Ferreira, Idalina

Gargaté, Maria João

Martins, Susana

Reis, Tânia

Vilares, Anabela

Repositório Científico do Instituto Nacional de Saúde

23artigos breves_   n. 620142ª sérieespecial 3número:Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IPDoutor Ricardo JorgeNacional de Saúde_Instituto Observações_ Boletim Epidemiológicowww.insa.pt_IntroduçãoA leishmaniase é uma doença infeciosa causada por um varia-do número de espécies de um protozoário parasita pertencente ao género Leishmania. A transmissão é assegurada quando uma fêmea de diferentes espécies de Phlebotomus (Velho mundo) ou Lutzomyia (Novo mundo) efetua a sua refeição de sangue num indivíduo. O contágio inter-humano é possível mas raro, poden-do ocorrer por transfusões de sangue, partilha de seringas e transmissão materno fetal (1). O cão é o principal reservatório e também o principal hospedeiro deste parasita. O género Leish-mania inclui aproximadamente 30 espécies, a maioria das quais infeta o Homem originando quatro apresentações clinicas di-ferentes: leishmaniase visceral (LV) ou síndrome de kala-azar (a forma mais severa da doença), leishmaniase cutânea (LC) (a forma mais comum da doença), leishmaniase cutânea difusa e leishmaniase mucocutânea.A nível mundial, estima-se que ocorram 1,3 milhões de novos casos e 20.000 a 30.000 mortes por ano provocados por esta pa-rasitose. Relativamente à forma mais grave da doença (LV) esti-ma-se que surjam entre 0,2 e 0,4 milhões de novos casos por ano em todo o mundo (1). Nos anos 80, esta apresentação clínica de LV assumiu grande importância devido à pandemia VIH/SIDA, atin-gindo mais de 35% do total de doentes infetados, tornando-se, à data, a terceira doença parasitária oportunista mais frequente da infeção VIH/SIDA, a seguir à toxoplasmose e à criptosporidiose (2). Em Portugal, a leishmaniase é endémica, causada pela espécie L. infantum, sendo a apresentação clínica predominante, a leishma-niase visceral. A leishmaniase cutânea é rara em Portugal, e os úl-timos registos, datados dos anos 40, ocorreram nas bacias hidro-gráficas dos rios Douro, Tejo e Sado (3).O diagnóstico laboratorial realizado no INSA pode ser efetuado pela identificação direta das formas amastigotas em esfregaços de sangue ou tecidos normalmente aspirados esplénicos, biópsias hepáticas ou punções medulares, após coloração de Giemsa ou hematoxilina–eosina; pelo isolamento e identificação das formas promastigotas em culturas a 27 °C em meio NNN ou Scheneider’s drosophila a partir de punções medulares e sangues periféricos; por testes imunológicos (IFI, ELISA, Immunoblot), que não deverão ser utilizados no caso de crianças e de doentes imunocomprome-tidos, que apresentam baixos títulos de anticorpos e, por isso, não é possível distinguir uma infeção ativa de uma infeção antiga. Por último, as técnicas de biologia molecular a partir de sangue perifé-rico ou tecidos, possuem uma elevada sensibilidade e especifici-dade e permitem identificar rapidamente uma infeção ativa._ObjetivoEste estudo tem como objetivo descrever as características demo-gráficas de doentes com quadro clínico suspeito de leishmaniase, cujo diagnóstico laboratorial foi confirmado no Laboratório Nacional de Referência de Infeções Parasitárias e Fúngicas do Instituto Na-cional de Saúde Doutor Ricardo Jorge (INSA) entre janeiro de 2008 e dezembro de 2013._Material e métodosFoi efetuada a análise retrospetiva dos resultados laboratoriais de todos os casos com suspeita clínica de leishmaniase, que recorre-ram ao INSA para confirmação ou exclusão do diagnóstico, entre janeiro de 2008 e dezembro de 2013. Para o diagnóstico laboratorial da infeção por Leishmania foram uti-lizadas métodos serológicos (ELISA (RBioPharma), IFI (Biomerieux), Immunoblot (Ldbio Iberlab)) e o método molecular nested PCR para amplificação da região variável do gene codificante SSUrRNA, adap-tado e modificado de Cruz L. et al (4). Para a análise descritiva dos dados demográficos dos casos confirmados, recorreu-se ao cálculo de frequências absolutas e relativas._Leishmaniase: confirmação laboratorial de casos clínicos suspeitos de infeção entre 2008 e 2013  Susana Martins, Anabela Vilares, Idalina Ferreira, Tânia Reis, Maria João Gargatém.joao.gargate@insa.min-saude.pt Laboratório Nacional de Referência de Infeções Parasitárias e Fúngicas. Departamento de Doenças Infeciosas, INSA._Infeções Parasitárias e Fúngicas_ResultadosEntre janeiro de 2008 e dezembro de 2013 foram analisadas, por métodos serológicos e/ou moleculares, amostras biológicas de do-entes com suspeita clínica de leishmaniase. Nos casos em que o quadro clínico foi conhecido, 80% apresentavam esplenomegalia. Destas amostras analisadas, confirmaram-se 37 (17,7%) casos po-sitivos: 26 (70%) por métodos serológicos, 10 (27%) por PCR e 1 (3%) por ambas as metodologias.Na Tabela 1 apresenta-se o número total de casos com quadro clínico suspeito, recebidos no INSA entre 2008 e 2013, e o número de casos com diagnóstico laboratorial confirmado, por ano de diagnóstico.Em relação à distribuição dos casos positivos por distrito de residên-cia, observou-se que a maioria dos doentes residia no distrito de Castelo Branco (24,3%), seguido do distrito de Setúbal (21,6%) e de Faro (10,8%) (Gráfico 1).Dos doentes cujo género foi conhecido, verificou-se que 58,3% (21/36) pertenciam ao género masculino e 41,7% (15/36) ao género feminino. A idade foi conhecida em 33 dos 37 doentes com infeção por Leish-mania sp. Observaram-se 8 casos em crianças: uma criança com 11 meses de idade, cinco com idades compreendidas entre 1 e 4 anos e duas crianças com 14 e 17 anos. Em relação à população adulta, 75,7% (25/33) dos casos ocorreram em doentes com idade igual ou superior a 21 anos, sendo o grupo etário dos 31 aos 50 anos o mais frequente, com 33,3% (11/37) de casos de infeção por Leishmania sp. (Gráfico 2).24www.insa.ptartigos breves_   n. 620142ª sérieespecial 3número:Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IPDoutor Ricardo JorgeNacional de Saúde_Instituto Observações_ Boletim Epidemiológico.i sa.ptTabela 1:      Distribuição dos casos de leishmaniase por ano, 2008-2013.200820092010201120122013Total78393725151520914 (17,9)  7 (17,9)  8 (21,6)2 (8,0)  3 (20,0) 3 (20,0)37 (17,7)Ano Número total de casos analisadosDiagnóstico laboratorial Resultado positivoNº (%) C. BrancoCoimbraFaroLeiriaLisboaPortalegrePortoSantarémSetúbalVila Real24,3%5,4%10,8%5,4%2,7%8,1%5,4%8,1%21,6%8,1%Gráfico 1:      Distribuição dos casos de leishmaniase por distrito de residência, 2008-2013.n=37Gráfico 2:      Distribuição dos casos de leishmaniase por grupo etário, 2008-2013.n=3324,2%3,0 %12,1%3,0%6,1%6,1%33,3%12,1%<11 aos 34 aos 1011 aos 2021 aos 3031 aos 5051 aos 70>70(Gráfico 1) (2,3)_Discussão e conclusãoEntre 2008 e 2013, e segundo o último relatório das Doenças de De-claração Obrigatória 2009-2012 da Direção-Geral da Saúde (DGS), foram notificados 42 casos de leishmaniase (38 confirmados e 4 pro-váveis), sendo a maioria crianças, entre 1 e 4 anos de idade e do sexo masculino (5). Durante os últimos 6 anos (2008-2013), o Laboratório Nacional de Referência de Infeções Parasitárias e Fúngicas do INSA confirmou 37 casos com suspeita clínica de leishmaniase. Apesar de o Laboratório de Referência do INSA não ser o único, a nível nacional, a efetuar o diagnóstico laboratorial pode-se equacionar a existên-cia de subnotificação desta doença, seguindo o descrito por Serra E., ao concluir que, entre 1999-2009, dos 375 indivíduos internados com Leishmaniase visceral em vários hospitais de Portugal continen-tal, 38,6% foram notificados (6). De acordo com os últimos dados da Organização Mundial da Saúde (OMS), em 2011 e 2012, não foram declarados casos de leishmaniase em Portugal, tendo sido notifica-dos 88 casos, entre 2005 e 2010 (7). O relatório anual de 2013 do Eu-ropean Centre for Disease Prevention and Control (ECDC) não refere quaisquer dados sobre a ocorrência de leishmaniase nos países eu-ropeus, informação esta que vem reforçar a hipótese anteriormente levantada relativamente à subnotificação desta parasitose.Em relação ao presente estudo, a maioria dos casos ocorreram em indivíduos com idade igual ou superior a 31 anos, o que é corrobo-rado por Campino L. e Ravel, que afirmaram que esta doença deixou de ser considerada predominantemente infantil e passou a emergir na população adulta jovem, em particular nos indivíduos imunocom-prometidos com coinfecção VIH/SIDA (8, 9).A maioria dos casos positivos confirmados neste estudo foi pro-veniente da Beira Interior (Castelo Branco), seguido da Região de Lisboa e Vale do Tejo (Setúbal e Lisboa) e do Algarve (Faro), o que está de acordo com o estudo realizado por Serrada E., na primei-ra década de 2000, no que respeita à região de Lisboa e Vale do Tejo (6). Contudo, a urbanização/domesticação dos focos zoonó-ticos naturais e a diminuição da população canina nas áreas urba-nas aumenta a vulnerabilidade do homem à infeção acidental (10). As alterações climatéricas/ambientais e socioecónomicas em Portu-gal, assim como a resistência do parasita e do vetor aos fármacos e inseticidas em uso, podem favorecer a emergência e/ou reemergên-cia da leishmaniase no nosso país. Estes factos, associados ao des-conhecimento da população sobre a doença e à sua subnotificação, alertam para a importância de se desenvolver um plano nacional de diagnóstico e de prevenção e controlo, quer do vetor, quer da doença humana e canina em Portugal. _AgradecimentosÀ Doutora Cristina Furtado pela revisão científica do artigo.25www.insa.ptartigos breves_   n. 620142ª sérieespecial 3número:Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, IPDoutor Ricardo JorgeNacional de Saúde_Instituto Observações_ Boletim Epidemiológico.i sa.ptReferências bibliográficas:(1) Antunes F (ed). Manual sobre doenças Infecciosas. Lisboa: Permanyer Portugal, 2003, p. 428-30.(2) Gargaté MJ. Leishmaníase. In: Núncio MS, Alves, MJ (eds). Doenças associadas a ar trópodes vetores e roedores. Lisboa: INSA, IP, 2014, p. 63-69. (3) Ramo A, Farinhote AA. Contribuição para o conhecimento do kala-azar em Portugal. An Inst Med Trop (Lisb). 1952;9(4):1485-1500.(4) Cruz I, Cañavate C, Rubio JM, et al. A nested polymerase chain reaction (Ln-PCR) for diagnosing and monitoring Leishmania infantum infection in patients co-infected with human immunodef iciency virus. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2002;96(Suppl1):S185-9.(5) Direção-Geral da saúde. Doenças de Declaração Obrigatória, 2009/2012. Lisboa: DGS, 2014. (Vol. 1). (6) Serrada E. A leishmaniose visceral em Portugal continental (1999-2009), Lisboa: [s.n.], 2010, p. 75-85. Dissertação de mestrado. (7) World Health Organization. Leishmaniasis [Em linha]. Geneva: WHO, 2014. (Fact sheet n°375). [consult. 2/6/2014]. (8) Campino L. Leishmanioses em Portugal: características emergentes da epidemiologia e do diagnóstico. Lisboa: [s.n.], 1998. Tese de doutoramento.(9) Ravel C, Cortes S, Pratlong F, et al. First repor t of genetic hybrids between two very divergent Leishmania species: Leishmania infantum and Leishmania major. Int J Parasitol. 2006 Nov;36(13):1383-8.(10) Abranches P, Pires CA, Conceição-Silva FM, et al. O kala-azar em Portugal: VI Inquérito epidemiológico realizado na região metropolitana de Lisboa: interpretação da estrutura e dinâmica do foco endémico. J Soc Cienc Med Lisb. 1987;151:364-79.LINKLINKLINKLINK

Leishmaniase: confirmação laboratorial de casos clínicos suspeitos de infeção entre 2008 e 2013

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