburst respiratorio\u201d paragonabile a quella prodotta dagli stimoli LPS e zymosan, mentre ProtecTMnon trattato induce una risposta molto maggiore e paragonabile a quella determinata dalla stimolazione delle cellule con PMA usato come controllo positivo. Dall\u2019altro lato, la proliferazione dei leucociti stimolati con ProtecTMsonicato (20 \u3bcg/ml) \ue8 risultata significativamente maggiore rispetto a quella delle cellule di controllo e delle cellule stimolate con zymosan, paragonabile a quella delle cellule stimolate con PHA e LPS. Gli effetti della somministrazione di ProtecTMsulla risposta immunitaria della trota iridea verranno discussi

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