BALDO, G. R.

GIOLO, S. R.

OLIVEIRA, M. C. N. de

SOSA-GOMEZ, D. R.

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VIII CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA | Goiânia, GO | Junho 2018 192INFLUÊNCIA DOS TECIDOS FOLIARES DE ALGODÃO E SOJA NA MORTALIDADE DE Chrysodeixis includens PELO ChinNPV BALDO, G.R.1; OLIVEIRA, M.C.N. de2; GIOLO, S.R.3; SOSA-GÓMEZ, D.R.21Universidade Estadual de Ponta Grossa - UEPG, Ponta Grossa, PR, gizelebaldo@yahoo.com.br; 2Embrapa Soja; 3Universidade Federal do Paraná. Chrysodeixis includens é uma praga polífaga considerada de grande importância econômica devido seu elevado potencial desfolhador, com destaque para as culturas de soja e algodão onde pode comprometer significativamente sua produtividade (Busoli et al., 2011). Usados como alternativa aos produtos químicos que controlam larvas de lepidópteros, os vírus de poliedrose nuclear são caracterizados pela sua especificidade e alta virulência (Mudgal et al., 2013). No entanto, alguns fatores ambientais ou relativos à interação inseto-vírus-planta, podem influenciar sua eficiência. Diferentes estudos indicam que a planta hospedeira pode contribuir não apenas na redução da atividade do baculovírus, seja através da constituição química de suas folhas ou por alterações promovidas no intestino da lagarta, como também na redução da persistência dos baculovírus no ambiente e sua disseminação em uma população de insetos (Ali et al., 1998, Stevenson et al., 2010, Sosa-Gómez, 2012). Dessa forma, buscou-se avaliar a possível interferência das folhas de soja e algodão na atividade viral do ChinNPV, utilizado no controle da lagarta C. includensAs lagartas de C. includens, oriundas do laboratório de Entomologia da Embrapa Soja, foram criadas em dieta artificial de Greene et al. (1976). O isolado do vírus utilizado, ChinNPV (Isolado CNPSo-VPN168), se encontra armazenado na coleção de entomopatógenos da Embrapa Soja. As plantas hospedeiras da lagarta Chrysodeixis includens (soja – BRS 360 RR e algodão – FMT 701) foram cultivadas em casa de vegetação e utilizadas 30 dias após a semeadura.  Folhas de algodão e soja foram cortadas em discos de 6 mm de diâmetro e colocadas em bandejas com 32 células, com o fundo contendo ágar 2% solidificado. Em seguida 2 µL de uma suspensão de vírus contendo 2,5 x 103 CO e 0,01% de Tween 80 foi distribuída sobre os discos. Larvas de terceiro ínstar foram então colocadas em cada uma das células e mantidas por até 48h, ou até consumirem pelo menos 80% do tecido vegetal. Às larvas que consumiram o disco foram transferidas para novas bandejas, contendo folha da respectiva cultura hospedeira, que foram substituídas em dias alternados. Os controles consistiram em um grupo de lagartas tratadas da mesma maneira, mas não inoculadas. Além destes, discos de dieta de aproximadamente 4 mm de diâmetro e 2 mm de espessura foram utilizados como controle positivo e negativo e tratados de forma semelhante, resultando num total de seis tratamentos (T1 = dieta artificial; T2 = folha de algodão; T3 = folha de soja; T4 = dieta + ChinNPV; T5 = folha de algodão + ChinNPV; T6 = folha de soja + ChinNPV). Os bioensaios foram mantidos em condições controladas de temperatura (26ºC), fotofase: escotofase (14h:10h) e umidade (75±10% UR). O experimento foi repetido cinco vezes e os insetos foram observados diariamente durante 10 dias.  O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com arranjo fatorial entre os seis tratamentos, as 32 subamostras e as cinco repetições. Os dados de mortalidade foram avaliados sob a abordagem não paramétrica na Análise de Sobrevivência por Riscos Competitivos (Pintilie, 2006) que considerou morte por vírus e morte por causas desconhecidas. As curvas de proporção acumulada do risco de morte foram comparadas pelo teste de Gray (1988). O software R (R Core Team, 2014) foi utilizado para a análise de sobrevivência e comparação das curvas pelo teste de Gray. Ao avaliar os efeitos dos tratamentos na mortalidade por vírus, observou-se que as curvas de incidência acumulada foram semelhantes entre dieta artificial + ChinNPV 55Sessão de Entomologia 193(T4) e folha de soja + ChinNPV (T6) e que ambas favoreceram infecções significativamente superiores ao tratamento com folha de algodão + ChinNPV (T5) (Figura 1). Lagartas alimentadas com dieta artificial e inoculadas com vírus apresentaram 65% de mortalidade, enquanto as que foram mantidas em folhas de soja e algodão tiveram mortalidade de 69,4% e 46,7%, respectivamente. A redução média na morte de larvas quando o vírus foi inoculado junto com a folha de algodão foi de 30,5% em comparação à dieta artificial e ao disco do folíolo de soja com o vírus. Os resultados observados deste trabalho corroboram com o verificado por Young e Yearian (1974) em bioensaios com discos de folha, utilizando o vírus referido como Heliothis NPV, onde foi observado que em folhas de algodão o baculovírus foi inativado mais rapidamente do que em folhas de tomate ou de soja e esse fato foi atribuido à diferença de pH das folhas. Além disso, compostos como tanino, foram indicados como possíveis responsáveis pela redução da suscetibilidade viral de baculovírus de Helicoverpa zea em algodão (Young et al., 1995), podendo eles se ligarem às proteínas dos vírus formando agregados que impedem a liberação dos occlusion derived virions (ODV) (Felton et al., 1987). Já Hoover e colaboradores (1998) verificaram que a inibição da doença promovida pelo baculovírus devido à aplicação de tanino condensado, pode ser o resultado não da precipitação do vírus, mas da geração de radicais livres que, durante o processo de digestão do substrato foliar, podem estimular o aumento de protusões citoplasmáticas das células infectadas no intestino médio das lagartas, reduzindo a infecção, ou ainda, podem danificar diretamente os corpos de oclusão (Hoover et al., 2000, Cory; Hoover, 2006).A mortalidade por causa desconhecida, por sua vez, foi semelhante entre todos os tratamentos quando as funções de incidência acumulada foram comparadas pelo teste de Gray, apresentando média de 19,2% ao final de dez dias de avaliação. A capacidade das plantas hospedeiras em influenciar a atividade dos vírus de poliedrose nuclear é complexa, e cada planta atuou de forma diferente na suscetibilidade à doença. Enquanto discos do tecido foliar de soja não influenciaram a atividade do ChinNPV, quando o tecido foliar de algodão foi fornecido no momento da inoculação com o vírus, a mortalidade das lagartas foi menor que naquelas alimentadas com dieta artificial ou com tecido foliar de soja, indicando que os tecidos de algodão reduzem o processo de infecção pelo vírus. Estes resultados indicariam a necessidade de desenvolver formulações que preservem a ação do vírus ou incrementos de doses para aumentar as possibilidades de infecção e compensar a perda de atividade provocada pelos tecidos de algodão. Referências ALI, M. I.; FELTON, G. W.; MEADE, T.; YOUNG, S. Y. Influence of interspecific and intraspecific host plant variation on the susceptibility of Heliothines to a baculovirus. Biological Control, v. 12, p. 42-49, 1998. BUSOLI, A. C.; GRIGOLLI, J. F. J.; FRAGA, D. F.; SOUZA, L. A.; FUNICHELLO, M.; NAIS, J.; SILVA, E. A. Atualidades no MIP algodão no cerrado brasileiro. In: BUSOLI, A. C.; FRAGA, D. F.; SANTOS, L. C.; ALENCAR, J. R. C. C.; GRIGOLLI, J. F. J.; JANINI, J. C.; SOUZA, L. A.; VIANA, M. V.; FUNICHELLO, M. (Eds.). Tópicos em Entomologia Agrícola IV. Jaboticabal: Multipress, 2011, p. 117-138. CORY, J. S.; HOOVER, K. Plant-mediated effects in insect-pathogen interations. Trends in ecology and evolution, v. 21, n. 5, p. 278-286, 2006. FELTON, G. W.; DUFFEY, S. S.; VAIL, P. V.; KAYA, H. K.; MANNING, J. Interaction of nuclear polyhedrosis virus with catechols: Potential incompatibility for host-plant resistance against noctuid larvae. Journal of Chemical Ecology, v. 13, p. 947-957, 1987. GRAY, R. J. A class of K-sample tests for comparing the cumulative incidence of a competing risk. Annals of Statistics, v. 16, p. 1141-1154, 1988. VIII CONGRESSO BRASILEIRO DE SOJA | Goiânia, GO | Junho 2018 194GREENE, G. L.; LEPLA, N. C.; DICKERSON, W. A. Velvetbean caterpillar: a rearing procedure and artificial medium. Journal of Economic Entomology, v.69, n.4, p.488-497, 1976. HOOVER, K.; KISHIDA, K. T.; DIGIORGIO, L. A.; WORKMAN, J.; ALANIZ, S. A.; HAMMOCK, B. D.; DUFFEY, S. S. Inhibition of baculoviral disease by plant-mediated peroxidase activity and free radical generation. Journal of Chemical Ecology, v.24, p.1949-2001, 1998. HOOVER, K.; WASHBURN, J. O.; VOLKMAN, L. E. Midgut-based resistance of Heliothis virescens to baculovirus infection mediated by phytochemicals in cotton. Journal of Insect Physiology, v. 46, p.999-1007, 2000. MUDGAL, S.; DE TONI, A.; TOSTIVINT, C.; HOKKANEN, H.; CHANDLER, D. Scientific support, literature review and data collection and analysis for risk assessment on microbial organisms used as active substance in plant protection products. Environmental Risk Characterization. EFSA Supporting Publications. p. 149, 2013. PINTILIE, M. Competing risks: a practical perspective. Chichester: Wiley, 2006. 240 p. R CORE TEAM. R: A language and environment for statistical computing. Vienna, Austria: R Foundation for Statistical Computing, 2014. Disponível em: <http://www.R-project.org/>. Acesso em: 20 abr.. 2018. SOSA-GÓMEZ, D. R. Implications of plant hosts and insect nutrition on entomopathogenic diseases. In: PANIZZI, A. R.; PARRA, J. R. P. (Eds.). Insect bioecology and nutrition for integrated pest management. Boca Raton: CRCPress, 2012, p. 195-209. STEVENSON, P. C.; D’CUNHA, R. F.; GRZYWACZ, D. Inactivation of Baculovirus by isoflavonoids on chickpea (Cicer  arietinum) leaf surfaces reduce the efficacy of Nucleopolyhedrovirus against Helicoverpa armigera. Journal of Chemical Ecology, v. 36, p. 227-235, 2010. YOUNG, S. Y.; YANG, J. G.; FELTON, G. W. Inhibitory effects of dietary tannins on the infectivity of a nuclear polyhedrosis virus to Helicoverpa zea (Noctuidae: Lepidoptera). Biological Control,v.5, p.145-150, 1995. YOUNG, S. Y.; YEARIAN, W. C. Persistence of Heliothis NPV on foliage of cotton, soybean, and tomato. Environmental Entomology, v. 3, n. 2, p. 253-255, 1974. Figura 1. Funções de incidência acumulada [Fk(t)] para as causas 1 (morte por vírus) e 2 (morte por causa desconhecida) para o bioensaio pelo método do disco de folha. T1 = Dieta artificial; T2 = folha de algodão; T3 = folha de soja; T4 = dieta + ChinNPV; T5 = folha de algodão + ChinNPV; T6 = Folha de soja + ChinNPV. 

Influência dos tecidos foliares de algodão e soja na mortalidade de Chrysodeixis includens pelo CHINNPV.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/1092978/1/Influenciadostecidosp.192194.pdf

Influência dos tecidos foliares de algodão e soja na mortalidade de Chrysodeixis includens pelo CHINNPV.

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