CONCEIÇAO, R. R. P. da

CORREIA, V. T. da V.

EL-CORAB NETO, J. I.

QUEIROZ, V. A. V.

SOUSA, A. P. de

Portuguese

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   Incidência de fumonisinas totais em milho armazenado em paióis de produtores rurais da Região Central de Minas Gerais.   José Ibrahim El- Corab Neto(1); Renata Regina Pereira da Conceição(2); Valéria Aparecida Vieira Queiroz(3); Vinícius Tadeu da Veiga Correia(1); Aline Pereira de Sousa(4);  (1) Estudante de Engenharia de Alimentos/ Estagiário Embrapa Milho e Sorgo; Universidade Federal de São João del-Rei Campus Sete Lagoas; Sete Lagoas; Minas Gerais; ielcorab@gmail.com; viniciustadeu18@hotmail.com; (2) Pós-graduada em Produção Vegetal/Universidade Estadual do Norte Fluminenese Darcy Ribeiro; renataponts@gmail.com; (3) Pesquisadora; Embrapa Milho e Sorgo; valeria.vieira@embrapa.br; (4) Estudante de Engenharia de Alimentos/Bolsista CNPq-PIBIC; UFSJ; liny-p-souza@hotmail.com.  RESUMO: O milho é um cereal de grande importância para a alimentação humana e animal. Porém, o cereal é alvo dos ataques de fungos toxigênicos produtores de micotoxinas. Dentre elas, as fumonisinas são as que provocam maiores danos a saúde. O objetivo do trabalho foi avaliar a incidência de fungos e de fumonisinas totais em grãos de milho armazenados em propriedades familiares da Região Central de Minas Gerais. Foram coletadas 100 espigas de milho nos quatros cantos do paiol, em três épocas distintas de coleta, as espigas foram separadas entre mal e bem empalhadas e debulhadas. Os grãos foram secos em estufa a 65 ºC e moídos. Para detecção das fumonisinas seguiu-se o método por purificação em colunas de imunoafinidade FumoniTest®, e os teores foram determinados em fluorímetro. Houve 100% de incidência do fungo do gênero Fusarium nas amostras analisadas. Foram detectadas fumonisinas em todas as amostras com níveis variando entre 530 e 6950 µg kg-1. Seis amostras (12,5%) apresentaram teores dessa micotoxina acima do recomendado, pela ANVISA para milho não processado. Entretanto, 46% das amostras estavam acima do limite de 2500 µg kg-1 estabelecido para milho na forma de fubá, podendo comprometer a saúde dos consumidores.  Termos de indexação: Micotoxinas; ZeamaysL.; FumoniTest.  INTRODUÇÃO  O milho é suscetível ao ataque de fungos toxigênicos, tanto na pré quanto na pós-colheita (Duarte et al., 2009). A contaminação da espiga por fungos pode ser proporcionada pelo armazenamento inadequado, pelo clima, pelo mau empalhamento e/ou por injúrias causadas por insetos (Hermanns et al., 2006; Duarte et al., 2009). Alguns gêneros de fungos podem produzir micotoxinas, o que pode causar graves problemas à saúde humana e animal e gerar prejuízos econômicos (Marques et al., 2009). As micotoxinas são produzidas, principalmente, pelas espécies do gênero Penicillium, Fusarium, e Aspergillus (Nascimento et al., 2012). O principal gênero produtor de fumonisinas é o Fusarium, fungo predominante do campo.  Diversos problemas de saúde em humanos e animais podem ser relacionados ao consumo de produtos que estejam contaminados por fumonisina, como câncer de esôfago em humanos, edemas pulmonares em suínos, e leucoencefalomalácia em equinos (Jay, 2005). A prática do armazenamento do milho em espigas é feita principalmente por agricultores familiares, em pequenos paióis (Santos, 2006). Entretanto, de um modo geral, as condições desses paióis são bastante precárias o que tende a aumentar a incidência de insetos e fungos. Assim, o monitoramento constante dos níveis de contaminação do milho armazenado em paióis é importante para se avaliar o risco a que esses produtores estão sendo expostos. Conceição et al. (2014) detectaram fumonisinas em todas as 23 amostras de milho coletadas em paióis no ano de 2013, com níveis variando de 30 a 4650 µg kg-1. Dessa forma, dando continuidade ao trabalho de Conceição et al. (2014), o presente trabalho tem como objetivo avaliar a incidência de fungos e de fumonisinas totais em amostras de milho coletadas em paióis de produtores familiares da Região Central de Minas Gerais, no ano de 2015.    MATERIAL E MÉTODOS  As amostras de milho em espiga foram coletadas em oito propriedades familiares da região Central de Minas Gerais, com o apoio de técnicos da EMATER – MG. As coletas foram realizadas em três períodos, ao longo do armazenamento (Junho, Agosto e Outubro). Para detecção e quantificação das fumonisinas totais foram retiradas duas amostras de cada paiol, seguindo-se o procedimento: 1- Foi retirado ao acaso, dos quatro cantos e do centro do paiol um saco com 100 espigas. 2- As espigas foram separadas em duas condições: bem (BE) e mal empalhadas (ME). 3- As espigas de ambos os tipos foram debulhadas e os grãos homogeneizados manualmente. 4- Duas amostras de 1kg foram coletadas (BE e ME).  Para homogeneização do teor de água as amostras foram colocadas em estufa a 65°C, até peso constante, e após o resfriamento, foram moídas em moinho marca Trapp– modelo TRF 90.  As fumonisinas totais foram extraídas em solução metanol: água (80/20) e purificadas em colunas de imunoafinidade FumoniTest®, de acordo com a metodologia recomendada pela VICAM. A quantificação dos teores dessa micotoxina foi feita em Fluorímetro (VICAM) série 4. Os testes de patologia dos grãos foram realizados empregando-se o método do papel de filtro com congelamento segundo Pinto (2007) em 100 grãos sadios de cada amostra. A identificação dos fungos associados aos grãos foi realizada com o auxílio de microscópio estereoscópico e microscópio binocular.  Delineamento e análise estatística Os resultados foram avaliados por análise de variância e as médias comparadas pelo Teste de Tukey em nível de 5% de probabilidade.  RESULTADOS E DISCUSSÃO  Houve interação significativa entre a época de coleta, local e condições das espigas (BE e ME) (Tabela 1). Observou-se contaminação de fumonisinas totais em 100% das amostras analisadas, com níveis variando entre 530 e 6950 µg kg-1. Observou-se que 6 (12,5%) das 48 amostras estavam  acima do limite de 5000 µg kg -1 estabelecido pela ANVISA para milho não processado (Brasil, 2011). Porém, para milho na forma de fubá o limite estabelecido pela ANVISA é de 2500 µg kg-1, dessa forma, 22 amostras (46%) se encontravam acima desse limite. Esses, resultados são preocupantes, visto que os produtores familiares processam e consomem esse milho por eles  produzidos na forma de fubá, o que poderá comprometer sua saúde e de sua família.  As espigas bem empalhadas apresentaram níveis de contaminação entre 530 e 5850 µg kg-1, já as mal empalhadas variaram de 885 a 6950 µg kg-1. As espigas mal empalhadas apresentaram maiores valores quando comparadas com as bem empalhadas nas propriedades ESMERALDAS 01 e MATOZINHOS 01 (1ª Coleta), PEDRO LEOPOLDO 01 e ESMERALDAS 01 (2ª coleta) e INHAÚMA 01, JEQUITIBÁ 01, SETE LAGOAS 01, SETE LAGOAS 02 e ESMERALDAS 01 (3ª coleta), totalizando 37,5% das amostras. Porém, nas propriedades INHAÚMA 01 (1ª coleta), JEQUITIBÁ 01 e SETE LAGOAS 02 (2ª coleta) as amostras bem empalhadas apresentaram maiores níveis de contaminação quando comparadas com as mal empalhadas. Segundo Pimentel et al. (2011), separar as espigas levando em consideração o empalhamento, consumindo primeiramente as espigas mal empalhadas e armazenando as espigas bem empalhadas é uma técnica eficiente que ajuda a reduzir a contaminação por carunchos, contribuindo para diminuição da contaminação por fungos no processo de armazenamento do milho em espigas em propriedades de cultivo familiar. Além disso, de acordo com Duarte et al. (2009), o mau empalhamento favorece a contaminação das espigas por fungos patogênicos. Esses dados confirmam a alta incidência e o elevado nível de fumonisinas encontrados nas espigas mal empalhadas. Verificou-se aumento significativo na contaminação por fumonisinas totais em função do tempo de armazenamento das amostras (época de colheita) nas propriedades INHAÚMA 01, JEQUITIBÁ 01, ESMERALDAS 01 e MATOZINHOS 02, redução na PEDRO LEOPOLDO 01 e manutenção na SETE LAGOAS 01, SETE LAGOAS 02 e MATOZINHOS 01. A fumonisina é um tipo de micotoxina de campo, por isso, a contaminação dos grãos pode ter ocorrido antes do armazenamento, condições inadequadas de armazenamento podem ter influenciado no aumento de contaminação dos grãos pelo fungo produtor da micotoxina. Conceição et al. (2014) analisaram 23 amostras de milho, provenientes de coletas realizadas em 2013, em diferentes propriedades familiares e verificou que todas as amostras se encontravam contaminadas com fumonisinas, esses dados corroboram com os apresentados quanto à incidência dessa micotoxina, que obteve 100% de contaminação, comprovando que a fumonisina é uma das micotoxinas de maior ocorrência em milho. Outro resultado que comprovou a alta ocorrência de fumonisinasem milho armazenado em propriedades familiares foi apresentado por Queiroz et al. (2012) com valores variando de 230 a 6450 µg kg-1, similares aos encontrados no presente estudo (530 a 6950 µg kg-1).  O elevado grau de contaminação por fumonisinas também pode estar relacionado à alta incidência de fungos do gênero Fusarium encontrados nas amostras. De acordo com as análises de identificação de fungos, espécies do gênero Fusarium foram as que mais acometeram os grãos de milho, sendo encontradas em todas as amostras com incidência de até 93% (Tabela 2). Abreu et al. (2013) fizeram análise em três cultivares de milho do município de Sete Lagoas - MG, em diferentes épocas de colheita, e encontraram níveis elevados de Fusariumem todas as amostras analisadas, com variação entre 30,7% e 100%.  Uma possível explicação para o alto índice de Fusarium nos grãos é que um microrganismo com uma maior resistência ao substrato ou em maior quantidade tem vantagem sobre os outros, por isso, os fungos apresentam um antagonismo passivo em que o crescimento é impedido pela disputa de espaço e nutrientes fundamentais para seu desenvolvimento. Por isso, o Fusarium é um competidor mais forte quando comparado ao Aspergillus (Motta et al., 2015).  CONCLUSÕES  Houve 100% de incidência do fungo do gênero Fusarium nas amostras analisadas. Detectou-se fumonisinas em 100% das amostras com algumas superando o limite máximo estabelecido pela legislação brasileira, podendo comprometer a saúde humana e animal. Assim, necessária a continuidade de estudos nessa área, visto que, essa micotoxina ocorre amplamente nos grãos de milho e pode causar grandes prejuízos na economia e na saúde.  AGRADECIMENTOS  Embrapa Milho e Sorgo; FAPEMIG e CNPq.    REFERÊNCIAS  ABREU, M. I. A; COSTA, R. V., COTA, L. V., SILVA, D. D. Atraso na colheita e incidência de grãos ardidos em cultivares de milho. 2013. Disponível em:<http://www.alice.cnptia.embrapa.br/bitstream/doc/962012/1/Atrasocolheita.pdf> Acesso em 29/06/2016.  BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária - ANVISA. Resolução n° 7, de 2011. Dispõe sobre limites máximos tolerados (LMT) para micotoxinas em alimentos. Diário Oficial da República Federativa do Brasil, Brasília, DF, Seção1, p.66, 18 fev. 2011.  CONCEICAO, R. R. P. ; QUEIROZ, V. A. V.; MIGUEL, R.  A.; PEREIRA, G. M. 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Médias   INHAÚMA 01 2250 4750* 3500 Ba 4250 4600 4425 Aba 6900* 2850 4875 Aa 4267 a PEDRO LEOPOLDO 01 3650 2700 3175 Aa 5150* 1800 3480 Aa 1550 1550 1550 Bd 2735 cd JEQUITIBÁ 01 940 875 908 Bc 1250 5400* 3325 Aa 4950* 850 2900 Abc 2378 cd SETE LAGOAS 01 3150 2250 2700 Aab 2300 1500 1900 Ab 4950* 855 2903 Abc 2500 cd SETE LAGOAS 02 2350 2850 2600 Bab 2250 5850* 4050 Aa 3600* 1650 2625 Bbcd 3092 bc ESMERALDAS 01 3950* 1750 2850 Bab 5950* 1850 3900 Aa 6950* 2600 4775 Aa 3842 ab MATOZINHOS 01 3000* 530 1765 Abc 885 980 933 Ab 1840 1400 1620 Acd 1439 e MATOZINHOS 02 1350 1010 1180 Bc 1850 1450 1650 Bb 3400* 4100 3750 Aab 2193 de Médias Totais     2335 B     2957 A     3125 A      Valores seguidos de * na linha são diferentes dos valores dentro da mesma coleta. Valores seguidos da mesma letra maiúscula na linha ou minúscula na coluna não diferem entre si em nível de 5% de probabilidade pelo teste de Tukey. Tabela 2 – Prevalência de fungos patogênicos em grãos sadios de milho coletados em paióis de propriedades familiares (%). Propriedades Coleta Fusarium spp. Penicillium spp. Stenocarpella spp. Aspergillus spp. 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 INHAÚMA 01 85 88 91 4 3 2 0 0 0 0 0 0 PEDRO LEOPOLDO 01 81 83 82 5 13 3 0 0 0 0 0 2 JEQUITIBÁ 01 88 92 83 6 5 10 0 0 0 0 0 0 SETE LAGOAS 01 68 85 86 12 9 8 0 0 0 0 0 0 SETE LAGOAS 02 93 91 91 3 4 4 0 0 0 0 0 1 ESMERALDAS 01 61 68 85 45 41 13 0 0 0 0 0 0 MATOZINHOS 01 84 84 62 12 11 11 0 0 0 0 0 0 MATOZINHOS 02 75 79 70 12 11 11 0 0 0 0 0 0  

Incidência de fumonisinas totais em milho armazenado em paióis de produtores rurais da região Central de Minas Gerais.

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