A utilização de Bacillus spp. para a promoção de crescimento e para o biocontrole de doenças de plantas é uma ferramenta adequada para a sustentabilidade agrícola. Porém existem muitas lacunas neste conhecimento que precisam ser esclarecidas. A promoção de crescimento e a proteção contra Thielaviopsis paradoxa em cana-de-açúcar estão entre os estudos que necessitam ser realizados. O trabalho teve como objetivo a identificação de cepas de Bacillus spp. para os fins anteriormente relacionados. Testes bioquímicos e de inibição de crescimento micelial foram realizados com 60 cepas de Bacillus spp., provenientes de uma coleção depositada na Embrapa Meio Ambiente. Testes de produção de HCN, de ácido indolacético (AIA) e de sideróforos (S), solubilização de fósforo (P), assimilação de nitrogênio (N) e catalase (Ct) relacionados à promoção de crescimento; e pareamento direto in vitro para avaliar a inibição de T. paradoxa foram realizados. Os isolados AP-12 e AP-165 obtiveram valores positivos para os testes HCN, S, P e N. E os isolados AP-106, AP-115 e AP-512 inibiram totalmente o patógeno. Isolados de Bacillus spp. com resultados positivos aos testes citados acima serão utilizados nos estudos in vivo em cana-de-açúcar para tratamento de toletes visando ao controle da podridão abacaxi e a promoção de crescimento