Régénération par embryogénèse somatique en milieu liquide et transformation génétique par biolistique de bananiers di et triploïdes

Abstract

Dans le cadre du programme d'amélioration génétique du bananier du CIRAD, un procédé de transformation génétique au moyen d'un canon à hélium, couplé à un système de régénération par embryogénèse somatique, a été développé. Ce travail a été essentiellement effectué sur le génotype `French Sombre', bananier plantain (AAB). Des suspensions cellulaires ont été établies à partir de cals. Par étalement sur un milieu semi-solide, elles évoluent en embryons somatiques. Une étude histocytologique a permis de comprendre le mode d'entretien de la suspension et l'ontogénèse des embryons somatiques. Dix à quarante pour cent d'entre eux sont convertibles en plantules. Des essais de conformité ont été mis en place au Cameroun. Les conditions optimales pour obtenir l'expression transitoire du gène rapporteur gus dans les cellules de bananier ont été déterminées. Six promoteurs ainsi que différents agents de sélection ont été testés. Les premiers essais de transformation stable ont été réalisés avec un plasmide comportant les gènes gus et bar sous le contrôle de la séquence promotrice de l'ubiquitine du maï