Regeneracao in vitro de tomate industrial visando a transformacao genetica.

Abstract

Investigacoes foram iniciadas no Laboratorio de Biotecnologia da Embrapa-CPATSA visando estabelecer um protocolo para transformacao genetica de algumas variedades nacionais importantes de tomate industrial. Inicialmente, as variedades IPA-5 e IPA-6 foram cultivadas utilizando-se quatro formulas do meio de cultura de tecidos e cinco variacoes de inoculacoes. As gemas com primordios foliares obtidos foram subcultivadas em meio MS (1962) suplementado com 0,5 mg/l de zeatina. Logo apos, os brotos mais desenvolvidos foram transferidos para meio basal modificado de MS, regenerando plantas completas com brotos e raizes que, em seguida, foram aclimatadas em casa-de-vegetacao. Na variedade IPA-5, as frequencias mais altas de inducao de regeneracao variaram entre 76% e 100%. No caso da IPA-6 obteve-se frequencias entre 52,6% e 75%. Com base nesta metodologia, estabeleceu-se a tecnica para transformacao genetica via vetor Agrobacterium tumefaciens pGS-gluc1, atraves dos genes reporter GUS e o marcador de selecao NPT-II, obtendo-se tambem resultados significativos com genes que conferem resistencia contra insetos

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